过氧化氢对体外培养的视网膜色素上皮细胞增殖及DNA合成的影响

目的 探讨过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)对体外培养的人胚胎视网膜色素上皮(RPE)细胞的抑制作用及DNA合成的影响。方法 分别用MTT法测定加入0、50、100、200、400、500μmol/L的H_2O_2作用60h后RPE细胞数量的改变和核酸蛋白分析仪测定加入50、100、200、300、400、500μmol/L H_2O_2作用60h后RPE细胞NDA浓度的变化。结果50、100、200、400、500μmol/L的H_2O_2作用60h后其细胞A值分别为(0.1731±0.0260)、(0.1590±0.0418)、(0.1491±0.0265)、(0.1506±0.0224)、(0.1538±0.0221)与对照组(0.1978±0.0223)相比,差异有显著性(/值分别为1.961、3.082、3.868、3.749、4.932,P值分别为0.054、0.003、0.000、0.000、0.000);50、100、200、300、400、500μmol/L H_2O_2作用60h后其细胞DNA浓度分别为(247.5225±36.8007)、(138.3373±14.6158)、(1043.3095±14.2524)、(85.6586±14.8986)、(70.2618±11.8879)、(56.1955±12.8999)μmol/L,与对照组(293.9311±51.7510)μmol/L相比,差异有显著性(t值分别为3.659、12.376、15.083、16.566、17.791、18.909,P值分别为0.001、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000)。结论H_2O_2能抑制体外培养的RPE细胞增殖及DNA合成。     

玻璃体切割术治疗眼球内异物的临床观察

目的 :评价玻璃体切割术治疗眼内异物伤的疗效。方法 :回顾分析 31例眼球内异物伤行玻璃体切割术患者的临床资料。结果 :异物取出 31眼 ,成功率 10 0 %。术后视力提高 2 0例 ,不变 5例 ,下降 6例。视力 >0 .0 5者 16例。结论 :玻璃体切割术是目前治疗眼球内异物伤的最佳方法。     

吲哚美辛对体外培养的RPE细胞增殖及DNA合成的影响

目的探讨吲哚美辛(IN)对体外培养的人胚胎视网膜色素上皮(RPE)细胞的抑制作用及DNA合成的影响。方法 分别用核酸蛋白分析仪测定加入50、100、200、400、600μmol/L IN作用24 h后RPE细胞DNA质量浓度的变化和MTT法测定加入100、200、400、600、800、1 000 μmol/L IN 12 h后RPE细胞数量的改变。 结果 前者其细胞DNA质量浓度(单位:μg/ml)分别为101.171 2±15.512 4、88.640 0±13.584 5、72.365 1±7.796 9、5.908 9±10.722 9、51.223 6±8.775 7。与对照组21 3.735 1±83.157 2相比,差异有显著性(q值分别为5.481、6.091、6.883、7.490、7.912,P值分别为0.000、0.000、0.000、0.000、0.000);后者其细胞A值分别为0.236 7±0.054 6、0.168 7±0.069 5、0.081 9±0.034 6、0.065 6±0.017 6、0.055 4±0.028 6、0.050 8±0.027 7。与对照组0.267 4 ±0.043 0相比,差异有显著性(q值分别为1.442、4.621、8.682、9.447、9.925、10.140,P值分别为0.158、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000)。 结论 IN可抑制体外培养的RPE细胞的DNA合成及增殖。     

吲哚美辛诱导体外培养的视网膜色素上皮细胞凋亡

目的　探讨用吲哚美辛 ( indomethacin,IN)诱导体外培养的人胚胎视网膜色素上皮 ( retinal pigm entepithelium ,RPE)细胞的凋亡。方法　加入终浓度分别为 10 0、 2 0 0、40 0、 6 0 0μmol· L- 1 的 IN,作用 2 4h;6 0 0μm ol· L- 1 IN作用 6、 12、 2 4h后用透射电镜定性观察凋亡细胞 ,并用吖啶橙荧光染色进行定量和定性分析。结果　经 2 0 0、40 0、6 0 0 μm ol·L- 1 IN作用 2 4h后 RPE细胞凋亡指数分别为 ( 2 7.0 0 0 0± 1.3375 ) % ,( 5 1.0 0 0 0±1.370 3) % ,( 6 8.0 0 0 0± 1.6 86 5 ) %与对照组 ( 2 .0 0 0 0± 0 .42 16 ) %相比 ,差异有显著性( t=4.6 2 4,9.0 6 2 ,12 .2 0 6 ,P=0 .0 0 0 ,0 .0 0 0 ,0 .0 0 0 ) ,随着 IN浓度的增加 ,RPE细胞凋亡数逐渐增多 ;6 0 0μm ol· L- 1 IN作用 12、2 4h后 RPE细胞凋亡指数分别为 ( 44 .0 0 0 0±0 .843 3) % ,( 6 4.0 0 0 0± 1.2 6 49) %与对照组 ( 2 .0 0 0 0± 0 .42 16 ) %相比 ,差异有显著性( t=8.6 17,13.2 74,P=0 .0 0 0 ,0 .0 0 0 )。结论　 IN能诱导体外培养的人胚胎 RPE细胞的凋亡 ,并且 RPE细胞的凋亡呈现出随浓度增加和时间延长凋亡细胞数明显增多。     

