偏侧帕金森病样大鼠脑内移植微囊化牛嗜铬细胞的行为和组织学研究

目的 观察微囊化牛嗜铬细胞(BCC)大鼠脑内移植的效果及微囊的作用.方法 将微囊化或非微囊化BCC和空微囊分别移植于帕金森病(PD)样大鼠脑纹状体内,观察术后阿朴吗啡诱发大鼠异常旋转行为的变化;用蔗糖一磷钾酸-乙醛酸(SPG)荧光染色和HE染色观察脑组织中植入的BCC及微囊的状态.结果 空囊组PD样大鼠异常旋转行为改变不明显(n=6,P>0.05);非微囊组16只PD样大鼠中9只大鼠移植后1周旋转圈数下降到移植前的44.0%～60.9%(P<0.01),移植6个月时仍有BCC在部分受体脑内存活,移植区有较明显的炎性反应,另有7只PD样大鼠移植后异常旋转行为无明显改善(P>0.05),其脑内未见存活的BCC,移植区有较明显的炎性反应;微囊组16只PD样大鼠移植后旋转圈数下降到移植前的17.6%～35.6%(P<0.01),移植后10个月时大鼠脑内仍存在大量存活的微囊化BCC,无明显的炎性反应.微囊化BCC移植改善PD样大鼠异常旋转行为的效果明显优于非微囊者(P<0.01).结论 BCC脑内移植可改善PD样大鼠的异常旋转行为;大鼠旋转行为的改善与BCC在脑内的存活状态有关;海藻酸钠及多聚赖氨酸制作的微囊可降低异种BCC移植的排斥反应发生率.     

TECA-Ⅰ组合型人工肝治疗2例急性肝衰患者

目的观察碳罐吸附加含猪肝细胞的生物型人工肝(BALSS)组成的组合型人工肝支持系统治疗急性肝衰患者的效应.方法病例1为原发性肝癌和肝硬变,行肝动脉栓塞化疗后,出现肝功能不全及肝性脑病.病例2为梗阻性黄疸、肝门部胆管癌并肝左叶转移,行肝门部胆管癌切除和肝左叶切除术后,出现急性肝肾综合征及肝性脑病.给患者建立股静脉循环;全血或血浆先流经含碳罐的血液净化机,再流经TECA-型生物人工肝机的中空纤维管内管腔.1.5×1010个活率为80%的猪肝细胞循环流经BALSS的中空纤维管外管腔.结果病例1经全血活性碳吸附加BALSS治疗2h时,血从129μmol/L降至93μmol/L;GPT从216.8U/L降至.3U/LGOT从377.5U/L降至307.2U/L,TB从.8μmol/L降至172.5μmol/L;DB从72.0μmol/L降至57.6μmol/L;凝血功能亦有改善(PT从19.5到16.从60%到65%从486mg/dL到512mg/dL).患者神智由嗜睡转为清醒.但2.5h时血液循环管道内出现凝血,中止治疗.病例2经血浆活性碳吸附2h,血NH3从134μmol/L降至98μmol/L.随即行血浆BALSS治疗2h时,血氨明显降低(从98μmol/L降至57μmol/L,GPT,GOT,TB,DB,BUN,Cr等亦降低;患者神智由嗜睡转为清醒.BALSS治疗4h时,血氨从57μmol/L降至30μmol/L,GPT从69.0U/L降至26.9UGOT从64.4U降至29.6U/L;TB从495.8μmol/L降至.6μmol/L;DB从240.9μmol/L降至198.0从40.9mmol/L降至36.6mmol/L;Cr651.7mmol/L降至.9mmol/L.BALSS治疗期间,患者血压、心率、呼吸平稳,安返病房.治疗后d3患者神智清楚,血氨在正常水平,但仍少尿.结论组合型人工肝具有良好地暂时替代衰竭肝脏功能的效应,特别是能迅速降低血氨、逆转肝性脑病.     

