miR-590-5p介导lncRNA SNHG1信号影响卵巢癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨miR-590-5p在卵巢癌组织中的表达情况以及其对卵巢癌细胞增殖的影响及作用机制。方法:Real-time PCR和双荧光素酶实验确定miR-590-5p与lncRNA SNHG1之间的调控作用。Real-time PCR检测卵巢癌、癌旁组织以及卵巢癌细胞中miR-590-5p的表达。分别采用NC mimic或者miR-590-5p mimic转染两株卵巢癌细胞，CCK-8检测各组细胞的增殖情况。此外，Real-time PCR检测两株细胞中SOX2、RECK和YAP1的表达。结果:Real-time PCR结果显示下调SNHG1后miR-590-5p的表达显著升高。双荧光素酶结果显示转染miR-590-5p mimic和野生型SNHG1片段的细胞中荧光素酶的活性显著降低。此外，Real-time PCR结果显示miR-590-5p在卵巢癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织。CaOV3、OV-90细胞中miR-590-5p的表达水平明显低于其他卵巢癌细胞。转染miR-590-5p mimic显著上调了CaOV3、OV-90细胞中miR-590-5p的表达并且抑制了这两株细胞的增殖，同时抑制了两株细胞中SOX2、RECK和YAP1的表达。结论:miR-590-5p的低表达与卵巢癌的进展密切相关，miR-590-5p能够介导SNHG1信号并且通过对其下游靶基因的调控抑制卵巢癌细胞的增殖。     

miR-30c Impedes Glioblastoma Cell Proliferation and Migration by Targeting SOX9

miR-30c has been acknowledged as a tumor suppressor in various human cancers, such as ovarian cancer, gastric cancer, and prostate cancer. However, the role of miR-30c in glioblastoma (GBM) needs to be investigated. In our study, we found that the expression of miR-30c was significantly downregulated in GBM tissues and cell lines. We found that overexpression of miR-30c inhibited cellular proliferation of GBM cells in vitro and in vivo. More GBM cells were arrested in the G₀ phase after miR-30c overexpression. Moreover, we showed that miR-30c overexpression suppressed the migration and invasion of GBM cells. Mechanistically, we found that SOX9 was a direct target of miR-30c in GBM cells. Overexpression of miR-30c inhibited the mRNA and protein levels of SOX9 in GBM cells. Moreover, there was a negative correlation between the expression of miR-30c and SOX9 in GBM tissues. Finally, we showed that restoration of SOX9 in GBM cells reversed the proliferation, migration, and invasion of GBM cells transfected with miR-30c mimic. Collectively, our results demonstrated that miR-30c suppressed the proliferation, migration, and invasion of GBM cells via targeting SOX9.     

miR-548d抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移

目的:探讨miR-548d对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:通过Real time PCR及Western blot检测miR-548d和KRAS在30例骨肉瘤组织以及293、MG63和U2OS细胞中的表达情况。对30例骨肉瘤组织中miR-548d和KRAS含量的相关性进行分析，随后通过报告基因实验印证miR-548d对KRAS的靶向作用。MG63细胞中分别过表达或沉默miR-548d后，通过Western blot实验分析KRAS的变化情况，MTT实验观察miR-548d对细胞增殖的影响，Transwell实验观察miR-548d对其迁移能力的影响。结果:骨肉瘤组织及细胞中miR-548d表达较低，KRAS表达较高。在骨肉瘤组织中miR-548d与KRAS的表达呈负相关。报告基因实验证明miR-548d可以直接打靶KRAS。Western blot指出miR-548d可以抑制KRAS的表达。最后MTT和Transwell实验指出miR-548d可以抑制MG63细胞的增殖与迁移。结论:miR-548d可以通过打靶KRAS抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移。     

单羧酸转运蛋白1促进胰腺导管癌细胞浸润转移的机制研究

背景与目的：单羧酸转运蛋白1（monocarboxylate transporter 1，MCT1）是细胞转运乳酸、丙酮酸等代谢产物及能量物质的一种重要蛋白质，其在胰腺导管癌中的作用及机制鲜有研究报道。该研究旨在探讨MCT1在胰腺导管癌中的表达及临床病理学意义。方法：纳入78例胰腺导管癌患者的癌组织及癌旁正常组织，运用免疫组织化学技术检测MCT1在癌组织和癌旁正常组织中的表达水平并分析其临床病理学意义。在体外细胞系水平上，我们运用胰腺癌细胞系PANC-1和Capan-1，运用细胞克隆形成实验、细胞划痕和Transwell实验分析沉默MCT1后胰腺癌细胞增殖、迁移和浸润的改变。为明确MCT1的相关作用机制，我们通过生物信息学分析，预测miR-124-3p是MCT1的潜在调控微小RNA；为了进一步验证，我们运用双荧光素酶报告实验分析miR-124-3p对MCT1的调控效果；运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）分别检测51对新鲜胰腺癌组织中MCT1和miR-124-3p的基因表达并分析两者的相关性。结果：MCT1的阳性表达主要位于细胞膜和细胞质。相比癌旁正常组织，MCT1在胰腺导管癌组织中显著高表达，其表达水平与胰腺导管癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移和不良预后具有显著相关性。在体外细胞系水平上，沉默MCT1能够显著抑制胰腺癌细胞系PANC-1和Capan-1的增殖、迁移和浸润；miR-124-3p在胰腺癌组织中显著低表达，并且与MCT1 mRNA的表达具有显著负相关性，能够负调控MCT1的蛋白表达。结论：MCT1是胰腺导管腺癌的致癌基因，miR-124-3p能够负调控MCT1的表达。     

