大鼠颈上交感神经节细胞的急性分离及电生理学特性的鉴定

目的 建立大鼠颈上交感神经节细胞的急性方分离法并鉴定其电生理学特性.方法 SD大鼠,雌雄不拘,5～12d龄,断头后,急性分离大鼠的颈上交感神经节,经酶解消化法获得颈上交感神经节细胞.采用全细胞膜片钳技术,于钳制电位-60 mV下,加入100μmol/L乙酰胆碱,记录乙酰胆碱受体电流.采用碳纤维电极技术,于钳制电位760 mV下,加入65 mmol/LKCl,检测儿茶酚胺类物质分泌活动.结果 分离出表面光滑、遮光性较好的颈上交感神经节细胞,并记录到乙酰胆碱受体电流和儿茶酚胺类物质的分泌.结论 急性分离大鼠颈上交感神经节细胞的方法可获得适于膜片钳实验的细胞.     

吸人性麻醉药物的抗炎作用

重大手术创伤、严重外伤、休克、感染、脏器缺血再灌注损伤、内毒素血症是围术期常见的现象,往往导致局部及全身严重的炎症细胞因子反应,炎症反应的过激被认为是造成脏器损伤的重要机制,核转录因子(NFkB)的激活及肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-1β等炎症因子的释放被认为是炎症级联反应的早期始动环节.     

阻塞性黄疸大鼠肝功能和病理形态学研究

目的:探讨胆管阻塞对大鼠肝脏功能和病理形态学的影响.方法:60只健康雄性SD大鼠随机分为6组:胆总管结扎组(BDL,n=50)和假手术组(n=10,仅游离胆总管不予结扎).BDL组据结扎持续时间又分为BDL3、BDL7、BDL14、BDL28和BDL42组(每组10只),分别于术后第3、7、14、28、42日测定血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)、谷丙转氨酶 (ALT)等肝功能指标,并观察肝脏组织病理形态.假手术组于术后7 d行上述检测.结果:与假手术组相比,BDL组大鼠肝脏功能指标明显改变,血清TBIL、DBIL、TBA值在阻塞早期(BDL3 或BDL7 组)为最高,后呈下降趋势,至实验末期(BDL42组)时仍高于对照组;ALT等酶学指标也有类似变化.BDL组大鼠的主要病理形态学改变为肝内小胆管增生和肝纤维化.结论:大鼠肝脏功能阻塞早期即发生明显的损害,机体可产生一定的代偿以改善肝功能,但持续存在的胆管阻塞最终导致肝纤维化.大鼠阻塞性黄疸期内病理形态学的改变显示其肝功能测定值并不能反映其肝脏组织的实际损害程度.     

i-STAT便携式血液分析仪与倍肯野战快速检验背囊在野战应用中的比较

介绍了i-STAT便携式血液分析仪与倍肯野战快速检验背囊的组成和功能以及优点,阐述了i-STAT便携式血液分析仪在“5·12”汶川特大地震后伤员快速检验中的应用情况,并与倍肯野战快速检验背囊相比较,总结了二者在野战快速检验中的优缺点,以利于在野战环境条件下迅速开展检验医学工作,为伤病员的及时救治提供迅速、准确、可靠的检验结果,从而有效地完成卫勤保障任务.     

表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒的构建及其对神经元凋亡的影响

目的 构建表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒,体外观察其抑制内毒素诱导神经元凋亡的效果.方法 合成正、反义寡核苷酸并克隆入pShuttleH1载体,与含caspase-3及绿色荧光增强蛋白序列的质粒pEGFPC1-Cas3共转染293细胞,流式细胞仪分析荧光强度;pShuttleH1-siCas3线性化后转化到含pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中获取重组质粒,脂质体转染293细胞获取重组腺病毒Ad-siCas3;TCIDs.法测定病毒滴度;感染海马神经元,观察内毒素诱导神经元caspase-3 mRNA的表达及凋亡情况.结果 目的基因序列正确,pShuttleH1-siCas3可明显减弱pEGFPC1-Cas3绿色荧光,Ad-siCas3滴度为1.06×1010 pfu/ml.转染病毒的海马神经元内毒素诱导的凋亡效应及caspase-3 RNA的表达明显减弱.结论 成功地构建了表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒,具有良好的抑制神经元凋亡作用.     

