肿瘤坏死相关凋亡诱导配体对前列腺癌及膀胱癌细胞增殖、凋亡的作用

目的:研究重组并纯化的肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白对前列腺癌及膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:将不同浓度的TRAIL蛋白与培养的前列腺癌细胞(PC-3细胞)和膀胱癌细胞(5637细胞)共孵育24 h后,采用细胞增殖实验及流式细胞术检测肿瘤细胞的增殖及凋亡。结果:PC-3细胞株中,与未处理组比较,TRAIL蛋白浓度在20、40、80、160 ng·ml-1时细胞增殖率均有显著性差异;而在5637细胞株中,与未处理组比较,TRAIL蛋白浓度在5、10、20、40 ng·ml-1时细胞增殖率均有显著性差异。流式细胞实验结果也证实,随TRAIL蛋白浓度的增高,两种肿瘤细胞凋亡率增加。结论:重组并纯化TRAIL蛋白可通过抑制前列腺癌及膀胱癌细胞的增殖,诱导其凋亡而产生抗肿瘤的作用。     

人结直肠癌组织中mTOR、HIF-1α、PKM2的表达及临床意义

目的观察人体结直肠癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和酪氨酸激酶M2(PKM2)的表达,并探讨其临床意义。方法外科手术及纤维结肠镜切除并经病理确诊的结直肠癌标本87例为结直肠癌组,正常结直肠组织30例为正常结直肠组,运用免疫组化方法检测其mTOR、HIF-1α、PKM2的表达。结果结直肠癌组mTOR、HIF-1α及PKM2的平均光密度值均显著高于正常结直肠组(分别为5 165.6±391.8vs.1 215.8±153.4,4 474.4±255.9 vs.1 633.0±115.6,9 736.0±128.7 vs.4 031.8±477.1,P<0.05)。结直肠癌患者不同性别、年龄、分化程度下mTOR、HIF-1α及PKM2表达率无统计学差异(P>0.05);不同Dukes分期和淋巴转移下mTOR、HIF-1α及PKM2的表达率有统计学差异(P<0.05);不同浸润深度下mTOR和PKM2的表达率有统计学差异(P<0.05),而HIF-1α表达率差异无统计学意义(P>0.05)。结直肠癌组织中mTOR与HIF-1α、PKM2蛋白间呈正相关(r=0.247、0.512,P<0.05),且HIF-1α与PKM2亦呈正相关(r=0.568,P<0.05)。结论人体结直肠癌组织中mTOR、HIF-1α及PKM2的相对表达量均显著高于非肿瘤人群,且其表达与结直肠癌的增殖转移相关,可作为结直肠癌靶向治疗作用位点。     

超声造影对原发性肝细胞癌的诊断及与病理分化程度的关系

[摘要]　目的　观察原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）超声造影各时相特点,探讨不同增强模式与病理分化程度的关系。　方法　选择行超声造影检查诊断为HCC,且住院手术最终病理结果为HCC的患者23例作为研究对象。根据病理结果分为高分化组（10例）和中低分化组（13例）。分析其血流灌注特征,并绘制时间-强度曲线,分析造影时间-强度曲线各参数与病理分化程度的关系。　结果　〖HTＫ〗23例肝细胞癌动脉相呈快速高增强。中低分化组92.3%（12例）门静脉相快速退出,7.7%（1例）门静脉相缓慢退出;高分化组70%（7例）门静脉相缓慢退出,30%（3例）门静脉相快速退出。两组中增强斜率、增强时间、相对峰值强度、峰值强度比值、峰值降半时间以及下降斜率比较差异有显著性意义（P<0.05）。　结论　原发性肝细胞癌造影增强表现与病理分化程度有直接关系。     

霉酚酸酯在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用研究

目的　探讨霉酚酸酯对肾缺血再灌注损伤(IR)的保护作用;方法　将９０只健康雄性SD大鼠随机分为３ 组:假手术组,缺血再灌注组、肾缺血再灌注损伤 (IR)＋霉酚酸酯(MMF)组、每组３０只.获取三组小鼠的肾缺血再灌注损伤后２４h/４８h/７２h/７d的肾脏标本,通过TUNEL法分别进行计算肾小管细胞凋亡指数. 观察各组大鼠术２４h/４８h/７２h/７d时的Cr,BUN 水平及肾组织中缺氧诱导因子１蛋白的表达水平.结果　大鼠肾缺血再灌注后各时间点的血清肌酐值水平均高于 对照组(P?０．０５),与假手术组、缺血再灌注组比较,IR＋MMF组各时间点HIF－１α蛋白的表达增强,差异有统计学意义(P ＜０．０５或P ＜０．０１).结论　霉酚酸酯 可诱导肾脏缺血再灌注损伤早期HIF－１a的蛋白表达量的增加,这可能是减轻肾缺血再灌注损伤重要机理之一.     