糖尿病视网膜病变患者视网膜新生血管形态与激光治疗效果的关系

目的探讨糖尿病视网膜病变患者视网膜新生血管形态与激光治疗效果的关系。 方法对2009年1月至2012年11月就诊接受激光治疗的糖尿病视网膜病变患者362例587眼,使用Zeiss Visucam型眼底造影机采集视网膜新生血管的形态、面积和分布,将视网膜新生血管按形态分为4个类型：隐匿型、轻型、中型、重型。隐匿型采用全视网膜激光光凝术,其余采用超全视网膜激光光凝术,记录患者激光治疗参数、激光治疗前后视力、眼压和眼底的动态变化,进行为期9～12个月随访,总结不同类型新生血管对激光治疗的反应和预后。采用SPSS16.0统计软件进行数据处理,临床疗效采用行×列表的χ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果糖尿病视网膜病变患者不同视网膜新生血管类型激光治疗的有效率：视力维持或提高：(1)隐匿型：77.3%;(2)轻型：56.7%;(3)中型：41.0%;(4)重型：17.2%;新生血管消退且无灌注区减少：(1)隐匿型：42.3%;(2)轻型：34.9%;(3)中型：16.9%;(4)重型：5.4%。 结论糖尿病视网膜病变患者视网膜激光治疗的预后,与视网膜新生血管的不同类型相关,及时进行视网膜激光治疗是挽救患者视力的关键。     

晶状体上皮细胞凋亡与过氧化氢诱导白内障形成研究

目的 探讨晶状体上皮细胞凋亡与皮质性白内障形成的关系。方法用200μmol／L过氧化氢(H2O2)诱导离体兔晶状体白内障形成,TUNEL法检测H：0：作用1,6,18,24,48h的晶状体上皮凋亡细胞,同时测定晶状体超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果H2O2作用1h,晶状体保持透明,未发现凋亡上皮细胞。随着作用时间的延长,凋亡上皮细胞数量逐渐增多,晶状体逐渐变混浊。SOD活性早期无变化,18h后逐渐降低。结论晶状体上皮细胞凋亡是皮质性白内障形成的细胞学基础,其发生先于晶状体抗氧化机制的变化。     

神经生长因子对过氧化氢诱导人胚胎视网膜色素上皮细胞凋亡的保护作用

目的　探讨神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)对体外培养的人胚胎视网膜色素上皮 (human fetal retinal pigm ent epithelium,h FRPE)细胞凋亡的保护作用。方法用传代培养的 h FRPE细胞 ,30 0、5 0 0 μmol· L- 1 过氧化氢 (hydrogen peroxide,H2 O2 )建立诱导的 h FRPE细胞凋亡模型 ,并用吖啶橙 (acridine orange,AO)荧光染色计数和透射电镜 (transmission electron microscope,TEM)观察 NGF对凋亡细胞的保护作用。结果　用AO荧光染色及 TEM均观察到经 30 0、5 0 0μmol· L- 1 H2 O2 处理 6 5 h后的 h FRPE细胞出现典型的凋亡形态学改变。 30 0μm ol· L- 1 H2 O2 作用 6 5 h后 h FRPE细胞凋亡指数为4 5 .6 2 %± 1.4 1%和 30 0μmol· L- 1 H2 O2 +40 0μg· L- 1 NGF作用 6 5 h后的 h FRPE细胞凋亡指数 2 2 .79%± 1.30 %相比 ,差异有显著性 (q=4 .84 4 5 ,P=0 .0 0 0 0 ) ;5 0 0μmol· L- 1H2 O2 作用 6 5 h后 h FRPE细胞凋亡指数为 6 6 .2 2 %± 1.86 %和 5 0 0 μm ol· L- 1 H2 O2 +40 0 μg· L- 1 NGF作用 6 5 h后的 h FRPE细胞凋亡指数 4 2 .5 6 %± 1.2 1%相比差异有非常显著性的意义 (q=5 .114 2 ,P=0 .0 0 0 0 )。结论　 NGF能拮抗 H2 O2 诱导的 h FRPE细胞凋亡     