海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病的实验研究

采用Ｓｕｎ海藻酸钠－多聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊制作技术,分别包裹大鼠胰岛和胰岛素分泌细胞系,移植于糖尿病小鼠腹腔。结果表明ＡＰＡ微囊化大鼠胰岛或胰岛素分泌细胞移植,均可使糖尿病小鼠血糖降低至接近正常水平达３周至１１０天;移植微囊无明显的组织学反应。证明该ＡＰＡ微囊化胰岛细胞移植具有较好的治疗效果,微囊具有较好的生物相容性和免疫隔离作用。为进一步发展生物型人工胰岛奠定了基础。     

骨形态发生蛋白4对胎鼠脑神经元胆碱能表达上调的效应

目的观察了骨形态发生蛋白4(BMP4)对原代分离培养的大鼠脑海马和大脑皮质的神经元胆碱能表达的调节效应。方法将从胎龄2周内大鼠脑海马和大脑皮质分离的细胞培养于含AraC的DMEM/F12培养液中,在光镜下观察细胞的形态特征,并行微管相关蛋白(MAP2)细胞化学染色鉴定。AraC作用96h后,改换成含有BMP4的培养液,继续培养10天,行胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫细胞化学染色和流式细胞术检测。结果从胎龄大鼠海马和大脑皮质分离出的细胞具有典型神经元形态学特征和免疫学标志;加入BMP4组的ChAT阳性细胞比率显著高于未加BMP4的对照组(13.3%±1.37%,6.44%±0.81%,P<0.01)。流式细胞术也测得BMP4组的ChAT阳性细胞比率高于未加BMP4的对照组(11.48%、4.92%)。结论BMP4可体外上调胎鼠海马及大脑皮质神经元的胆碱能表达。     

应用床垫式睡眠监测系统检出睡眠呼吸暂停综合征的200例临床分析

目的应用新型的床垫式睡眠监测系统,在自然睡眠中检出睡眠呼吸暂停综合征。方法采用微动敏感床垫式睡眠监测系统,监测我院健康体检中心受检者在睡眠中的呼吸率、心率、体动、呼吸事件、经皮血氧饱和度及睡眠分期。采用回顾性调查方法,分析自2008年5月～2009年5月间的200例受检者的睡眠呼吸暂停综合征的检出率、程度、病因及并发症。结果200例受检者中197例存在不同程度的睡眠呼吸暂停综合征,其中轻、中、重度患者分别为(42%、25%、31.5%)。该197例患者均为阻塞型睡眠呼吸暂停,未检出中枢型睡眠呼吸暂停;其重度OSAS组受检者的体重指数明显高于轻度组和中度组的BMI(P0.01);其中,伴发高血压者67例(33.5%),冠心病者39例(14.5%),高血脂者14例(0.7%),糖尿病者12例(0.6%)。同时,检出睡眠不实者35例、周期性腿动者28例及睡眠表浅者29例。结论该新型床垫式睡眠监测系统可方便地检出睡眠呼吸暂停综合征患者。临床上OSAS的发生率高,与身高体重指数有一定的相关性。     

脑内移植牛嗜铬细胞对帕金森病鼠行为的影响及单胺类神经递质的变化

我们采用来源广泛的牛肾上腺髓质嗜铬细胞作为多巴胺（ＤＡ）分泌细胞源,观察牛嗜铬细胞异种移植于帕金森病（ＰＤ）鼠脑内对其行为的影响及脑内ＤＡ的变化。一、材料与方法１ＰＤ样大鼠模型的制作：用体重１８０～２５０ｇＳＤ雌性大鼠６０只,麻醉后固定于脑立体定位...     

