复发性口疮患者外周血T淋巴细胞亚群及Ig的观察

本文采用酸性α醋酸萘酯酶染色法(简称ANAE)及单向琼脂免疫扩散法对57例复发性口疮(简称RAU)患者的细胞免疫及体液免疫进行了测定。结果表明:(1)复发性口疮患者辅助性T细胞(Th细胞)明显低于正常人(P<0.01)。抑制性T细胞(Ts细胞)明显高于正常人(P<0.01)。Th/Ts比值下降。表明RA患者细胞免疫水平处于抑制状态。(2)血清IgG、IgA、IgM含量均高于正常人。提示:RA的发病机理与自身免疫功能的异常有密切关系。     

关于唾液分泌机制的研究

应用全细胞膜片钳技术（ｐａｔｃｈ—ｃｌａｍｐｗｈｏｌｅｃｅｌｌｒｅｃｏｒｄｉｎｇ）对即刻分离的颌下腺腺泡细胞进行膜电流的测量。实验中发现乙酰胆碱、ＧＴＰ—ｒ—ｓ以及肌醇１．４．５－三磷酸二者均可引起性质相同的、振动性的、内向性的Ｃｌ－离子电流。由于Ｃａ２＋离子螯合剂能够消除三者引起的电流反应，因此这种振动性的Ｃｌ－离子电流是细胞内游离Ｃａ（２＋）离子浓度振动性变化的表示。即乙酰胆碱通过ＧＴＰ结合蛋白的激活，ＩＰ３的产生，引起Ｃａ（２＋）振动。     

依托咪酯对新生大鼠认知功能的影响及其机制研究

目的 探讨新生大鼠依托咪酯麻醉后近远期认知功能及烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）功能的变化。方法 将7 d龄新生大鼠随机分对照组、依托咪酯组、激动剂组,分别单次腹腔注射生理盐水10 ml/kg、依托咪酯5 ml/kg、依托咪酯5 ml/kg+α7nAChR激动剂PNU-282987 5 ml/kg,每组16只。麻醉清醒后2 h和4周,各组随机取8只大鼠进行行为学测试,完成测试后立即取双侧海马组织,采用qRT-PCR和Western blotting检测α7nAChR、乙酰胆碱酯酶（AChE） mRNA和蛋白。结果 麻醉清醒后2 h,依托咪酯组洞板实验探洞次数少于对照组和激动剂组（P <0.05）;3组Y电迷宫实验中正确反应次数和全天总反应时间比较,差异无统计学意义（P >0.05）。麻醉清醒后4周,3组洞板实验探洞次数、Y电迷宫实验中正确反应次数和全天总反应时间比较,差异无统计学意义（P >0.05）。麻醉清醒后2 h,依托咪酯组海马组织α7nAChR mRNA相对表达量低于对照组和激动剂组（P <0.05）,AChE mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和激动剂组（P <0.05）。麻醉清醒后4周,3组α7nAChR、AChE mRNA和蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 新生大鼠依托咪酯麻醉对近期学习记忆能力和远期认知能力无明显影响,但可一过性影响新生大鼠近期探索能力,其机制可能与抑制海马nAChR功能有关。     