核因子kB活性抑制对再灌注早期供肝损伤的保护作用

目的 :研究 NF-κB活性抑制对再灌注早期供肝损伤的保护作用。方法 :改良 Kam ada法建立同种大鼠原位肝脏移植模型 ,实验分对照组和二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,对照组供肝于 4℃乳酸林格液中保存 6 h,PDTC组供肝于乳酸林格冷保存液中加入 0 .1mol/L PDTC,于再灌注早期分析测定供肝组织中 NF-κB的结合活性 (EMSA法 )、TNF-α和 ICAM- 1的 m R-NA转录水平 (RT- PCR)以及 AL T和 L DH的活性变化。结果 :供肝组织的 NF-κB在移植后再灌注早期明显激活 ;再灌注 1h,PDTC组的 NF-κB活性较对照组显著降低 ,但 6 h后两组 NF-κB活性未见明显差异。再灌注早期 TNF-α和 ICAM- 1m RNA转录水平上调以及 AL T和 L DH活性升高 ,但 PDTC组明显低于对照组 (P<0 .0 5 )。结论 :供肝组织中 NF- κB的活性抑制可显著降低再灌注早期供肝组织中炎症介质的转录表达 ,并有效改善供肝的再灌注损伤。针对 NF- κB的靶向治疗可能是供肝保护的一条新途径。     

细胞周期素依赖性蛋白激酶-5参与疼痛、阿片耐受

疼痛及其治疗是临床上的一大难题,主要由于机制不明.Cdk5是一种特殊的细胞周期素依赖性激酶家族,几乎存在于整个中枢和外周神经系统的神经元内.Cdk5作为丝氨酸/苏氨酸激酶,可调节众多底物和蛋白,目前发现在疼痛信号通路及阿片耐受中具有重要作用,可能作为治疗疼痛的新方法,对其在疼痛通路及阿片耐受中作用的深入了解,将有助于解决这一难题.     

胰蛋白酶在胰腺癌疼痛中的作用

目的观察胰腺癌疼痛患者的胰腺肿瘤标本内胰蛋白酶的mRNA及其蛋白的表达。方法取视觉模拟疼痛评分(VAS)在5分以上的胰腺肿瘤患者的新鲜组织标本,采用RT-PCR及ELISA的方法对胰蛋白酶的mRNA及其蛋白的表达进行检测。结果胰腺癌组织中人胰蛋白酶mRNA水平明显高于正常胰腺组织,ELISA显示胰腺癌组织的胰蛋白酶水平明显增高,与正常胰腺组织相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论高水平的胰蛋白酶可能通过激活PAR-2介导胰腺癌疼痛的。     

阿曲库铵在局部静脉麻醉中复合使用的初步尝试

自从有人在两止血带间进行静脉内区域阻滞和在一止血带远段进行动脉内区域阻滞[1]以来,局部静脉麻醉的方法和用药得到不断改进,但局部静脉麻醉尚存在局麻药剂量过大、肌松不足、部分阻滞不全、止血带反应明显、术后立即疼痛及放止血带后易发生局麻药中毒反应等缺陷[2],限制了其广泛应用.     

持续输注小剂量多巴胺对老年患者罗库溴铵肌松作用消退时间的影响

目的 观察持续输注小剂量多巴胺对使用罗库溴铵的老年全麻患者肌松作用消退时间的影响.方法 40例胃肠道手术且全凭静脉麻醉的70～80岁老年患者,随机分为四组,每组10例.A组(1 μg组)、B组(3 μg组)、C组(5 μg组)三组为多巴胺治疗组,进腹常规探查后开始持续静脉输注既定小剂量多巴胺;D组为对照组.术毕各组分别记录罗库溴铵停药时始至拇内收肌TOF值恢复到75%的时间(t)、肌松恢复指数RI(TOF值从25%恢复到75%所用的时间)和MAP.结果 B、C组T、RI明显短于D组(P<0.05).结论 小剂量多巴胺持续静脉输注,可以部分地对抗老年全麻患者术后罗库溴铵清除时间延长的现象.