人肝癌细胞RNA电转染至未成熟树突状细胞的扫描电镜观察

目的 观察电转染人肝癌细胞RNA前后未成熟树突状细胞(imDCs)的表面形态学变化.方法 取人外周血,纯化获取单核细胞后诱导其成为imDCs,然后通过电转染方法将人肝癌细胞RNA导入其内;用7种特异性抗体的免疫细胞化学技术对电转染前后的树突状细胞鉴定后,进行扫描电镜观察.结果 电转染人肝癌细胞RNA后imDCs内TERT表达显著增加,其他分子表达无显著改变.电转染前,imDCs多呈圆形、椭圆形或不规则形,体积较单核细胞大,但大小不均,在细胞表面可见长短不一的微绒毛,或/许多泡状、面纱状或云朵状细胞突起;电转染后,可在imDCs表面见到由于电转染所造成的孔,并有一定数量的细胞融合和细胞死亡,但绝大多数细胞可恢复至正常结构状态.结论 电转染打孔可为外源物质(如肝癌细胞RNA或其他肿瘤细胞RNA)导人细胞内提供可行性,并为进一步利用imDCs制作肿瘤疫苗,开展肿瘤的生物治疗提供一种可行方案.     

含白细胞介素-3上清液促进小鼠骨髓基质细胞生长作用的体外观察

在培养液中加入WEHI-3上清液(含白细胞介素-3,IL-3)作为细胞刺激因子培养小鼠骨髓细胞,第6d培养的细胞结果表明,WEHI-3上清液能在体外促进基质细胞贴壁增殖。含20%WEHI-3上清液的实验组细胞数量为1.334×10~6个/L,光镜和扫描电镜下可见各具特征的4种基质细胞:1.类成纤维细胞:胞体呈长梭形,表面有许多丝状和微绒毛样的突起;2.网状细胞:胞体不规则,有树突状突起,偶见有沿突起走行的皱褶;3.类巨噬细胞:胞体椭圆形,细胞内含吞噬颗粒,ANAE阳性,表面有片层样皱褶和长丝状突起;4.脂肪细胞:此类细胞较少见,胞体呈圆形,细胞内含脂质,苏丹黑B染色阳性,表面平滑。同时,光镜和扫描电镜下均可见基质细胞与造血细胞间有密切接触。而对照组贴壁细胞数少,细胞胞体小,且胞质较少,酶活性也差。细胞数仅为58.83/mm~2。扫描电镜下观察,细胞胞体较小,表面低平。本研究结果表明,WEHI-3上清液具有促进小鼠基质细胞生长和增殖的作用,并可引起相应的形态及组织化学改变。     

硒对胃癌大鼠肾上腺皮质3β-HSD和SDH组织化学的影响

目的：观察硒在预防大鼠实验性胃粘膜癌变过程中肾上腺皮质组织化学的变化。方法：用断乳雄性Wistar大鼠，分为盐水对照组、N-甲基N—硝基—亚硝基胍(MNNG)和Selenite十MNNG组，用组织化学和图像分析方法观察大鼠肾上腺皮质的变化。结果：补硒组大鼠肾上腺皮质束状带和网状带细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)和3β—羟基类固醇脱氢酶(3β—HSD)的组化反应减弱，与MNNG组相比有显著性差异，与对照组相比略有增加，但无统计学意义。MNNG组大鼠SDH和3β—HSD的反应增强，与对照组相比有显著性差异。结论：硒在预防大鼠实验性胃癌过程中，可能参与了肾上腺皮质功能的调节。     

量子点体外对小鼠腹腔巨噬细胞细胞化学的影响

目的 探讨量子点(QDs)体外对巨噬细胞细胞化学及酶活性的影响.方法 用倒置相差显微镜、荧光显微镜、细胞化学方法,在细胞水平观察QDs对巨噬细胞的生物相容性及对PAS反应、Feulgen反应、ATP酶、酸性磷酸酶(AcP)、碱性磷酸酶(ALP)、α-醋酸萘酚酯酶(ANAE)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响.结果 3.125mg/L剂量的QDs对巨噬细胞的结构没有影响,但细胞内的细胞化学及酶活性发生了不同的变化,即PAS反应、Feulgen反应、AcP、ALP、ANAE和Mg2 -ATP酶表现为阳性,而SDH、LDH则为阴性.阳性结果中,Feulgen反应、ANAE、ALP和Mg2 -ATP组中QDs组与空白组比较,有统计学意义(P＜0.05),而PAS反应、AcP组中QDs组与空白组比较,无统计学意义(P＞0.05).结论 在细胞学水平上,QDs虽然可以使巨噬细胞内的某些酶发生变化,但不影响其结构及吞噬功能.3.125mg/L剂量的QDs可以很好地应用于生物医学领域标记活细胞,对细胞没有明显的影响.     

