WPBL教学模式在医学检验专业教学实践中的应用体会

WPBL教学（网络式PBL教学）是将经典的PBL教学理念与网络技术有机结合而创造的一种新的教育模式。本文通过结合在医学检验专业中应用WPBL教学模式的教学实践,简述了WPBL教学实践的基本流程、WPBL教学模式较经典的PBL教学模式的优势以及WPBL教学过程中教师应该注意的几个问题。     

区域临床检验中心网络化平台的应用与探索

在区域临床检验中心建设进程中,探讨如何通过持续完善网络化服务平台功能,促进医联体检验工作稳步开展,为实现优质、高效的检验服务提供依据与对策。     

羊水间充质干细胞体外培养方案的优化及生物学特性

背景：目前干细胞工程种子来源多样化,羊水中存在胎儿脱落细胞,可分离培养出间充质来源干细胞。目的：探索不同成分培养基对人羊水间充质干细胞（human amniotic fluid-derived mesenchymal stem cells,h-AFMSCs）体外培养的影响,并分析最适培养基体外培养的h-AFMSCs的生物学特性,建立优化的h-AFMSCs培养方案。方法：孕16～24周的孕妇产前检查中获得羊水进行原代及传代培养并采用6种不同的培养基成分对h-AFMSC进行培养。结果与结论：从孕中期羊水中可分离出h-AFMSCs,体外使用低糖DMEM培养基（L-DMEM）＋体积分数10%胎牛血清与合成培养基MESEN PRO体积比1：1配制的培养基对其扩增促进作用最强。h-AFMSCs高表达CD29、CD73、CD90、CD105、CD166,低表达CD14、CD34、CD45及HLA-DR;分离培养的h-AFMSCs高表达的干细胞基因为OCT-4和Nanog;h-AFMSCs体外具有向成骨、成脂细胞分化的潜能且具有抑制淋巴细胞增殖的作用。提示孕中期羊水是低免疫原性的h-AFMSCs的良好细胞来源。     

DcR3表达在肝癌细胞凋亡和增殖中的作用研究

目的通过体外试验探讨诱骗受体3(DcR3)对肝癌细胞凋亡和增殖的影响。方法构建DcR3慢病毒载体和慢病毒非特异性载体,转染HepG2细胞株后,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)判断转染效率。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测DcR3蛋白表达水平;并绘制生长曲线检测细胞增殖情况;采用荧光定量PCR (qPCR)方法检测细胞凋亡指标半胱天冬酶-3 (caspase 3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)转录水平变化。结果检测3株肝癌细胞HepG2、MHCC-LM3和MHCC-97H的DcR3蛋白表达水平,发现细胞株HepG2较MHCC-LM3、MHCC-97H中的DcR3蛋白表达水平明显低,差异具有统计学意义(P0.05)。上调HepG2细胞株的DcR3的mRNA水平后,细胞凋亡指标caspase 3和Bax转录水平明显下降,抗凋亡基因Bcl-2转录水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。当培养到第4天时,LV-DcR3组增殖速度[(39.45±3.61)]与LV-NC组[(25.98±5.34)]比较,差异具有统计学意义(P=0.022);当培养到第6天时,LV-DcR3组增殖速度[(65.84±6.16)]较LV-NC组[(33.34±4.55)],差异有统计学意义(P=0.002)。结论DcR3具有促进肝癌细胞增殖和抗凋亡作用,其机制可能与上调抗癌基因Bcl-2的表达有关。     

Vimentin基因敲除HIV-1 gp120转基因小鼠模型的构建

目的 构建波形蛋白（VIM）基因敲除和gp120转基因（gp120 Tg）小鼠模型。方法 将VIM基因敲除小鼠（VIM-/-）和gp120 Tg小鼠杂交（F0代）,然后在产生的子代（F1）中,取分组为VIM+/-/gp120Tg的小鼠一公一母杂交,得到基因型分别为VIM+/+、 VIM+/-、VIM-/-和VIM+/+/gp120 Tg、VIM+/-/gp120 Tg、VIM-/-/gp120 Tg的6组小鼠。其中VIM+/+、VIM-/-、VIM+/+/gp120Tg和VIM-/-/ gp120这4组小鼠互为对照。用PCR法鉴定这上述6组小鼠的基因型,免疫印迹法检测小鼠脑组织中VIM和gp120的表达情况。结果 4组基因型VIM+/+、VIM-/-、VIM+/+/gp120Tg和VIM-/-/gp120Tg小鼠的PCR结果符合预期,免疫印迹结果显示VIM-/-/ gp120Tg小鼠VIM无表达,gp120过表达（P<0.001）,符合预期结果。结论 成功构建了VIM基因敲除gp120转基因小鼠模型,为深入研究波形蛋白在gp120神经毒性作用中的作用机制提供了坚实的研究基础。     

