人骨髓间充质干细胞向成骨细胞的诱导分化

目的诱导人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。方法体外分离培养人骨髓间充质干细胞，将其分为对照组和诱导组两组。诱导组加入地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸，诱导成骨。采用免疫荧光染色的方法检测碱性磷酸酶（AKP）和骨桥蛋白（0PN）的表达；并通过RT-PCR检测骨桥蛋白mRNA的表达；利用硝酸银染色和茜素红染色两种特殊染色方法检测钙盐沉积。结果经诱导，诱导组细胞在呈典型的成骨细胞形态并有钙结节形成；免疫荧光染色结果显示诱导组细胞AKP和OPN均为强阳性表达，RT-PCR结果也显示诱导组细胞骨桥蛋白mRNA表达；两种特殊染色结果显示诱导组细胞有大量的钙盐沉积。而对照组细胞无上述形态改变和表达。结论人骨髓间充质干细胞在一定的诱导条件下能向成骨细胞分化。     

骨桥蛋白在低钙和燃煤污染型氟中毒大鼠肾组织中的表达

目的 观察骨桥蛋白(OPN)在低钙和氟中毒大鼠肾组织中的表达,探讨OPN与氟中毒肾损害的关系.方法 1月龄Wistar大鼠48只,雌雄各半,体质量80～100 g.按2×2析因设计将大鼠按质量随机分为4组:对照组、高氟组、低钙组、低钙高氟组,每组12只,雌雄各半.采用合成饲料喂养,高氟组和低钙高氟组饲料中的玉米来自燃煤污染型氟中毒病区,含氟量为100 mg/kg,对照组和低钙组饲料中的玉米来自于非病区,含氟量为5 mg/kg.喂养16周后处死大鼠,观察各组大鼠牙齿变化,计算大鼠氟斑牙检出率.取大鼠肾脏,采用RT-PCR技术及免疫组化技术检测大鼠肾脏OPN蛋白和OPN mRNA表达.结果 对照组和低钙组牙齿生长良好,高氟组、低钙高氟组大鼠均出现明显的氟斑牙,氟斑牙检出率为100%.免疫组化结果表明,OPN主要定位于肾组织的肾小管上皮细胞中.对照组和低钙组肾组织OPN阳性细胞淡染、散在分布,高氟组与低钙高氟组OPN阳性细胞着色较深,广泛分布在肾小管上皮细胞中.OPN蛋白表达显示,高氟组(168.64±13.21)和低钙高氟组(169.26±8.92)高于对照组(145.78±10.26,P均<0.01)和低钙组(149.60±16.84,P均<0.01);OPN mRNA表达显示,高氟组(1.89±0.37)和低钙高氟组(1.94±0.22)高于对照组(1.32±0.26,P均<0.05)和低钙组(1.30±0.18,P均<0.05).高氟影响OPN蛋白和OPN mRNA表达(F=13.821、4.24,P均<0.05),低钙不影响OPN蛋白和OPN mRNA表达(F=2.164、0.58,P均>0.05),但高氟和低钙联合作用时,二者对OPN蛋白和OPN mRNA表达有交互作用(F=6.257、4.32,P均<0.05).结论 过量氟可促使大鼠肾组织的OPN表达增加,提示OPN与氟中毒肾损害程度密切相关,可考虑作为一种氟中毒肾损害的标志,并且,高氟与低钙同时存在时,大鼠肾损害会进一步加重,提示低钙是氟化物损害肾脏的重要环节.     

丙酸氟替卡松对鼻黏膜上皮细胞表达的天然免疫分子的免疫调节作用

目的 检测丙酸氟替卡松对人鼻黏膜上皮细胞表达天然免疫分子的影响.方法 采用丙酸氟替卡松和/或聚肌胞苷酸( Polyinosinic:polycytidylic acid,Poly I∶C)、细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)等刺激离体培养的鼻黏膜上皮细胞后,通过实时定量PCR检测Toll样受体...     

骨桥蛋白与VEGF在增生性糖尿病视网膜病变玻璃体液中的表达

目的:探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy PDR)中的作用,并初步分析OPN及VEGF与PDR间的相关关系,为研究PDR的发病机制、预防及治疗提供实验依据和理论基础。方法:取2008年3月至2008年12月间PDR 28例(PDR组)和特发性黄斑裂孔(IMH)24例(IMH组)患者的玻璃体液样本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量测定玻璃体液中OPN及VEGF浓度,应用SPSS 11.5统计学软件进行数据分析。结果:PDR组玻璃体液中OPN浓度为(883.39±151.12)ng.ml-1,VEGF浓度为(1 158.68±140.98)pg.ml-1;IMH组OPN浓度为(537.88±166.37)ng.ml-1,VEGF浓度为(295.91±109.62)pg.ml-1。PDR组较IMH组不仅OPN表达增高(P<0.01),VEGF也表达增高(P<0.01);PDR组玻璃体液中OPN浓度与VEGF...     

