大黄多糖提取工艺的研究

目的研究并建立大黄多糖的提取方法。方法采用苯酚-硫酸法测定大黄多糖含量,用正交试验方法确定大黄多糖提取工艺。结果大黄多糖的最佳提取工艺为提取时间为3 h,第一煎加水量10倍,第二、三煎加水量8倍。结论该优化工艺简便易行,重现性好,可用于大黄多糖的提取。     

ERK1/2在黄芪多糖促进HepG2细胞凋亡中的作用

目的:阐明黄芪多糖与ERK1/2通路在HepG2细胞凋亡中的作用.方法:实验分为4组:空白对照组(control);B组,20 mg?L-1黄芪多糖3个剂量处理组(AP,20,40,80 mg?L-1黄芪多糖处理组( AP,40,80 mg?L-1),药物处理24 h后检测各指标.应用Western blot,MTT,TUNEL,线粒体膜电势检测等方法检测黄芪多糖对HepG2细胞生存凋亡及细胞中ERK1/2表达量的影响.结果:MTT与TUNEL表明黄芪多糖对HepG2细胞的凋亡具有促进作用,增加HepG2细胞的caspase-3的活性,降低(HepG2)细胞线粒体的膜电位,降低Bcl-2表达;黄芪多糖可以降低ERK1/2的表达,表明黄芪多糖的凋亡促进作用可能通过ERK1/2途径.结论:黄芪多糖可以通过抑制ERK1/2信号通路促进HepG2细胞的凋亡.     

大孔吸附树脂纯化野菊花多糖工艺

目的:研究大孔吸附树脂对野菊花多糖中所含色素和蛋白质的脱除性能.方法:比较LSA-700B,LSA-21,D101,XDA-8,AB-8,XDA-76种不同型号大孔吸附树脂对野菊花多糖的纯化效果;以脱色率、蛋白质去除率和多糖保留率作为考察指标,探讨温度、多糖质量浓度、pH、转速、流速5个因素对其纯化性能的影响.结果:LSA-21树脂对野菊花多糖的纯化效果较为理想;最佳工艺为温度40℃,多糖质量浓度7 g·L-1,pH 5,转速180 r·min-1,流速3 BV·h-1,径高比1∶8.在此条件下脱色率80.90％,蛋白质去除率52.84％,多糖保留率82.59％.结论:LSA-21大孔吸附树脂对野菊花多糖可以获得较高的纯化效率和多糖保留率.     

三七多糖的含量测定方法及不同部位多糖的含量变化研究

目的:建立三七多糖的检测方法,分析测定三七茎叶、筋条、花和剪口的多糖含量,为三七的质量评价提供依据.方法:用80％乙醇提取还原性糖,然后用水提取三七多糖,采用蒽酮-硫酸比色法于528 nm波长处用分光光度法测定多糖的含量.结果:三七不同部位中多糖含量有明显差异,三七筋条中多糖含量最高,三七茎叶中多糖含量最低.结论:所用含量检测方法简便、快速、准确,可用于不同部位三七多糖的质量检测和控制,三七筋条、花、茎叶和剪口都有一定的多糖开发价值.     

野菊花多糖对小鼠免疫功能低下的保护作用

目的:研究野菊花多糖对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下的保护作用.方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型组及野菊花多糖高、低剂量组,每组10只.野菊花多糖高、低剂量组分别ig给药400,200 mg·kg-1·d-1,连续14 d;于ig的第10天开始,模型组及野菊花多糖高、低剂量组分别经腹腔注射环磷酰胺100 mg·kg-1 ·d-1,连续4d,制备免疫功能低下小鼠模型 .观察野菊花多糖对免疫功能低下小鼠碳廓清试验的影响;测定小鼠体重及胸腺、脾脏质量,计算胸腺、脾指数;采用二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应法(耳肿胀法)测定细胞免疫功能;检测血清溶血素含量.结果:与正常对照组比较,模型组小鼠的各项指标均显著降低(P＜0.01).野菊花多糖高、低剂量组的碳廓清指数分别为0.027 8±0.005 9,0.019 9±0.004 7,吞噬指数分别为5.397 0±0.735 6,4.827 8±0.480 1,耳肿胀度分别为(5.23±0.98),(4.89±1.10) mg,血清溶血素分别为(0.410±0.063),(0.357±0.058).模型组的碳廓清指数为0.0134±0.0038,吞噬指数为4.231 6±0.367 2,耳肿胀度为(3.21±0.91)mg,血清溶血素吸光度(A)为0.299±0.032.各指标与模型组比较,均具有显著性差异( P＜0.01或P＜0.05).结论:野菊花多糖可增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠的免疫功能.     