SBi4211通过抑制S100B/RAGE表达减轻gp120诱导的中枢神经损伤

目的 研究S100B 抑制剂SBi4211（heptamidine）在人类免疫缺陷病毒-1（HIV-1）包膜蛋白gp120损伤中枢神经系统的作用。方法 通过U251细胞和SH-SY5Y细胞建立非接触式星形胶质细胞-神经元共培养体系,由gp120蛋白处理U251细胞激活神经炎症反应造成神经元损伤,体外水平探讨SBi4211在gp120诱导的中枢神经毒性中的作用;体内实验中,以8月龄gp120转基因小鼠模拟HIV相关神经认知障碍（HAND）模型,实验分为对照组、gp120组以及gp120+SBi4211组（SBi4211处理组）。采用CCK-8、流式细胞术检测神经元活性及凋亡情况,ELISA检测S100B及炎症因子IL-6、TNF-α表达水平,Western blot和免疫组织化学染色分析RAGE、GFAP、NeuN、Syn、MAP-2蛋白表达情况。结果 体外实验结果显示SBi4211可以显著抑制gp120刺激后U251细胞S100B、RAGE的表达（P<0.001）,降低炎症因子iNOS、IL-6和TNF-α的表达水平（P<0.001）,维持神经元相关标记蛋白NeuN、Syn的表达（P<0.001）。体内实验结果显示SBi4211显著降低gp120转基因小鼠S100B、RAGE表达及炎症水平（P<0.05）,并且抑制脑内星形胶质细胞活化,保护神经元的完整性（P<0.05）。结论 SBi4211可能通过下调S100B/RAGE表达,抑制gp120引发的神经炎症反应,继而阻断gp120的中枢神经毒性作用。     

自身抗体计算机辅助分析系统的应用和评价

目的：探讨自身抗体计算机辅助分析系统辅助判读自身抗体荧光染色图象的应用价值。方法：根据免疫荧光抗体染色手工流程设计，由初学者在软件知识库和标准图谱辅助下判读503例荧光染色结果，并与两位有经验的检验人员判读结果进行比较。结果：初学者软件辅助判读结果与专业人员判读结果有较好的一致性。以专业人员判读结果为标准，辅助判读的灵敏度为99．1％，特异性95．6％，准确度96．8％。结论：自身抗体计算机辅助分析系统辅助判读自身抗体染色结果，简化了复杂的判读过程，缩短了结果报告时间，使结果判断更客观、更规范，并且大大降低了实验成本。     

番茄红素对人体安全性及抗氧化作用

目的 探讨番茄红素对人体的安全性和抗氧化作用.方法 将120名健康志愿者按血清丙二醛(MDA)含量随机分为试食组和对照组,试食组连续服用番茄红素90 d,对照组服用安慰剂,测定2组人群血清中MDA含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和安全性指标.结果 试食前后,试食组志愿者血清MDA含量分别为4.06和3.61 nmoL/mL,下降11.03％;SOD活性分别为90.7和96.7 U/mL,上升6.80％;GSH-Px活性分别为122.6和136.9 NU/mL,上升11.74％,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);试食前后2组人群各项安全性指标均在正常范围内.结论 番茄红素可提高人体抗氧化能力,且对人体健康无损害.     

乙型肝炎病毒S基因限制性片段长度多态性分型方法的建立及应用

目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)S基因片段聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(RFLP)的基因分型方法并用于基因型与临床疾病谱关系的研究。 方法 比较GenBank中124株各基因型HBV全序列的S基因核苷酸序列及13株单独S基因序列,设计利用限制性内切酶Mbo Ⅰ、BsTN Ⅰ、BsmA Ⅰ、HpaⅡ酶切S基因片段鉴定HBV基因型(A-F)的方法。对贵州地区176份乙型肝炎患者血清进行基因分型并分析基因型与疾病谱的关系。直接测序2份B型和3份C型毒株的PCR扩增产物,以验证本酶切分型方法的正确性。 结果 测序结果证明本方法能够准确鉴定基因型。在176份标本中,B型100份(56.8％),C型76份(43.2％),未发现其他基因型。B型中无症状携带者(ASC)比例(40.0％)高于C型(15.8％),x2=12.16,P<0.005;慢性中度比例(14.0％)低于C型(31.6％),x2=7.88,P<0,005。 结论 本S基因片段PCR-RFLP基因分型方法简便、准确。贵州地区存在HBV B和C基因型。     

DM2患者血清TNF-α与尿m-Alb的关系

糖尿病肾病（DN）是DM2的严重并发症,是患者死亡的主要原因之一。DN发病机制还不完全清楚。近年来研究发现,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在DM及并发肾病早期,其血清以及肾脏局部浓度已有显著变化,从而提示其可能介导了DM2及与DN早期m-Alb尿的关系。