慢性脑灌注不足对tau蛋白磷酸化及其相关酶表达的影响

神经原纤维缠结(neurofibrillartangles,NFTs)是阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease ,AD)的标志性病理特征之一,tau蛋白的过度磷酸化被认为是NFTs形成的关键[1] 。近年来,脑血管因素在AD中的作用备受关注,但是,它们与AD神经病理之间的关系还不清楚[2 ,3 ] 。我们通过永久性双侧颈总动脉结扎(2VO)制作慢性脑灌注不足(chroniccerebrovascularinsufficiency ,CVI)大鼠模型,观察海马神经元中Ser2 0 2位点磷酸化的tau蛋白(PS2 0 2 tau)、糖原合成酶激酶3β(glycogensynthasekinase 3β,GSK 3β)和蛋白磷酸酯酶2A (proteinphosphatase 2…     

内毒素对小鼠血管内皮细胞p38MAPK蛋白磷酸化的影响

目的 探讨LPS刺激后对小鼠内皮细胞内p38MAPK磷酸化水平变化的影响。方法 采用小鼠肺内皮细胞原代细胞培养，western blotting检测p38信号通路在LPS诱导的小鼠内皮细胞炎症中的活化程度。结果 小鼠内皮细胞p38MAPK磷酸化水平与LPS刺激有明显的时间及剂量依赖关系。结论 p381MAPK信号通路参与LPS诱导的小鼠肺内皮细胞炎症反应过程，并可能中起重要作用。     

核苷类衍生物的合成

以尿嘧啶核苷和HIV-逆转录酶抑制剂扎西他宾为先导化合物,对其5-羟基进行磷酸化修饰,然后以磷原子为桥,引入各种氨基酸酯及取代苯环,从而试图克服这类药物对核苷激酶的依赖性,提高药物的生物活性,降低药物对细胞的毒性,以此为设计思路合成了7个新的核苷类衍生物,其结构经IR,1HNMR,13CNMR,MS分析确定.     

P38MAPK信号转导通路在大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中的作用

目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理后细胞内磷酸化P38MAPK(P-p38MAPK)表达及分布变化;Western blot检测大蒜素处理前后细胞内P-p38MAPK和Fas蛋白表达量的变化.结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性.其72h中效浓度(IC_(50))为12.8 mg·L~(-1).Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加.免疫细胞化学法检测药物处理后P-p38MAPK表达增加,主要分布于细胞核与细胞浆,而阴性对照组仅弱表达.Western blot结果分析P-p38MAPK,Fas蛋白表达量随大蒜素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性.其阴性组、72 h的1/2 IC_(50)组、IC_(50)组P-p38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.259 8±0.013 2,0.361 2±0.008 3,0.505 6±0.005 5;Fas蛋白表达水平分别为0.287 4±0.008 9,0.426 8±0.007 9和0.597 1±0.010 9,差别均有显著性意义(P<0.01).结论:大蒜素可诱导THP-1细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能是通过激活P-p38MAPK/Fas途径实现.     

脑脊液磷酸化tau蛋白与总tau蛋白比值对散发性Creutzfeldt-Jakob病的诊断价值

目的通过对CJD病人脑脊液磷酸化tau蛋白与总tau蛋白比值的研究,探讨其对散发性CJD的诊断价值。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测13例散发性CJD、11例其它痴呆及29例非痴呆脑脊液磷酸化tau蛋白。同时测定脑脊液磷酸化tau蛋白与总tau蛋白的比值。结果1.CJD组与其它两组相比,p-tau/t-tau的比值有明显差异(P<0.05)。2.在CJD组高浓度的磷酸化tau蛋白与进展快,病程短有关(P<0.01)。结论测定p-tau/t-tau的比值有助于CJD与AD等痴呆类疾病的鉴别,对判定预后有一定帮助。     