OPN基因沉默抑制MKN28细胞生长、侵袭及凋亡

目的 检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对人胃癌细胞MKN28生长、侵袭及凋亡的影响.方法 利用脂质体转染的方法,进行胃癌转移相关基因骨桥蛋白(OPN)的siRNA,并通过荧光定量PCR以及免疫荧光的方法,进行siRNA效果鉴定.根据siRNA的抑制效果,将细胞分为正常对照组、非特异干扰组、特异干扰24 h组、特异干扰36 h组和特异干扰48 h组,比较对照组与不同siRNA作用时间组的细胞增殖、细胞凋亡、迁移黏附能力的改变.结果 siRNA 作用48 h组,OPN的表达最低;相应地,其细胞活力降低,增殖抑制率达30.20%,迁移黏附能力降低,基质膜上的细胞数目明显减少[对照组与OPN干扰组比较:(42.0±9.4) vs (21.8±6.9),P<0.01],细胞对基底膜基质和纤维连接蛋白的黏附百分比明显降低[对照组与OPN干扰组比较:基底膜基质,(41.5±8.4)% vs (20.5±4.5)%;纤维连接蛋白,(25.3±4.5)% vs (14.6±2.5)%],凋亡增加.结论 OPN基因沉默能有效抑制人胃癌细胞MKN28的生长、侵袭,并促进凋亡的发生.     

OPN与C-erbB-2、P53在乳腺癌组织中的表达

目的检测骨桥蛋白(Osteopontin、OPN)与C-erbB-2、P53在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用S-P免疫组织化学技术检测OPN、C-erbB-2、P53蛋白在乳腺癌组织中的表达。结果50例乳腺癌组织中OPN、C-erbB-2、P53蛋白阳性表达率分别为76.0%,62.0%、56%。OPN蛋白表达在肿瘤大小、腋窝淋巴结转移及临床分期患者间差异均有统计学意义(P0.05);C-erbB-2和P53蛋白表达在肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期及不同ER、PR表达情况的患者间差异均有统计学意义(P0.05)。OPN蛋白表达与C-erbB-2、P53蛋白表达有显著相关性(r=0.332,P=0.019;r=0.351,P=0.012)。结论OPN、C-erbB-2、P53蛋白与乳腺癌的临床病理特征密切相关,联合检测对乳腺癌患者病情评估、预测预后及临床用药具有重要的意义。     

血浆OPN和TAT水平检测在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨骨桥蛋白（OPN）、凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）在非小细胞肺癌（NSCLC）血浆中水平的临床意义。方法采用ELASA法检测46例NSCLC、22例肺部良性病变患者及20例健康体检者血浆TAT、OPN水平。比较各组数据之间关系。结果 OPN在NSCLC血浆水平明显高于肺部良性病变患者及健康体检者（t=7.376,P=0.017）;TAT在NSCLC血浆水平明显高于肺部良性病变患者及健康体检者（t=15.885,P=0.000）。而肺部良性病变患者及健康体检者对比,差异无统计学意义;OPN、TAT血浆水平与肺癌分期、远处转移呈正相关（r=0.502,P〈0.05）;与年龄、性别相关性无统计学意义。结论 TAT、OPN可作为分期及转移的指标,且二者可能在NSCLC发生发展方面具有协同作用。     

骨桥蛋白和环氧化酶-2在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的探讨骨桥蛋白（OPN）和环氧化酶-2（COX-2）在膀胱尿路上皮癌的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法对经手术切除,同时由病理证实、资料完整的50例膀胱尿路上皮癌和10例正常膀胱组织标本的石蜡包埋组织切块进行OPN和COX-2表达的检测。结果 OPN和COX-2在膀胱尿路上皮癌组织中的阳性表达率为82%和80%,OPN在正常膀胱黏膜中不表达,COX-2在正常膀胱黏膜中的表达率为10%。其表达随肿瘤病理分级、临床分期的增高和肿瘤复发而增强,高级别肿瘤的表达高于低级别肿瘤,浸润型肿瘤明显高于表浅型肿瘤,两者表达水平之间呈正相关关系（P=0.001）。结论 OPN和COX-2有望成为判定膀胱尿路上皮癌恶性程度及复发的新靶点。     

血浆骨桥蛋白水平与冠状动脉钙化及其严重程度的关系

<正>多层螺旋CT扫描是目前检测钙化较为敏感、准确且无创的手段,钙化积分能准确反映冠状动脉钙化的严重程度。骨桥蛋白(OPN)作为一种重要的功能性磷酸化糖蛋白,参与肿瘤的生长、转移以及细胞免疫,控制炎症反应强度,调节组织修复进程等多种病理生理过程。近年来研究发现,骨桥蛋白可能与冠状动脉的钙化有关[1]。本研究通过血浆骨桥蛋白     

骨桥蛋白在类风湿性关节炎中的作用

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的慢性进行性多关节炎症为特征的全身性自身免疫性疾病,由于其机制目前尚未完全阐明,临床缺乏有效的治疗方法。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在RA病人的关节液中明显升高,在自身免疫性疾病中发挥重要作用。动物实验发现OPN基因缺陷小鼠具有明显的抵抗胶原诱发关节炎(col-lagen-induced arthritis,CIA)的能力。该文对OPN的研究新进展及其在类风湿性关节炎中的作用作一综述,以增进对OPN生物学功能及其病理作用的了解。