不同保存时间肾上腺髓质和皮质ATP含量的变化

探讨不同时间冷缺血保存的牛肾上腺髓质和皮质的三磷酸腺苷(ATP)含量变化,寻找合适的保存时间和条件.获取肾上腺后立即放入冷的Locke's液中运回实验室,保存于4℃冰箱,每隔不同时段取材制成匀浆,取上清液-20℃保存待测.利用生物发光法测定牛肾上腺髓质和皮质的ATP含量.结果表明:牛肾上腺髓质ATP:0h为7.537±1.087μmol/g;6h为7.382±1.790μmol/g,降低2.06%;24 h为6.119±0.822μmol/g,降低18.81%;96 h为2.736±0.440umol/g,降低63.70%.牛肾上腺皮质ATP:0h为1.194±0.206μmol/g;6 h为1.087±0.229μmol/g,降低8.97%;24 h为0.842±0.167μmol/g,降低29.49%;96 h为0.663±0.128umol/g,降低44.45%.在固定温度,固定保存液的情况下,组织缺血后,ATP含量短时间内降低不明显,随时间的延长逐渐下降,为分离细胞选择时间提供了功能指标.     

蛛网膜下植入微囊化牛肾上腺嗜铬细胞对癌痛患者脑啡肽含量及镇痛作用的影响

目的：了解海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(APA-BCC微胶囊)植入癌痛患者脊髓蛛网膜下产生镇痛的同时对脑脊液中内源性阿片肽类物质含量的影响。方法：将APA-BCC微胶囊注射入晚期癌症并伴有中、重度疼痛患者的腰段脊髓蛛网膜下腔内；分别采取移植前、移植后6～8d的脑脊液，部分患者又采取了移植后13～17d的脑脊液；用放射免疫法检测脑脊液中亮氨酸脑啡肽(L-EK)、β-内啡肽(β-EP)、强啡肽(DynA)的含量。结果：与移植前比较，移植后患者脑脊液中OEK的含量明显升高，其中移植剂量为1．0&;#215;10^7时，升高最为显著；而移植后脑脊液中β-EP和DynA的含量无明显改变。结论：APA-BCC微胶囊植入对癌痛患者的镇痛效应可能与脑脊液中OEK的含量升高有关。     

蛛网膜下腔植入APA-BCC微胶囊对癌痛患者脑脊液中镇痛相关物质含量的影响

目的观察蛛网膜下腔植入微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(APA-BCC)对癌痛患者中枢内源性脑啡肽类和儿茶酚胺类物质含量的影响。方法随机将不同剂量的APA-BCC植入中、重度癌痛患者的腰段脊髓蛛网膜下腔内;应用放射免疫法检测移植前后脑脊液中亮氨酸脑啡肽(L-EK)、β-内啡肽(β-EP)和强啡肽A(DynA)的含量;应用高压液相法检测去甲肾上腺素(NA)和肾上腺素(AD)的含量;应用NRS法计算癌痛患者的疼痛缓解程度。结果移植APA-BCC后,脑脊液中L-EK含量上升,移植剂量为1.0×10⁷和1.25×10⁷个细胞时,L-EK升高最为显著,分别升高155.27%和154.28%;β-EP、DynA、NA和AD含量无明显改变;完全缓解、部分缓解和无效的患者,L-EK分别升高241.07%、130.45%和115.78%。结论APA-BCC植入对癌痛患者的镇痛效应可能与中枢L-EK含量升高有关;1.0×10⁷和1.25×10⁷可能是较佳的细胞移植剂量。     

微囊化牛肾上腺嗜铬细胞脊髓蛛网膜下移植治疗慢性疼痛患者的初步观察

目的　观察海藻酸钠 -聚赖氨酸 -海藻酸钠 (APA)微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (BCC)异种移植对慢性顽固性疼痛患者的镇痛效应、作用持续时间及毒副作用。方法　用Sun氏微囊制作法将BCC包裹于APA微囊内 ,用常规腰穿法将 5ml微囊化BCC(5～ 7)× 10 6悬液注入患者L3～ 5蛛网膜下。结果　 2 0例中、重度慢性疼痛患者在 1或 2次注射后 ,疼痛迅速减轻 ,疼痛缓解率为 90 %。在未用任何免疫抑制剂的条件下 ,其中 3例停用镇痛药时间超过 2 0 0d。结论　APA微囊化BCC异种移植于慢性疼痛患者脊髓蛛网膜下 ,可安全、迅速、长时间、有效地发挥镇痛作用。