半伸膝位髌旁关节外入路髓内钉内固定治疗胫骨干骨折

目的探讨半伸膝位髌旁关节外入路髓内钉内固定治疗胫骨干骨折的疗效。方法2018 年 7 月—2019 年 9 月，应用半伸膝位髌旁关节外入路髓内钉内固定治疗 22 例胫骨干骨折患者。男 15 例，女 7 例；年龄 25～68 岁，平均 46.4 岁。致伤原因：摔伤 7 例，交通事故伤 14 例，重物砸伤 1 例。闭合性骨折 16 例，开放性骨折 6 例。胫骨干骨折 AO 分型：42-A1 型 4 例，42-A2 型 2 例，42-A3 型 3 例，42-B2 型 3 例，42-B3 型 4 例，42-C1 型 2 例，42-C2 型 3 例，42-C3 型 1 例。合并腓骨骨折 20 例。受伤至手术时间 2～15 d，平均 7.5 d。记录骨折愈合时间、术后并发症及膝前痛发生情况，末次随访时采用 Lysholm 评分评价膝关节功能。结果手术时间 50～140 min，平均 85 min。术后 2 例切口有渗出，经对症处理后愈合；其余患者切口均Ⅰ期愈合。患者均获随访，随访时间 8～23 个月，平均 14.9 个月。X 线片复查示骨折均愈合，愈合时间 12～20 周，平均 14.4 周。4 例（18.18%）患者出现膝前痛。随访期间均未出现髌股关节不稳定表现。末次随访时，膝关节功能 Lysholm 评分为 85～100 分，平均 94.3 分。结论半伸膝位髌旁关节外入路髓内钉内固定治疗胫骨干骨折，既能对骨折有效固定，又能避开髌下入路植钉存在的骨折端再次移位、多发膝前痛等问题，是一种有效的治疗方法。     

臀部筋膜脂肪瓣修复坐骨结节和大转子复发性窦道型压疮

目的总结臀部筋膜脂肪瓣修复坐骨结节、大转子复发性窦道型压疮的效果。方法2018 年 2 月—2019 年 6 月，收治 12 例 13 处长期截瘫伴坐骨结节、大转子复发性窦道型压疮患者。其中男 10 例 11 处，女 2 例 2 处；年龄 46～56 岁，平均 51 岁。截瘫 10～20 年，平均 13 年；所有患者均有压疮手术史，术后 3 个月～12 年复发。其中坐骨结节处压疮 11 例，坐骨结节合并大转子处压疮 1 例。创面清创、切除窦道假性滑液囊，采用单侧或双侧臀部筋膜脂肪瓣填塞窦道，术区一期缝合闭合切口。结果术后 13 处压疮切口均Ⅰ期愈合，局部无红肿、渗液，术后 14 d 拆线出院。术后局部平坦，外观理想。术后患者均获随访，随访时间 8～24 个月，平均 14 个月。随访期间压疮均无复发。结论臀部脂肪组织丰富，利用筋膜脂肪瓣修复坐骨结节、大转子复发性窦道型压疮设计、操作简便，临床效果良好。     

踇甲皮瓣联合腓动脉穿支皮瓣游离移植再造拇指并修复足部供区 15 例

目的总结应用踇甲皮瓣再造拇指及腓动脉穿支皮瓣游离移植修复足部供区的手术方法及临床效果。方法2016 年 6 月—2018 年 5 月，应用踇甲皮瓣联合腓动脉穿支皮瓣游离移植再造拇指并修复足部供区 15 例。男 10 例，女 5 例；年龄 21～48 岁，平均 34.6 岁。致伤原因：重物压砸伤 7 例，机器绞伤 5 例，电锯切割伤 3 例。Ⅰ度缺损 9 例，Ⅱ度缺损 6 例。入院至皮瓣手术时间 4～7 d，平均 5.2 d。结果术后踇甲皮瓣及腓动脉穿支皮瓣全部成活，切口均Ⅰ期愈合。患者均获随访，随访时间 8～24 个月，平均 16.4 个月。末次随访时，再造拇指指甲生长平整，有光泽，指腹饱满；足部皮瓣外形良好，颜色及质地接近受区。根据中华医学会手外科学会拇手指再造功能评定标准，获优 9 例、良 6 例；根据 Maryland 足功能评分标准，获优 10 例、良 5 例。患者行走步态正常，无跛行及疼痛不适。结论踇甲皮瓣修复拇指Ⅰ、Ⅱ度缺损，再造拇指可获得良好外观及功能；腓动脉穿支皮瓣具有血供可靠、血管恒定、易切取等优点，可有效修复足部供区。     

