转化生长因子-β1和胰岛素对人鼻中隔软骨细胞增殖和分化影响的研究

目的 了解转化生长因子-β1(transforming growth factor-betal，TGF—β1)和胰岛素对人鼻中隔软骨细胞增殖和分化的影响。方法 体外培养人鼻中隔软骨细胞，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)代谢和^35S-Na2SO4掺入的检测比较不同浓度TGF-β1和胰岛素对人鼻中隔软骨细胞的增殖以及软骨基质蛋白多糖合成的影响，观察TGF-β1和胰岛素对软骨细胞表型的影响。结果 在15％血清的培养条件下，TGF-β1和胰岛素均能显著促进软骨细胞增殖，且在各自一定的浓度范围内呈量效关系，联合作用效果累加；TGF—β1、TGF—β1和胰岛素联合作用促使软骨基质蛋白多糖的合成量明显提高；TGF-β1使传代软骨细胞去分化提前。结论 一定浓度的TGF—β1、胰岛素和TGF-β1 胰岛素对体外培养的人鼻中隔软骨细胞具有显著的促增殖作用。     

杀莠素A对兔软骨细胞增殖和产生NO的影响

研究杀莠素Ａ对ＩＬ－１抑制软骨细胞增殖和诱导ＮＯ产生的作用。方法：ＩＬ－１单独或与杀莠素Ａ共育于软骨细胞,用结晶紫染色法测定软骨细胞增殖,Ｇｒｉｅｓｓ法测定ＮＯ的产生。结果：ＩＬ－１抑制软骨细胞增殖,杀莠素Ａ剂量依赖地逆转ＩＬ－１的作用。杀莠素Ａ还能剂量依赖地抑制ＩＬ－１诱导软骨细胞产生ＮＯ。结论：杀莠素Ａ逆转ＩＬ－１换制软骨细胞增殖的作用可能是通过ＮＯ介导的。     

软骨细胞培养及其活性测定的实验研究

各种原因造成的关节软骨缺损一直是研究的热点。检测术后移植物软骨细胞的活性是判定手术成功与否的重要标志。检测的方法很多，作者认为同位素^3H—Tdr(^3H-胸腺嘧啶核苷)掺入法比较可靠。     

参麦注射液对体外培养软骨细胞增殖的影响

目的 探讨参麦注射液对软骨细胞增殖的影响。方法 运用关节软骨体外培养方法，设立空白对照与IGF—Ⅰ药物对照组，采用MTF比色法观察不同浓度参麦注射液对软骨细胞增殖情况。结果 参麦注射液与生长因子IGF—Ⅰ均可促进软骨细胞增殖，同空白对照组相比差异有非常显著性（P〈0．01），其中5％参麦液组同浓度为5ng／ml的IGF—Ⅰ组作用效果相当（P〉0．05）。结论 参麦注射液可促进软骨细胞的合成代谢，减少其分解代谢，从而减轻关节软骨的退变，延缓OA的进展。     

骨质疏松性骨折骨痂软骨细胞CD44、FN表达的实验研究

目的：探讨骨质疏松性骨折愈合过程中胞内信号因子CD44及其配体FN在骨痂软骨细胞的表达情况。方法：建立28只SD大鼠骨质疏松性股骨骨折愈合模型作为实验组以及28只二期股骨骨折愈合模型作为对照组，分别于骨折后的d10、d20、d30、d40取材，对骨痂进行HE染色及CD44、FN免疫组化染色。结果：在骨痂组织中CD44和FN的表达及分布在时空上有一致性。在实验组中，随着骨折愈合进程的发展，软骨细胞CD44与FN的表达逐渐减少，而对照组中，CD44与FN共同表达于骨折愈合各阶段的各区软骨细胞中。结论：大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中骨痂软骨细胞CD44、FN的表达明显弱于正常二期骨折愈合过程中的表达，提示：CD44、FN在软骨细胞中表达的明显减少可能是造成骨质疏松性骨折骨痂软骨组织向骨组织演变缓慢的原因之一。     

猪关节软骨细胞体外培养及其形成糖胺多糖能力的实验研究

目的:观察软骨细胞体外培养的情况及其合成糖胺多糖的特点。方法:通过Ⅱ型胶原酶消化法获得高活性的软骨细胞,定量接种6×106个细胞于培养皿,加入培养基,每周传代一次,连续5周,留取所有培养液用阿利新蓝法(AlcianBlue)测定软骨细胞外分泌基质糖胺多糖(GAG)的变化;利用倒置显微镜观察原代及传代软骨细胞的生长情况。结果:软骨细胞在pH值为7.0,含10%胎牛血清的DMEM培养液中生长良好,体外培养的软骨细胞从传代后合成糖胺多糖类基质,第二代传代细胞分泌GAG的能力最强。结论:软骨细胞体外培养生长良好,合成大量的糖胺多糖类基质。传代第二代是最佳接种时间。     