基于医院、患者、政府三方博弈模型的医疗费用控制研究

医疗机构和患者是医疗服务市场的供方和需方,由于医疗服务行业的专业性,医生具有行业的信息优势,由此带来诱导需求、过度医疗等市场失灵现象,需政府扮演微观规制和宏观调控的角色［1］。政府是公众利益的代表,是卫生政策的制定者和实施者;医疗机构是医疗服务的提供方,在医疗服务交易过程中处于主动地位,直接决定了医疗服务的质量和费用水平;患者在医疗服务市场中处于弱势地位,对医疗服务几乎没有议价能力,只能寄希望于政府与医疗服务机构进行“谈判”［2］。医疗机构、患者、政府是医疗服务市场中3个代表性的利益集团,因此,有必要在基于信息不对称的条件下采用博弈论的分析方法研究医疗机构、患者、政府3个利益集团的行为关系,探讨过度医疗产生的原因,为有效控制医疗费用提供参考。     

干扰素α通过IFI16和P21影响人血管内皮细胞凋亡

目的 观察干扰素α(IFN-α)对人血管内皮细胞(VECs)凋亡的影响并了解其部分机制.方法 应用IFN-α和转染IFN诱导蛋白16基因(IFI16)的siRNA瞬时干预体外培养的VECs,以转染非特异性siRNA设为对照组,RT-PCR法检测IFI16及P21 mRNA表达,Western blot检测IFI16及P21蛋白表达,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡情况.结果 与对照组比较,IFN-α组IFI16 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),细胞凋亡增多(P＜0.05),伴P21 mRNA和蛋白表达增多(P＜0.05);IFN-α干预后再转染IFI16 siRNA,IFI16 mRNA和蛋白表达下调(P＜0.05),细胞凋亡减少(P＜0.05),P21 mRNA和蛋白表达减少(P＜0.05).结论 IFI16及P21参与IFN-α诱导VECs凋亡过程的调控.     

HIF-1α、M ACC1、FOXO4与胃癌病理和预后的关系

目的：探究低氧诱导因子-1（HIF-1α）、结肠癌转移相关基因1（MACC1）和转录因子FOXO4在胃癌中的表达及与胃癌的临床病理特征和预后的关系。方法收集2006年12月至2008年5月安徽医科大学第一附属医院外科手术切除的原发性胃癌石蜡包埋标本110份,和距癌灶边缘5 cm以上且经病理检查确定为正常胃黏膜的癌旁组织标本46份,进行 HIF-1α、M ACC1和FOXO4蛋白免疫组织化学检测。统计标本来源患者的信息进行 HIF-1α、M ACC1和FOXO4蛋白与胃癌及转移淋巴结相关性分析。用Kaplan-M eier法分析术后胃癌患者的5年生存率和用Cox法进行生存率多因素回归分析。结果免疫组织化学法检测发现HIF-1α（P＜0．001）和MACC1（P＜0．001）蛋白在癌灶细胞中的表达明显高于癌旁组织,而FOXO4蛋白在癌灶细胞中的表达明显低于癌旁组织（P＜0．001）。统计分析发现细胞分化程度越低、浸润程度越大、伴随着淋巴结转移和TNM分期越高,HIF-1α和MACC1的阳性表达也越高,而FOXO4因子的表达降低。胃癌组织中3种因子的表达存在显著相关性。 HIF-1α、MACC1和FOXO43种因子的表达明显影响患者术后5年的生存率,而且是决定胃癌患者预后的独立因素。结论 HIF-1α、M ACC1和FOXO4在胃癌组织中存在异常表达,与胃癌的临床病理特征和胃癌患者的预后密切相关。     

