Effects of Fungi and Eosinophils on Mucin Gene Expression in Rhinovirus-Infected Nasal Epithelial Cells

Purpose

Fungi, rhinoviruses (RVs), and eosinophils are associated with upper respiratory diseases. We evaluated the effects of fungal stimulation and eosinophil co-culture on the expression of mucin genes in RV-infected nasal polyp epithelial cells.

Methods

Nasal polyp epithelial cells were obtained from chronic rhinosinusitis patients. Cultured epithelial cells were stimulated with Alternaria and Aspergillus with or without RV-16 infection. The epithelial cells were co-cultured with eosinophils for 16 h. MUC4, MUC5AC, MUC5B, and MUC8 mRNA expressions in the epithelial cells were quantified using real-time RT-PCR. To determine the underlying mechanism, nuclear factor-κB (NF-κB), activator protein-1 (AP-1), and mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitors were used to inhibit mucin gene expression.

Results

Fungi and RV-16 induced mucin gene expression in nasal polyp epithelial cells. However, there was no synergistic increase in mucin gene expression, with the exception of MUC4 mRNA expression stimulated by 25 µg/mL Aspergillus. When RV-16-infected epithelial cells were stimulated with fungi and then co-cultured with eosinophils, MUC4, MUC5B, and MUC8 mRNA expressions increased. Mucin gene expression was inhibited by NF-κB inhibitors.

Conclusions

RV-16, airborne fungi, and eosinophils may exacerbate the inflammatory process in nasal mucosal diseases by enhancing mucin gene expression.     

��������ȱ�ݲ�����Ⱦ���߿�ǻ�����ֲ״������

目的探索人类免疫缺陷病毒（HIV）感染或艾滋病（AIDS）患者口腔真菌定植状况及菌种分布,为HIV感染或AIDS患者真菌感染防治提供理论依据。方法选择2013年6—12月在新疆医科大学第一附属医院感染科就诊的HIV感染或AIDS患者30例,由口腔科采用咽拭子法收集口腔分泌物,通过真菌培养实验分析口腔真菌定植状况。结果 30例HIV感染或AIDS患者中,阳性带菌者19例,阳性率为63.3%。阳性带菌者年龄2~52岁;其中男13例（68.4%）、女6例（31.6%）;维吾尔族15例（78.9%）,汉族4例（21.1%）。阳性带菌者中携带白色念珠菌15例（78.9%）。结论白色念珠菌为HIV感染或AIDS患者口腔真菌定植的主要菌种。阳性带菌者年龄分布广泛。     

Multifocal but non‐disseminated phaeohyphomycosis in a healthy man via a unique mechanism: Ejection from motor vehicle accident into a vegetable field in Afghanistan resulting in multiple contaminated skin wounds

A 20‐year‐old male presented with multiple subcutaneous nodules on the head, neck, chest and oral cavity. FNA and biopsy showed pigmented fungal hyphae diagnostic of multifocal phaeohyphomycosis, found to be Exophiala spinifera by molecular diagnostics. The presentation initially raised concern for disseminated disease and occult immunosuppression. However, the patient appeared to be immunocompetent and otherwise healthy. Upon further inquiry, the patient was in a motor vehicle accident 4 years before presentation; he was ejected into a vegetable field resulting in multiple open wounds. Multifocal phaeohyphomycosis usually indicates disseminated systemic disease from immunosuppression and carries a grave prognosis.     

化脓性角膜炎病原学分析

目的分析化脓性角膜炎病原学的变迁特征。方法回顾性分析1989年至2006年间在北京同仁医院眼科拟诊为真菌性、细菌性及棘阿米巴性角膜炎患者11302例微生物实验室检查资料。结果培养鉴定出病原微生物2896份,其中真菌1602份、细菌1161份、棘阿米巴原虫133份,总阳性率为25.62%.真菌培养阳性率为33.83%,夏秋季为高发季节,常见的致病真菌为镰刀菌属(62.23%)和曲霉菌素(14.61%);对2000年至2006年间培养的895株真菌进行体外药敏实验,结果显示那他霉素、特比萘酚、伊曲康唑和氟康唑的药物敏感性分别为88.83%、55·75%、28·60%和11·84%;镰刀菌属对那他霉素最敏感,曲霉菌素对特比萘酚敏感性高。常见细菌培养阳性率为18.78%(1126/5995),以G 球菌和G-杆菌为主,占检出细菌的85·52%;主要致病菌属为铜绿假单胞菌,其所占比例近年来有所下降,而金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和微球菌属所占比例有明显增高;对2000年至2006年间培养的430株细菌行体外药敏实验,结果显示左氧氟沙星、氧氟沙星、妥布霉素和环丙沙星药物敏感性分别为82.09%、75.81%、66.98%和62.33%;假单胞菌属对4种抗菌药物敏感性无显著性差异。棘阿米巴检查(培养 刮片)阳性率为23.25%(133/572),其检出例数逐年升高。放线菌、非结核分枝杆菌和厌氧菌为少见病原体,非结核分枝杆菌多分离自屈光手术后的角膜感染。结论真菌和细菌为化脓性角膜炎的主要病原体,棘阿米巴角膜炎病例数逐年升高,放线菌及非结核分枝杆菌引起的角膜感染应引起重视。     