反义DNA和RNA：治疗病毒感染的新策略（下）

2．2siRNA的化学修饰siRNA的基因沉默效率还依赖于它的稳定性。未修饰的双链RNA比单链RNA更稳定，使用化学修饰的碱基合成siENA可进一步提高其稳定性和延长其抑制效应。广泛使用的化学修饰通常为核糖的2’位置，包括2’-O-甲基核糖、2’-O-丙烯基核糖、2’-脱氧尿苷、2’-氟2’脱氧尿苷、2’-氟2’-脱氧胞苷酸等。同义和／或反义链2’核糖位置完全替代的的siRNA分子不能诱导RNAi，然而3’突出部分或碱基配对部位的2’核糖修饰增强其在血浆中的稳定性同时不丧失活性。另一个常被修饰的是主链部分。有几项研究提示具有磷硫酰主链的siRNAs活性增强，但随修饰程度的增加活性反而下降。主链修饰还可将磷酸二酯键中的非共价氧被等电子的甲硼烷替代，这种甲硼磷酸化修饰的siRNAs比天然siRNAs更有效，与硫代修饰siRNAs相比抵抗核酶降解能力更强而毒性更低。有研究表明恰当化学修饰的siRNAs稳定性好、能与靶位更有效结合，改善其药代动力学特性的同时却不影响其内在效能。[第一段]     

全凭静脉麻醉老龄大鼠海马tau蛋白磷酸化水平与认知功能的关系

目的 探讨咪唑安定、芬太尼、丙泊酚联用对老龄大鼠认知功能的影响以及这种影响是否与海马tau蛋白磷酸化水平有关.方法 雄性18月龄SD大鼠40只,随机分成全麻组和对照组,每组20只.每组分别于处理后第1和第7天各断头处死10只,HE染色光镜下观察海马神经元结构,免疫组化染色法检测海马tall蛋白Thr231和Ser404位点磷酸化蛋白的表达水平.其中后处死大鼠于处理后第1周行水迷宫实验.结果 处理后第1天,全麻组大鼠寻找平台的时间明显长于对照组(P＜0.01),但第2～7天与对照组比较差异无统计学意义.处理后第1天,全麻组海马tau蛋白Thr231位点的磷酸化水平高于对照组(P＜0.05).第7天,两组Thr231、Ser404位点的磷酸化水平差异无统计学意义.光镜下各组大鼠海马神经元结构未见明显异常.结论 咪唑安定、芬太尼、丙泊酚联用可引起老龄大鼠麻醉后第1天出现短暂的认知功能减退,海马tau蛋白Thr231位点的过度磷酸化可能与其有关.     

Cofilin与疾病相关性

肌动蛋白是细胞骨架的主要组成成分，cofilin作为肌动蛋白结合蛋白中的一种，对肌动蛋白活性起到重要调节作用。cofdin广泛分布于各组织中，在多种细胞中表达，如平滑肌细胞、癌细胞、神经细胞等等。在很多疾病的发生于发展中起着非常重要的作用，这些疾病都与影响细胞骨架的蛋白相联系。近年来cofilin作为靶蛋白已逐渐成为研究肿瘤转移、生殖系统疾病、神经系统疾病、循环系统疾病等的研究热点。本文系统的对cofilin与疾病的相关性做一综述。     

HER2／neu抗体对SKBR3乳腺癌细胞株酪氨酸磷本化？…

研究抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ胞外区的特异性抗体对ＳＫＢＲ３乳腺癌细胞株酪氨酸磷酸化及细胞增殖的影响。方法 Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法及抗体介导的特异性细胞增殖试验；筛选乳腺癌病人抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗体阳恬血清ＩｇＧ的ＥＬＩＳＡ方法。结果 试验发现单抗ｃ－ｎｅｕ－５对     

吗啡依赖大鼠脑内环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的磷酸化

环磷酸腺苷反应元件结合蛋白 (CREB)有两种形式 :具有转录活性的二聚体和无转录活性的单体。CREB13 3位的丝氨酸残基 (Ser13 3 )可被PKA、PKC或Ca2 + /CaM等磷酸化 ,磷酸化后的CREB(pCREB)形成同源二聚体或与CREB/ATF1(激活转录因子 1)家族的其他成员形成异二聚体。CREB形成二聚体后便被激活 ,并与环磷酸腺苷反应元件结合 ,调控位于其下游的靶基因的转录[1] 。已有一些研究[2 ,3 ] 发现 ,吗啡依赖和戒断时大鼠脑内CREB的表达有改变。本实验对吗啡依赖和戒断大鼠脑内CREB的磷酸化水平进行了研究。材料和方法一、材料 :雄性…