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目的 采用改良的λ Red同源重组技术,以减毒沙门菌TT-16(ΔclpP TT-1)为前体菌,构建敲除yejE基因的减毒沙门菌TT-54(ΔclpP ΔyejE TT-1),为后续研究yejE基因的功能奠定基础。方法 (1)将重组质粒PKD46导入减毒沙门菌TT-16(ΔclpP TT-1),获得一次重组受体菌TT-51(ΔclpP PKD46 TT-1);(2)通过PCR扩增获得yejE基因的一次同源重组打靶片段,将其导入TT-51(ΔclpP PKD46 TT-1),利用四环素平板筛选,获得重组菌TT-52(ΔclpP ΔyejE::tetRA TT-1);(3)将重组质粒PKD46导入重组菌TT-52,获得同源重组受体菌TT-53(ΔclpP ΔyejE::tetRA PKD46 TT-1);(4)将PCR扩增获得的yejE基因二次同源重组打靶片段导入TT-53(ΔclpP ΔyejE::tetRA PKD46 TT-1),通过四环素敏感平板筛选,获得敲除了yejE基因的减毒沙门菌TT-54(ΔclpP ΔyejE TT-1)。结果 通过两轮(一次和二次)λ Red同源重组,减毒沙门菌TT-16(ΔclpP TT-1)的yejE基因被成功敲除,PCR及测序鉴定结果符合预期。结论 基于模式菌(大肠杆菌)所构建的λ Red同源重组技术完全适用于沙门菌;通过两轮λ Red同源重组,可实现对沙门菌特定靶基因的无痕敲除。 相似文献
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【目的】 深入探究科技期刊和科技创新生态系统的关系,为科技期刊响应国家号召,高质量、可持续地服务科技创新提供参考。【方法】 基于生态隐喻和模型构建法,构造出科技期刊嵌入的多重复合科技创新生态系统模型,理顺期刊创新运作机制和复合系统构建路径。【结果】 科技期刊被嵌入科技创新生态系统后,形成身兼二任的次生生态,不仅是创新成果作者与多种科技创新主体的接口,而且上下联通不同层级创新生态圈,还衍生出动态自调节、协同共生、交互作用机制。【结论】 科技期刊强力嵌入并高效发挥主观能动性,为科技期刊服务国家科技创新提供全新理论和实践动力,并丰富科技创新生态系统层次、内涵。 相似文献
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《临床与实验病理学杂志》2020,(1):23-23
中文学术期刊论文中英文摘要撰写注意事项:(1)英文摘要应符合英文语法表达,英文摘要中具体内容应与中文摘要一一对应;(2)英文摘要应包括四要素,即目的、方法、结果、结论,其中结果和结论最为重要,请重点描述;(3)英文摘要的句型力求简单,尽量不要使用从句;(4)英文摘要不引用他人观点,非公知、公认的缩写,请在第一次出现时用英文全称;(5)英文摘要中标点请用半角符号,英文中无顿号(、)、分号(;)。 相似文献
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《中国医药指南》2016,(9)
目的研究并构建自发性脑出血患者康复期延续护理方案,为脑出血患者的护理提供理论和实践参考。方法本研究以2013年10月至2014年12月在我院接受过治疗且处于康复期的62例自发性脑出血患者为研究对象,按照护理方法的不同,分为研究组32例和对照组30例。对照组患者康复期给予常规护理,研究组患者康复期除给予常规护理外,还受到延期护理干预。患者出院1年后,对研究组和对照组患者进行回访调查,比较两组患者肢体语言功能恢复、脑出血复发、并发症发生、以及护理满意程度。结果研究组患者在肢体语言功能恢复率和护理满意率方面明显高于对照组,在脑出血复发率和并发症发生率方面明显低于对照组,P<0.05,差异有统计学意义。结论实施延续护理可以有效提高康复期自发性脑出血患者的依从性,有效提高生活质量,因而,延续护理模式应成为医院护理工作的一部分,并进一步规范完善,满足患者的康复需求。 相似文献