川芎内生真菌的分离与鉴定

目的:探讨川芎内生真菌类群与川芎品种和产地的关系。方法:采用平板分离法分离川芎的内生真菌,采用点植法对分离菌株进行分类鉴定。结果:从6个产地的川芎根茎样品共获得内生真菌50株,经形态观察分类鉴定为1纲、3目、4科、13属。结论:不同产地及不同品种川芎的内生真菌在数量、分布、种群及其组成存在差异,推测川芎内生真菌种群可能和川芎的特定生境有关。     

内生真菌与天然产物研究进展

内生真菌生境独特,分布广泛,是发现新颖结构化合物的理想资源。植物是药用植物的主要材料,药用植物体内有大量内生真菌分布,内生真菌对药用植物的生长及活性成分的形成都有影响,如名贵中药血竭的形成需要内生真菌的参与,中药材的道地性可能也与内生真菌有密切关系。从内生真菌中发现活性成分所面临的一个重要问题是:随着野生中药资源及其生境遭到破坏,伴生的内生真菌也会随着大量消失,由此可能对中药长远发展产生重大影响,但这一现象尚未引起人们足够的重视。     

光滑假丝酵母菌ITSⅠ区PCR-SSCP分子流行病学分析

目的建立基于聚合酶链反应的单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术,对引起常见医院感染的光滑假丝酵母菌进行基因多态性分析,并探讨改善其灵敏度和分辨率的优化条件。方法采用PCR-SSCP技术对临床分离的19株光滑假丝酵母菌以及1株标准株ATCC90030的rDNA的ITSⅠ区(引物ITS1/ITS2)和ITSⅡ区(引物ITS3/ITS4)多态性进行分析,并对PCR-SSCP的条件进行优化。结果ITSⅠ区较ITSⅡ区保守性低,变异性较强,较为适合SSCP分型。针对ITSⅠ区,SSCP电泳在无甘油时,4℃和15℃均将菌株分为6型,但各型所含菌株不同;存在5%甘油时,SSCP电泳分辨率明显增高。结论在15℃及5%甘油存在的条件下,针对ITSI区的PCR-SSCP分型是一种快速、简便的适合于致医院感染光滑假丝酵母菌分型的新流行病学研究手段。     

葡萄孢菌代谢产物α-吡喃酮酪氨酸酶抑制活性的研究

利用酪氨酸酶抑制活性追踪法对海洋真菌葡萄孢菌的代谢产物进行研究,分离得3个含有α-吡喃酮结构的化合物,并通过波谱方法进行了解析.通过测试α-吡喃酮不同衍生物对酪氨酸酶的活性抑制能力,初步确定了α-吡喃酮联接戊烷基时显示最强的酪氨酸酶活性抑制能力.     

真菌EST-Ⅰ及EST-Ⅱ对人参皂苷Rg_1定向转化为人参皂苷F_1的研究

目的筛选能将人参皂苷Rg1定向转化为稀有人参皂苷F1的真菌。方法通过硅胶柱色谱从三七总皂苷中分离纯化出人参单体皂苷Rg1;采用固体与液体发酵培养法,从325株真菌中筛选到能对单体人参皂苷Rg1进行生物转化的菌株。采用1H-NMR1、3C-NMR波谱手段及理化性质鉴定人参皂苷Rg1及其转化产物。结果发现真菌菌株EST-Ⅰ与EST-Ⅱ将人参皂苷Rg1定向转化为人参皂苷F1,说明两种菌株能产生特异性水解C-6位葡萄糖的β-葡萄糖苷酶。结论该方法是一种制备稀有人参皂苷F1的新方法。     

槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用

目的：研究槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用。方法：将槲寄生8个不同部位的组织进行外植体培养，分离纯化其内生真菌,利用CMC平板培养和DNS法筛选出具有较高纤维素酶活性的菌株；将槲寄生寄生的膨大部位进行组织切片，染色观察其内生真菌的组织分布。结果：槲寄生体内分布着丰富的真菌菌丝；从槲寄生各组织部位共分离出83株内生真菌；初步筛选得到38株可降解纤维素的菌株，19株降解纤维素能力较强，其中10株分离自槲寄生寄生的膨大部位。结论：内生真菌分泌纤维素酶可降解枫杨树的细胞壁及细胞间隙组织，协助槲寄生的吸器穿透枫杨树组织，帮助槲寄生在枫杨树上寄生。