单纯 Ilizarov 环形外固定技术治疗合并骨筋膜室综合征的胫骨平台骨折

目的探讨单纯 Ilizarov 环形外固定技术治疗合并骨筋膜室综合征的胫骨平台骨折的疗效。方法2013 年 9 月—2017 年 3 月，收治 30 例合并骨筋膜室综合征的胫骨平台骨折患者，采用单纯 Ilizarov 环形外固定技术治疗。男 23 例，女 7 例；年龄 23～43 岁，平均 34.4 岁。致伤原因：交通事故伤 12 例，高处坠落伤 4 例，摔伤 8 例，重物砸伤 6 例。受伤至入院时间 1～12 h，平均 4.8 h。骨折 Schatzker 分型：Ⅱ型 1 例、Ⅲ型 3 例、Ⅳ型 10 例、Ⅴ型 7 例、Ⅵ型 9 例。30 例均因骨筋膜室综合征行切开减压；切开减压至手术时间为 10～15 d，平均 12.5 d。治疗后采用膝关节学会评分系统（KSS）及 Ilizarov 方法研究与应用协会（ASAMI）协议评价膝关节功能。结果手术时间 110～155 min，平均 123.1 min；术中出血量 100～500 mL，平均 245 mL；术后住院时间 3～5 d，平均 3.8 d。患者均获随访，随访时间 20～24 周，平均 22.7 周。除 2 例患者出现针道感染征象外，无其他并发症发生。X 线片复查显示骨折均愈合，愈合时间 10～20 周，平均 14.6 周。末次随访时，膝关节 KSS 临床评分总分为 70～95 分，平均 87.5 分；功能评分总分为 70～90 分，平均 79.0 分。参照 ASAMI 协议评价获优 24 例、良 3 例、可 2 例、差 1 例。结论对于合并骨筋膜室综合征的胫骨平台骨折，单纯 Ilizarov 环形外固定技术治疗后患者关节功能可以基本恢复且并发症少，是一项相对安全、有效的治疗方法。     

miR-147对胶质瘤U87细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的:比较胶质瘤患者胶质瘤组织和瘤旁组织中miR-147表达水平的差异性，进一步分析miR-147与胶质瘤细胞生物学活性的相关性。方法:通过实时荧光定量PCR检测65例胶质瘤患者瘤组织和瘤旁组织中miR-147的表达水平；采用Lipofectamine 2000转染法转染胶质瘤细胞，分为miR-147 mimics组和NC组，检测两组转染效率；进一步通过CCK-8实验、流式细胞实验和Transwell实验比较两组细胞生物活性。结果:胶质瘤组织中miR-147表达水平显著低于瘤旁组织；与NC组比较，miR-147 mimics组细胞不论是增殖能力还是侵袭能力都明显降低，但是，miR-147 mimics组的细胞凋亡率升高。结论:胶质瘤组织中存在miR-147低表达的现象。miR-147在胶质瘤细胞中表达升高能够抑制细胞的增殖能力、降低其侵袭能力，并促使更多的细胞发生晚期凋亡。miR-147可能在胶质瘤中扮演着抑癌基因的重要角色。     

股直肌斜切在复杂人工全膝关节置换术中的应用

目的探讨复杂人工全膝关节置换术（total knee arthroplasty，TKA）中采用股直肌斜切辅助显露的安全性及有效性。方法回顾分析 2016 年 1 月—2017 年 5 月，采用股直肌斜切辅助显露的 19 例（29 膝）复杂 TKA 患者临床资料。其中男 9 例（13 膝），女 10 例（16 膝）；年龄 34～66 岁，平均 50.2 岁。强直性脊柱炎 4 例（8 膝），类风湿性关节炎 5 例（7 膝），膝关节骨关节炎 10 例（14 膝）。病程 8～15 年，平均 10.9 年。Kellgren-LawrenceⅢ级 12 膝，Ⅳ级 17 膝。患者膝关节活动度为（19.86±7.23）°，膝关节学会评分系统（KSS）临床评分（47.86±11.26）分、功能评分（15.52±11.21）分。术后随访纳入并发症、膝关节活动度、KSS 评分、伸膝迟滞发生情况及假体松动情况。结果术后切口均Ⅰ期愈合，无感染及心脑血管意外等并发症发生。患者均获随访，随访时间 25～39 个月，平均 30.3 个月。末次随访时，患者膝关节活动度为（91.03±7.30）°，KSS 临床评分为（83.62±9.99）分、功能评分为（66.38±7.89）分，均较术前明显改善，差异有统计学意义（P<0.05）。3 膝出现伸膝迟滞，分别迟滞 10°、10°、15°。X 线片复查未见假体位置不良、松动及病理性透亮线。 结论复杂 TKA 中采用股直肌斜切能有效显露膝关节术野，减少髌腱撕脱、髌骨骨折以及股四头肌肌腱损伤等并发症的发生；采用 Krackow 肌腱缝合法修复切断的股直肌有利于术后早期膝关节功能锻炼及恢复，而且不会增加并发症发生风险。