膜表达热休克蛋白70真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞的转染

目的构建普遍适合性的膜表达热休克蛋白70(HSP70)的真核表达载体,修饰并建立HSP 70表达并结合在细胞膜表面的肿瘤细胞.方法RT-PCR法从人胚肾中获取HSP 70的cDNA,扩增成带酶切位点的目的基因.选择载体pDisplay,将目的基因插入载体多克隆酶位点中.DNA测序证实后,以脂质体转染的方法,将载体转染到黑色素瘤细胞.用G418抗性筛选获得阳性克隆.结果酶切电泳和DNA测序证实载体构建正确;目的基因的上游带信号肽序列,下游带跨膜序列.RT-PCR产物电泳、Westem Blotting、激光共聚焦显微镜和流式细胞术证实大量HSP 70表达并结合在转染的黑色素瘤细胞膜表面.结论成功地构建了膜表达HSP 70的真核表达载体;转染到黑色素瘤细胞后,细胞膜表面表达丰富的HSP70.转染细胞可以进一步制备新型瘤苗.     

良性前列腺增生症患者术后排尿异常的尿动力学分析

手术切除前列腺是治疗良性前列腺增生症(BPH)的有效方法之一,但临床资料显示大约20%的患者行前列腺切除术后仍存在不同程度的排尿异常[1].笔者对26例上述患者进行尿动力学检查并分析如下,以探讨其病因及处理方法.     

骨髓间充质干细胞治疗心力衰竭的研究进展

充血性心力衰竭(心衰)是现代社会发病率、病死率不断提高的主要心血管疾病，急性心肌梗死(心梗)是重要的致病原因。心梗后，心肌细胞坏死、凋亡造成心肌数目减少，心室重构促使心衰发生。通常认为，哺乳动物成体心肌为终分化组织，没有成肌前体细胞，受损后无分化和增生潜能，故心肌细胞丢失多不可逆。尽管有研究显示心衰时心肌细胞存在有     

CIK细胞在恶性血液系统疾病中的应用研究

细胞因子诱导的杀伤 (Cytokine inducedkiller ,CIK)细胞是一种非主要组织相溶性复合体 (MHC)限制的免疫效应细胞 ,同时表达CD3和CD5 6。CIK细胞可以由人外周血的单个核细胞在体外经与多种细胞因子和CD3单克隆抗体共同培养获得 ,其增殖能力强、杀瘤活性高、副作用小 ,是目前恶性血液病细胞免疫治疗中最具前景的细胞之一。     

顺铂、卡铂和双环铂细胞毒作用及小鼠血液系统毒副作用的比较

顺铂和卡铂均为高效、广谱的抗癌药 ,对头颈部癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肝胚细胞瘤、子宫癌、卵巢癌等具有很好的疗效[1] 。双环铂 (又名安托可金 )是新近开发研究的铂类抗癌药物 ,是含有两个羧酸的二氨合铂 ,具有较强的抗肿瘤活性[2 ] 。本实验利用体外培养的小细胞肺癌株 (NCI H4 46 )观察了三种铂类药物的细胞毒作用 ,并通过实验小鼠对三者的血液系统毒副作用进行了比较。1　材料与方法1.1动物与瘤株　健康BALB/C小鼠 ,体重 19±2 g ,由中国医科大学实验动物部提供。小细胞肺癌株 (NCI H4 46 )购自中国科学院上海细胞生物学…     

释疑解难

鉴于目前免疫学检验项目的广泛应用 ,一些读者希望介绍有关免疫学检验项目的正常值和临床意义 ,我编辑部摘录部分较新项目 ,分期刊出 ,以飨读者。     

CpG寡聚脱氧核苷酸在灵长类动物中免疫调节活性的研究进展

包含CpG基序的寡聚脱氧核苷酸(ODN)具有类似于微生物DNA激活内在免疫系统的能力，可提高适应性免疫力而抑制传染性生物的早期传播。CpG ODN在疫苗佐剂的设计以及哮喘、过敏、传染病和癌症的治疗中显示出良好的应用前景。由于CpG识别体系在进化中出现的种间差异，在啮齿类动物中表现出最强活性的CpG ODN却无法有效地刺激灵长类动物产生免疫应答。已有大量证据表明CpG ODN在小鼠中具有治疗活性，而其在灵长类动物中作用的研究仍需继续深入。现就作用于灵长类动物的CpG ODN的分类、作用机制和其作为疫苗佐剂与免疫保护剂以及在癌症、过敏和哮喘等多种疾病治疗上的应用研究进行综述。     

生长激素、肝细胞生长因子和烟酰胺对人胎胰岛细胞的增殖作用

目的研究生长激素(GH)，肝细胞生长因子(HGF)和烟酰胺(NIC)对体外培养的人胎胰岛细胞的增殖作用及其交互作用。方法采用La(2^7)正交设计法在体外培养的人胎胰岛细胞的各组中分别加入不同浓度及组合的GH，HGF和NIC，培养48h后，收集各孔细胞，DTZ染色，计数。结果GH，HGF和NIC均起主要作用，HGF和NIC的交互作用不可忽视，最佳的生长因子组合及适配浓度为GH(100ng／ml)HGF(25ng／ml)NIC(100mmol／L)。结论GH，HGF和NIC均能促进体外培养的胰岛细胞的增殖，且组合GH(100ng／ml)HGF(25ng／ml)NIC(100mmol／L)的作用最大。     

手术治疗伴逼尿肌乏力的前列腺增生症

目的探讨BPH并有逼尿肌乏力(ACD)的病人是否手术等问题,为BPH并有逼尿肌乏力的病人治疗方法的选择提供依据.方法对尿动力学检查确认有ACD的15例BPH进行手术治疗.手术后复查尿流率.对所得数据进行自身配对t检验.结果术前和术后最大尿流率分别为(3.3±3.1)ml/s和(14.88±6.08)ml/s(P＜0.05).结论在前列腺摘除后,BPH伴有逼尿肌乏力的病人也能够产生有效排尿.故对确有膀胱出口梗阻(BOO)存在的BPH病人,即使有逼尿肌收缩乏力,也应积极手术.     

糖尿病病足的护理体会

糖尿病病足是由于高血糖,组织缺血、缺氧,损害血管和神经所致,引起足部触觉及痛觉减轻或丧失.对年龄大,病程较长的病人尤其应注意足部护理.在临床护理中,95%的病人能够得到有效控制,仍有5%的病人因为糠尿病和感染引起足部坏疽.现将我们的护理体会报告如下.