BMP/Smads信号传导通路在兔下颌持续前导后髁突的表达

目的：探讨免下颌持续功能前导后髁突软骨中BMP／Smads信号传导通路表达与髁突改建的关系。方法：60只8周龄的日本大耳白兔，随机分成实验组（n=36）和对照组（n=24），实验组动物每日24h戴用咬合前导矫正器。实验动物分别在第3天、1周、2周、4周、8周及12周时处死并取材，用免疫组化方法观测髁突组织内BMP-2和Smad1／5、4、6的分布和表达，并对其表达进行灰度测定。结果：BMP-2和Smad1／5、4、6主要在髁突软骨过渡层和肥大层软骨细胞中表达，钙化层的软骨细胞和成骨细胞中也可见BMP-2和Smad1／5、4、6的表达。实验组兔髁突软骨BMP-2和Smad1／5、4、6的表达强度在早期高于同期对照组（P〈0．05），与髁突骨组织改建的活跃程度同步。结论：下颌持续前导后，Smad1／5、4、6作为BMP-2的细胞内信号传导分子，与下颌髁突适应性生长改建关系密切。     

藻酸包埋异体关节软骨细胞修复兔膝关节软骨缺损

目的 探讨异体关节软骨细胞作为软骨种子细胞修复关节软骨缺损的可行性。方法 无菌取成年新西兰大白兔四肢关节软骨，酶消化法分离细胞，条件培养基体外培养扩增，藻酸钙凝胶包埋培养1周，植入兔膝关节股骨髁间软骨缺损，对照组缺损旷置。术后3、6个月分别取材，观察缺损修复情况；切片特染和免疫组化观察修复组织病理，并Wakitnni评分评估修复质量。结果 7／8缺损为成熟透明软骨组织修复，1／8为纤维软骨修复；Wakitani平均评1．75分；空白对照组评7．65分。实验组3个月组标本未见淋巴细胞或白细胞浸润，6个月组标本未见明显退变；所有标本均未见藻酸残留。结论 用藻酸包埋异体关节软骨细胞修复兔膝关节软骨缺损的方法是可行的，异体关节软骨细胞在适当的处理后可成为关节软骨组织工程种子细胞。     

喹诺酮类药物对离体兔软骨细胞的毒性

目的 :评价几种喹诺酮类药物对幼龄兔软骨细胞的相对毒性 ,软骨毒性与浓度、时间、年龄的关系。方法 :采用兔软骨细胞体外培养的技术 ,观察细胞形态 ,四氮甲基唑蓝 (MTT)法评价细胞的增殖 ,二甲基亚甲蓝 (DMB)法评价细胞蛋白多糖的含量。观察环丙沙星、左氧氟沙星、氟罗沙星、帕珠沙星对 1月龄兔软骨细胞的影响 ,及环丙沙星对 1,3,5月龄兔软骨细胞的影响。结果 :喹诺酮类药物使细胞形态发生改变 ;抑制细胞的增殖的作用依次为环丙沙星 >左氧氟沙星 >氟罗沙星 >帕珠沙星 ;对蛋白多糖含量的作用为环丙沙星 >左氧氟沙星 >氟罗沙星、帕珠沙星 ;环丙沙星的抑制作用随作用时间的延长和浓度的增加而增加 ,随兔年龄的增大而减少。结论 :喹诺酮类几种药物的软骨毒性存在着差异 ,且随浓度、时间、年龄不同而不同。     

补肝肾方血清对体外培养大鼠软骨细胞的影响

目的观察补肝肾方血清对体外培养的SD大鼠软骨细胞增殖和总蛋白合成的影响.方法分别采用5%,10%,20%的补肝肾方血清和相应浓度的空白血清培养SD大鼠软骨细胞,用MTT法检测软骨细胞的增殖,用考马斯亮蓝测定法检测细胞总蛋白含量.结果补肝肾组与对照组比较,不同血清浓度下补肝肾组的软骨细胞OD值及总蛋白含量均高于对照组(P＜0.01或P＜0.05).结论 3种不同血清浓度下补肝肾方均有明显的促进体外软骨细胞增殖及蛋白合成的作用,且5%和10%含药血清作用较明显.