α7烟碱型乙酰胆碱受体基因敲除小鼠牙髓炎模型的构建

目的：构建α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotine acetylcholine receptor,α7 nAChR）基因敲除小鼠牙髓炎模型,为研究α7 nAChR在牙髓炎发生发展过程中的作用机制提供实验模型。方法：取16只α7 nAChR基因敲除（knock out,KO）小鼠和16只野生型（wide type,WT）C57BL/6鼠的上颌第一磨牙的牙髓暴露法建立牙髓炎模型,分别在牙髓暴露后1、3、7 d处死小鼠,HE染色、免疫组化检测牙髓组织NOD样受体蛋白3（NOD?like receptor protein 3,NLRP3）表达情况。结果：HE染色结果显示牙髓暴露后1 d,α7 nAChR KO鼠及WT鼠的穿髓孔周围血管充血、组织水肿;牙髓暴露后3 d,炎症细胞聚集,α7 nAChR KO鼠炎症细胞聚集已达冠髓底部,WT鼠的炎症细胞主要聚集在穿髓孔周围的牙髓组织中;牙髓暴露后7 d,α7 nAChR KO鼠的牙髓炎症细胞浸润至根部牙髓,而 WT鼠的牙髓炎症细胞仍然主要聚集于冠髓底部。免疫组化染色结果显示,牙髓暴露后,α7 nAChR KO鼠牙髓NLRP3表达高于WT鼠,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：成功建立了α7 nAChR基因敲除鼠的牙髓炎模型,而且α7 nAChR基因敲除鼠牙髓炎症浸润明显快于WT小鼠。     

α7⁃nAChR通过抑制软骨细胞凋亡延缓小鼠膝骨关节炎关节软骨退变

目的：探讨激活α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7?nAChR）对小鼠骨关节炎（osteoarthritis,OA）软骨细胞凋亡的作用及机制。方法：通过关节腔内注射碘乙酸钠（monosodium iodoacetate,MIA）建立小鼠OA模型。模型小鼠随机分成MIA单独给药组、0.5 mg/kg烟碱（nicotine,Nic）治疗组、1 mg/kg Nic治疗组和Nic +α7?nAChR特异性拮抗剂甲基牛扁碱（methyllycaconitine,MLA）治疗组,对照组小鼠则注射等体积的生理盐水。模型制备后7、14、21 d应用Von Frey纤维丝评价小鼠疼痛行为指标机械缩足反射潜伏期;第21天时处死小鼠,取膝关节标本进行甲苯胺蓝和番红固绿染色,评估膝关节软骨破坏情况并进行关节软骨退变评分;应用原位末端转移酶标技术（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP Nick end labelling,TUNEL）分析关节软骨细胞的凋亡水平;应用免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl?2、Bax、cleaved caspase?9和caspase?9的表达。结果：模型制备后21 d,MIA组小鼠机械缩足反射潜伏期阈值显著下降至（0.28 ± 0.02）g,关节软骨退变评分和蛋白聚糖损失评分分别升高至（5.33 ± 1.19）分和（2.33 ± 0.27）分,关节软骨细胞凋亡率升高至（31.83 ± 3.89）%。而1 mg/kg Nic能显著减轻MIA引起的小鼠膝关节疼痛行为（P < 0.05）,降低MIA诱导的软骨退变（P < 0.05）和关节软骨细胞凋亡坏死（P < 0.05）。进一步机制研究发现,MIA可明显降低Bcl?2的表达,增加Bax和cleaved caspase?9的表达,而Nic治疗组能逆转MIA诱导的软骨细胞凋亡相关蛋白表达的影响,显著升高Bcl?2的表达,降低Bax的表达和cleaved caspase?9/caspase?9的比率（P < 0.05）,上述这些Nic的作用均能被MLA消除。结论：激活α7?nAChR能抑制关节软骨细胞的凋亡,对OA模型小鼠的软骨损伤具有保护作用,其抗凋亡机制可能与线粒体凋亡途径有关。     

