急性B淋巴细胞白血病自体CD19 CAR-T制备中CD19 CAR转入体系残留白血病细胞的体外研究

目的分析复发/难治性急性B淋巴细胞白血病(R/R B-ALL)自体CD19嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)制备过程中,培养体系中残留白血病细胞导致CD19 CAR转入白血病细胞的特征和体外杀伤研究。方法①收集30例接受CD19 CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者及6例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC);②流式细胞术分析R/R B-ALL患者PBMC经CD3磁珠分选后及体外培养过程中体系白血病细胞残留情况;③患者及健康志愿者PBMC CD3+T细胞转染CD19 CAR及CD22 CAR慢病毒,制备CD19 CAR-T、CD22 CAR-T细胞;④复苏Nalm-6细胞株,CD19 CAR慢病毒转染Nalm-6细胞,制备CD19 CAR-Nalm-6细胞,同时转染患者原代ALL细胞;⑤流式细胞术检测转染率;⑥CCK-8法检测细胞增殖;⑦乳酸脱氢酶(LDH)法检测CD19 CAR-T、CD22 CAR-T细胞对Nalm-6细胞及CD19 CAR-Nalm-6细胞杀伤活性。结果①30例接受CD19 CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者中,2例CD3+T细胞中发现3.32%、2.04%的白血病细胞残留,随体外培养时间延长,在培养第4天,白血病细胞完全消失。②体外培养中CD19 CAR-Nalm-6细胞增殖率高于Nalm-6细胞。③效靶比为1∶1且共培养24、48、72 h,CD19 CAR-T细胞对Nalm-6细胞的杀伤活性高于CD19 CAR-Nalm-6细胞;与CD19 CAR-T细胞相比,CD22 CAR-T细胞对CD19 CAR-Nalm-6细胞的杀伤活性更高。④相同效靶比情况,单独应用CD22 CAR-T细胞对CD19 CAR-Nalm-6细胞的杀伤活性高于CD19 CAR-T联合CD22 CAR-T细胞。结论CD19 CAR-T细胞制备过程中培养体系残留白血病细胞可能会导致CD19 CAR被引入白血病细胞中而导致CD19 CAR-T细胞治疗失败,在细胞制备过程中需要检测培养体系中白血病细胞的残留情况。CD22 CAR-T细胞治疗可作为上述情况的挽救治疗措施之一。     

对比分析经阴道超声、腹部超声对绝经后阴道出血的诊断效果

目的:比较经阴道超声和腹部超声对在绝经后阴道出血中的诊断效果。方法:本次对照实验中,研究对象共有64例,均为存在绝经后阴道出血的患者,在实验开始后,按照数字随机法将其分配为了参照组和研究组,每组32例患者,并使用不同的诊断方法,其中,研究组使用经阴道超声,参照组使用腹部超声,并对比两种不同检测方式的应用效果。结果:研究组中,经阴道超声的诊断准确例数29例,误诊3例,准确率(90.62%);而参照组中,诊断准确数19例,误诊13例,准确率(59.37%)。准确率之间有明显差异,具有可比性,(P<0.05)。结论:通过阴道超声来对绝经后阴道出血患者进行诊断,准确率较高,可有效提高诊断准确率。     

染料木黄酮后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧／复氧损伤的保护作用

目的:研究染料木黄酮后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响.方法:采用人胃黏膜上皮细胞系建立缺氧/复氧损伤模型.实验分为常氧对照组、缺氧/复氧组、染料木黄酮后处理组、DMSO溶剂对照组.各组分别于复氧2,4,8,16 h结束后用MTT法检测细胞存活率;并采用缺氧2h/复氧4 h模型做Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况.结果:MTT检测显示,缺氧/复氧组细胞存活率分别为(64.1±1.7)%,(53.7±1.9)%,(40.8±2.7)%,(33.6±0.9)%,与常氧对照组(100.0±0)%比较,细胞存活率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01).染料木黄酮后处理组(100 umol/L)细胞存活率分别为(80.5±1.3)%,(72.7±1.5)%,(71.3±1.2)%,(55.1±1.0)%,与缺氧/复氧组比较,细胞存活率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01).荧光染色显示,缺氧/复氧组可见较多核致密浓染的凋亡细胞,而染料木黄酮后处理组凋亡细胞明显减少.结论:染料木黄酮后处理通过抑制细胞凋亡对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧损伤产生一定的保护作用.     

辣椒素受体与胃保护

辣椒素受体是机体的一个重要的感受伤害性刺激的信号分子,激活辣椒素受体,可调节胃内感觉传入神经末梢和胃黏膜细胞释放降钙素基因相关肽、P物质等,对多种刺激引起的胃黏膜损伤起到保护作用。因此,辣椒素受体可被作为药物治疗的新靶点,在新药开发中具有重要的潜在价值。主要综述了辣椒素受体的结构和激活,并对近几年辣椒素受体在胃内的分布和保护作用机制研究做了较系统的介绍。