人外周血CD4~+树突状细胞的纯化及鉴定

目的　建立人外周血树突状细胞 (dendriticcell,DC)的分离方法 ,观察其形态学和免疫组织化学特点 ,为下一步细胞融合提供DC来源。方法　以免疫磁珠分选法从人外周血单个核细胞中分离CD4 + DC ,流式细胞仪检测所得细胞的纯度 ,光镜、电镜和激光共聚焦扫描显微镜观察其形态 ,SP免疫细胞化学方法检测DC的分子表达。结果　此纯化方法所得细胞纯度可达到 80 %以上 ,形态学观察可见纯化细胞具有典型的DC特征 ,该细胞能高表达HLA DR和S 10 0分子。结论　免疫磁法可获得较高纯度典型DC ,为进一步进行DC与肿瘤的融合实验及临床应用提供了可能     

中线非霍奇金恶性淋巴瘤组织中p53蛋白的表达

中线非霍奇金恶性淋巴瘤（Midlinenon－Hodgkln’sMalignantLymphoma，MNHL）是发生在上呼吸道，包括鼻腔、鼻窦、软硬胯、咽及喉等中线部位的一种结外型肿瘤，其发病原因不明。近年来的研究证实，P53基因突变是许多人类恶性肿瘤发展中常见的基因改变之一。人们发现P53基因的改变与头颈肿瘤的发展和预后有一定关系。我们应用ABC免疫组织化学染色检测MNHL组织中P53蛋白的表达情况，并探讨与MNHL的临床表现、细胞类型、临床分期及恶性程度的关系。1材料与方法1．在材料来源材料取自1991～1997年我院收治的MNHL患者的活俭样本20例，…     

大鼠胰岛移植物制备与异种移植

增加胰岛收获量，提高胰岛纯度一直是胰岛移植中面临的重要问题，本实验经胰管注射胶原酶，胰静止消化分离成年大鼠胰岛纯度一直是胰岛葡聚糖离心纯化。纯化后胰岛收获量为６１０－８２０个／胰纯度达９２％；胰岛形态结构完整，内分泌细胞超微结构保持良好，对葡萄糖刺激反应胰岛素释放量是基本分泌水平的８倍；异种移植可逆转实验性糖尿病小鼠的高血糖达一周。     

无心人胎二例报告

无心胎是一种没有心脏的畸胎,产生于单卵双胎,是较罕见的病例,首次报告于1533年。据Wils-on报导,在世界文献中共有无心胎152例。国内李文佑报告了一例,以后又有人报告过5例。Gillim报导无心胎的发生率为新生儿的1:34,000,占单卵双胎的1％。我们收集到的二例外形奇特的无心胎与以往文献所载不同。     

人肝癌细胞总RNA电转染树突状细胞对T细胞的激活效应

目的：采用Trizol一步法提取人肝癌细胞总RNA电转染人外周血树突状细胞（Dendritic Cell，DC），观察其对混合T淋巴细胞的体外激活效应。方法：通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞，用细胞因子体外培养诱导其成为DC。Trizol一步法提取人肝癌细胞总RNA。通过电转染法将人肝癌细胞总RNA导入DC内；通过混合淋巴细胞实验，获取DC激活的特异性效应T细胞。用MTT法测定效应T细胞的增殖率。结果：电转染方法可将人肝癌细胞总RNA导入DC；电转染前后DC分子表达无显著差异。转染了人肝癌细胞总RNA的DC可特异的激活T细胞且增殖率明显增强（P〈0.05）。结论：电转染为人肝癌细胞总RNA导入DC提供技术上的可行性；转染了人肝癌细胞总RNA的DC可特异激活T细胞。     

量子点对体外培养细胞影响的实验观察

目的观察量子点（QDs）对体外培养细胞的影响。方法选用小鼠巨噬细胞、人肝癌Bel-7402细胞株进行体外培养并实验，设空白对照组和5个剂量实验组，QDs终浓度为3．125、6．25、12．5、25和50μg/mL，采用MTT法观察QDs作用体外培养细胞后细胞成活情况，于酶标仪上测定OD值，并以均数进行F检验。结果量子点浓度小于6．25μg／mL时，实验组与对照组OD值比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论量子点在一定剂量内不影响体外培养细胞的生长。