眼眶内巨大植物性异物一例

1病例 患者男，20岁，山西大同人。2005年5月24日转诊到北京大学眼科中心住院。主诉14小时前骑摩托车摔入沟中被枯树枝插和右眼，当时无意识丧夫，在当地医院行CT检查，示右眼眶内异物（图1），右眼视神经挫伤，右筛骨、蝶骨骨折，大脑额叶挫裂伤。入院后检查：患者意识清醒，情绪烦躁不安。     

N-甲基-D-门冬氨酸诱导体外培养的视网膜色素上皮细胞凋亡

目的　探讨用N-甲基-D-门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)诱导体外目的　探讨用 N-甲基 -D-门冬氨酸 (N-methyl-D-aspartate,NMDA)诱导体外培养的人胚胎视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)细胞的凋亡。方法　加入终浓度分别为 1 0、50、1 0 0、2 0 0、3 0 0 μmol· L-1的 NMDA作用 72 h;3 0 0 μmol· L-1NM-DA作用 1 2、2 4、3 6、48、72 h后用透射电镜定性观察凋亡细胞 ,并用吖啶橙荧光染色进行定量和定性分析。结果　经 2 0 0、3 0 0 μmol· L-1NMDA作用 72 h后 RPE细胞凋亡指数分别为 (51 .0 0 0± 1 .4491 ) %和 (74.0 0 0± 1 .71 2 7) %与对照组 (2 .0 0 0 0± 0 .42 1 6) %相比 ,差异有显著性 (t=1 0 .0 66、1 4.790 ,P=0 .0 0 0、0 .0 0 0 ) ,随着 NMDA浓度的增加 ,RPE细胞凋亡数逐渐增多 ;3 0 0 μmol·L-1NMDA作用 2 4、3 6、48、72 h后 RPE细胞凋亡指数分别为(9.0 0 0 0± 0 .73 79) %、 (1 3 .0 0 0 0± 1 .0 593 ) %、(2 5.0 0 0 0± 0 .70 71 ) %、(53 .0 0 0 0±0 .82 3 3 ) %与对照组 (2 .0 0 0 0± 0 .42 1 6) %相比差异有显著性 (t=2 .0 1 4、3 .1 65、6.61 8、1 4.676,P=0 .0 50、0 .0 0 3、0 .0 0 0、0 .0 0 0 )。结论　 NMDA能诱导体外培养的人胚胎 RPE细胞     

神经生长因子对N-甲基-D-门冬氨酸诱导人胚胎RPE细胞凋亡的保护作用

目的 探讨神经生长因子(NGF)对体外培养的人胚胎视网膜色素上皮(hFRPE)细胞凋亡的保护作用。方法 将传代培养的hFRPE细胞,用200μmol/L,300μmol/L N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)建立诱导的hFRPE细胞凋亡模型,并用吖啶橙(AO)荧光染色计数和透射电镜(TEM)观察NGF对凋亡细胞的保护作用。 结果 用AO荧光染色及TEM均观察到经200 μmol/L,300μmol/L NMDA处理72 h后的hFRPE细胞出现典型的凋亡形态学改变。200μmol/L.NMDA作用72 h后hFRPE细胞凋亡指数为(32.587 9±1.488 0)％和200 μmol/L NMDA+300 μmg/L NGF作用72 h后的hFRPE细胞凋亡指数(20.768 7±1.302 4)％相比,差异有显著性(q=2.941 4,P=0.005 0);300 μmol/L NMDA作用72 h后hFRPE细胞凋亡指数为(42.506 4±3.014 8)％,与300 μmol/L NMDA+300 μg/L NGF作用72 h后的hFRPE细胞凋亡指数(25.687 2±1.8974)％相比,差异有非常显著性的意义(q=4.117 8,P=0.000 0)。 结论 NCF能拈抗NMDA诱导的hFRPE细胞凋亡。