大蒜渣ACEI活性肽的制备及其稳定性研究

目的以蒜渣为原料,对制备ACEI(血管紧张素转化酶抑制剂)活性肽的工艺及酶解产物的稳定性进行研究。方法以水解液的抑制活性为试验指标,从9种蛋白酶中筛选出4种较佳蛋白酶单独或联合水解蒜渣。结果蛋白酶1单独水解效果较好。通过单因素和正交试验得出最佳水解条件:加酶量(E/S)6%、底物浓度8%、pH 7、50℃、3 h,在上述条件下酶解产物对ACE的抑制率为88.81%。考察了大蒜渣ACEI活性肽的热稳定性、耐酸碱性和抗肠道酶降解能力,结果表明,该活性肽具有良好的耐高温性能;在酸性条件下活性下降较快,当pH≥8.3时活性稳定;在模拟的胃肠道环境中具有良好的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶裂解的能力。结论大蒜渣ACEI活性肽经口服或者静脉注射后很可能具有良好的降血压效果。     

巴戟天多糖含药血清对体外成骨细胞DKK-1表达的影响

目的探讨巴戟天多糖含药血清对成骨细胞增殖、分化及DKK-1蛋白表达的影响。方法源于大鼠颅盖骨的原代成骨细胞中加入不同浓度的巴戟天多糖含药血清进行干预。MTT法观察巴戟天多糖含药血清对成骨细胞增殖的影响,用硝基苯磷酸盐(P-nitrophenyl phosphate,PNPP)偶氮法观察含药血清对成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响,用蛋白印记法观察含药血清对成骨细胞DKK-1蛋白表达的影响。结果巴戟天多糖含药血清可使体外培养成骨细胞的增殖率明显提高(P<0.01),并能提高成骨细胞ALP活性(P<0.01)。此外,巴戟天多糖含药血清可以下调成骨细胞DKK-1蛋白的表达。结论巴戟天多糖含药血清可促进成骨细胞的增殖能力和ALP活性,并可通过下调成骨细胞DKK-1蛋白的表达影响骨代谢。     

当归多糖对小鼠骨骼肌卫星细胞增殖及干细胞因子受体蛋白表达的影响

目的观察在体外造血微环境中,当归多糖(angelica polysaccharides,APS)对不同培养条件下乳鼠骨骼肌卫星细胞(muscle satellite cells,MSCs)增殖及干细胞因子受体蛋白(c-kit)表达的影响。方法原代培养MSC,5天后采用结蛋白(desmin)免疫细胞化学鉴定;细胞随机分为8组,即空白对照组,骨髓基质细胞培养上清组,加入含100、200、300μg/mLAPS的DMEM/F12培养基实验组及经100、200、300μg/mLAPS干预后骨髓基质细胞条件培养基组,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性及对细胞进行c-kit免疫细胞化学染色。结果分离培养的MSCs呈desmin染色阳性;MTT法检测发现各条件培养基实验组MSCs增殖显著;c-kit免疫强阳性反应存在于条件培养基培养的各组MSCs中,c-kit主要表达于细胞质。结论经APS干预的骨髓基质细胞条件培养基可以有效改变MSCs的生长特性,明显促进MSCs增殖及c-kit的表达,c-kit在MSCs增殖过程中可能起某种调节作用。     

维药阿里红多糖的提取及免疫活性研究

目的对新疆维药阿里红中的多糖进行提取,并研究阿里红粗多糖体外免疫活性。方法建立热水提取、乙醇沉淀、Sevag法除蛋白的方法提取阿里红多糖（FoP）,红外及紫外吸收光谱检测其性质,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量;采用MTT法检测不同浓度FoP在体外对小鼠脾细胞及腹腔巨嗜细胞增殖率的影响。结果 FoP产率为0.85%,多糖含量为68.81%;IR谱中,3423,2929,1651,1456,1130,1091,617cm^-1处表现为典型的多糖吸收峰;UV谱中,260,280nm处均无吸收峰;体外活性试验中,FoP对小鼠脾细胞、腹腔巨嗜细胞的生长具有明显的促进作用。结论 FoP具有一定的免疫调节活性。     

松木层孔菌胞外多糖的组成分析及免疫学活性研究

目的研究松木层孔菌胞外多糖的单糖组成和免疫学活性。方法使用冻融分级、酶＋seveg法脱蛋白和SepharoseCL-6B层析纯化松木层孔菌胞外粗多糖（CPPE）,得到级分PPE,用HPLC分析其均一性和分子量,用气相色谱法测其单糖组成。结果经HPLC验证,PPE为均一组分,分子量为3.9×104Da。气相色谱分析表明,PPE为甘露聚糖。淋巴细胞增殖实验显示,PPE能促进小鼠淋巴细胞的增殖,同时也可协同有丝分裂原ConA和LPS促进小鼠脾T、B淋巴细胞的增殖。结论 PPE具有提高机体免疫力的功能。