HIF-1α survivin在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌中的表达和临床意义

目的：研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和生存素蛋白（survivin）在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织（CIN）及宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组化的方法检测HIF-1α、survivin在宫颈鳞癌标本74例、CIN标本40例、正常宫颈标本24例中的表达情况。分析了两者与宫颈鳞癌病理学分级、临床分期及淋巴结转移的关系。结果 HIF-1α、survivin两种蛋白在正常宫颈组织中不表达,但在CIN组和宫颈鳞癌组中阳性表达率逐渐升高;HIF-1α、survivin阳性表达率与宫颈鳞状细胞癌的病理分级,临床分期,淋巴结转移呈正相关;在宫颈癌组织中HIF-1α与survivin的表达程度呈正相关。结论缺氧诱导因子-1α与survivin的阳性表达对恶性肿瘤的发展起着重要作用,对两个指标的联合检测有助于评估肿瘤的恶性程度及判断预后。     

限制诱导运动疗法辅助虚拟现实游戏对偏瘫儿童运动功能的影响

目的 观察限制诱导运动疗法辅助虚拟现实游戏对偏瘫型脑性瘫痪（脑瘫）患儿运动功能的影响。 方法 采用随机数字表法将偏瘫型脑瘫患儿50例随机分为对照组和实验组,每组25例。2组患儿均给予常规康复治疗,对照组每日行限制诱导运动疗法4 h,其中1 h在治疗师帮助下行受累侧作业治疗,另外3 h在患儿监护人帮助下完成日常生活活动治疗。实验组1 h在治疗师帮助下治疗,1 h进行虚拟现实游戏,剩余2 h在患儿监护人帮助下完成日常生活活动治疗。2组儿童均每周治疗5 d,连续治疗3周。于治疗前、治疗3周后（治疗后）采用上肢功能质量测试量表（QUEST)、中文版粗大运动功能测试量表(GMFM)、残疾儿童评估量表（PEDI）分别对2组患儿的上肢运动功能、粗大运动功能、整体社会功能进行评定。 结果 治疗后,2组患儿的QUEST、GMFM和PEDI评分与组内治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.01),且实验组治疗后的QUEST、GMFM和PEDI评分分别为（16.38±7.07）分、（72.79±9.96）分、（59.05±5.36）分,均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 限制诱导运动疗法辅助虚拟现实游戏能显著改善偏瘫型脑瘫患儿运动功能及整体社会功能。     

bFGF反义寡核苷酸对大鼠肺成纤维细胞增殖信号通路的影响

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸(AODN)对大鼠肺成纤维细胞增殖、转化信号通路的影响。方法:分离成年大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组(未转染肺成纤维细胞);TGF-β1组(未转染肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激);TGF-β1+AODN组(转染AODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激);TGF-β1+RODN(正义寡核苷酸)组(转染RODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激)。每组设3复孔,并作细胞爬片,镜下计数肺成纤维细胞数量,绘制生长曲线。MTT比色法测定肺成纤维细胞增殖率。免疫细胞化学方法检测肌成纤维细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。通过ELISA法检测培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量。用RT-PCR法分析肺成纤维细胞Smad3 mRNA、Smad7 mRNA、Ⅰ型胶原mRNA表达水平。结果:1细胞计数显示:TGF-β1+RODN组各时段成纤维细胞的数目均较对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组明显增多(P<0.05);TGF-β1+AODN组中成纤维细胞增殖数比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。2MTT结果显示:TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞光密度值明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞光密度值明显比TGF-β1组减低(P<0.05)。3免疫细胞化学染色结果显示:TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞与对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组比较,α-SMA染色的平均光密度值(IOD)明显增加(P<0.05);TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞α-SMA染色的平均光密度值(IOD)比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。4 ELISA法检测结果显示:在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。5RT-PCR法检测结果显示:在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞Smad3mRNA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞Smad3mRNA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达明显比TGF-β1组明显减低(P<0.05);TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞Smad7mRNA表达明显低于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞Smad7 mRNA表达比TGF-β1组明显增加(P<0.05)。结论:bFGF反义寡核苷酸可抑制肺成纤维细胞的增殖、转化及胶原合成,bFGF反义寡核苷酸可能通过下调TGF-β1-Smad信号通路来发挥作用。