血清对氧磷酯酶-1活性与肝硬化Child-Pugh分级的关系

目的 探讨血清对氧磷酯酶-1(PON1)酶活性与肝硬化Child-Pugh分级的关系.方法 以对氧磷(paraoxon)为底物测定76例正常、26例急性肝炎、45例慢性肝炎和72例肝硬化患者血清基础PON-1活性和1 mol/L NaC1刺激后PON1活性;PCR扩增PON1基因,Alw I酶切PCR产物,对PON1基因192位多态性进行分型.结果 正常对照组、急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者血清PON-1基础活性水平分别为403z±145,312±83,201±114,137±99 U/ml;1 m01/L NaC1刺激后PON-1活性分别为673±232,509±139,335±151,233±162 U/ml.与正常对熙比较,急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者血清PON-1活性基础水平和1 mol/L NaC1刺激后PON1活性均显著下降(P<0.01),肝硬化组下降最明显.肝硬化Child A,Child B和Child C组患者血清PON-1活性基础水平分别为185.5±98.6,141.6±93.6,86.7±51.2 U/ml;1mol/L NaC1刺激后PON-1活性分别为308.9±161.3,227.1±116.3,124.9±78.1 U/ml.Child B组比A组PON1酶活性显著下降(P<0.05),而Child C组又比B组PON1酶活性显著下降(P<0.01).在肝硬化Child A,Child B和Child C组患者PON1的192位R-Q多态性分布频率无显著性差异(P>0.05).结论 血清PONl活性下降与肝硬化Child-Pugh分级相关,可反应肝硬化的严重程度,且PON1基因192位多态性不影响肝硬化各组的PONl酶活性.     

重症肌无力的发病机制

重症肌无力(MG)是一种神经-肌肉接头传递功能障碍的自身免疫性疾病。MG的发病机制主要涉及免疫因素和遗传因素。免疫因素包括多种致病抗体、细胞免疫、细胞因子、补体及胸腺等。随着免疫学研究的不断进展,MG的发病机制也有了更深入的研究。     

豨莶草水洗脱部位对人肺纤维细胞的毒性与药效作用

目的 检测不同浓度豨莶草水洗脱部位（SWEF）对MRC-5人肺纤维细胞的毒性作用及对MRC-5细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）表达与炎症因子的影响,从而发现豨莶草毒效与药效作用物质基础。方法 以MRC-5细胞为研究对象,采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法结合流式细胞术、台盼蓝染色判定SWEF（1,6,10,20,50 g·L^-1）对MRC-5细胞的毒效作用;通过测定沉默基因前后α7nAChR的表达及炎症因子水平的变化探讨SWEF对MRC-5细胞的药效作用。结果 SWEF（≥6 g·L^-1）显著降低MRC-5细胞的存活率（P<0.01）,促进MRC-5细胞凋亡与坏死（P<0.01）,其半数抑制浓度（IC₅₀）为6.03 g·L^-1;MRC-5细胞α7nAChR表达与炎症因子检测显示SWEF含有α7nAChR激动剂样物质,该物质可增高α7nAChR基因和蛋白的表达（P<0.05,P<0.01）,降低炎症因子水平（P<0.05,P<0.01）,SWEF下调炎症因子的作用可能与其上调α7nAChR mRNA表达有关,二者呈负相关（P<0.01）。结论 SWEF（≥6 g·L^-1）对MRC-5细胞具有显著的毒性作用,药效作用研究证实SWEF含有α7nAChR激动剂样物质,该物质可增高α7nAChR的表达,降低炎症因子水平,推测过量的α7nAChR激动剂样物质可能为豨莶草的毒性成分之一。     

急性混合细胞白血病无创伤性肺脂肪栓塞综合征致死一例

患者，女，49岁。于2005年4月初无明显原因胸痛，双下肢疼痛。血常规：WBC4．64×10^9／L，Hb127g/L，BPC43×10^9／L，骨髓象：有核细胞增生极度活跃，原始幼稚细胞占0．905，胞体中等大小，不规则，胞核类圆形，核仁数个，胞质少呈深蓝色，全片见巨核细胞20只。过氧化物酶阴性，糖原染色部分颗粒状，少数块状阳性。非特异性酯酶阴性。     

碱性羟胺比色法测定全血乙酰胆碱

碱性羟胺比色法测定全血乙酰胆碱杨会宣，王文学，柯金水，梁欣，董莹，周四元（第四军区大学毒理教研室，西安７１００３２）碱羟胺比色法是测定全血乙酰胆碱（Ａｃｈ）的一种简便方法，鲁祖荪等对此作了报道［１］，认为方法稳定可靠。但我们按报道多次重复测定本地健康...