灵芝孢子油干预治疗6-羟多巴帕金森病大鼠模型的实验研究

[目的]研究灵芝孢子油对6-羟多巴(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型行为学及病理改变的影响,探讨该药对黑质多巴胺能神经元的保护作用.[方法]100只SD大鼠随机分为正常对照组20只、6-OHDA组40只、灵芝孢子油 6-OHDA组40只.通过脑部立体定向法将6-OHDA注射到SD大鼠一侧黑质致密部建立6-OHDA大鼠PD模型,灵芝孢子油 6-OHDA组在造模前3 d开始给灵芝孢子油每天500 mg/kg,连续10 d.6-OHDA组喂食生理盐水做对照.造模后每周给予阿朴吗啡观察大鼠旋转行为的变化,4周后用高效液相色谱法检测大鼠纹状体多巴胺及其代谢物含量,免疫组织化学法检测黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数量,western blot法对TH蛋白进行半定量测定.[结果]①灵芝孢子油 6-OHDA组出现旋转行为的大鼠比例为10%,6-OHDA组为45%,两组比较有显著性差异.②纹状体多巴胺及其代谢物含量在两组间存在差异,多巴胺手术侧含量/手术对侧含量在灵芝孢子油 6-OHDA组为(60.12±7.5)%,在6-OHDA组为(38.58±7.26)%.③在黑质致密带区灵芝孢子油 6-OHDA组的TH免疫阳性细胞及TH蛋白表达量均较6-OHDA组显著增多.[结论]灵芝孢子油能明显改善6-OHDA大鼠模型行为学,增加纹状体多巴胺及其代谢物含量并提高黑质多巴胺能神经元的残存率,提示灵芝孢子油可能具有减缓PD病变进程的神经保护作用.     

声明

介绍了超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉的方法及基本原理，对制备工艺进行了研究。加载压力、系统加热温度、保压时间及撞击靶距是影响灵芝孢子粉破壁率的因素，通过正交试验及对加热温度和撞击靶距所做的后续试验，确定了采用自行研制开发的试验系统进行灵芝孢子粉破壁的最佳工艺条件是：加载压力300MPa，系统加热温度250℃，保压时间1h，撞击靶距10mm。在此工艺条件下，灵芝孢子粉的破壁率为88．48％。     

灵芝孢子和破壁孢子多糖对体外培养的小鼠脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞免疫调节活性的比较

目的:比较体外给药时灵芝孢子多糖(Gl-SP)和灵芝破壁孢子多糖(Gl-BSP)对小鼠脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞免疫调节活性的影响.方法:噻唑蓝(MTT)法检测淋巴细胞增殖、混合淋巴细胞培养反应(MLR)、自然杀伤细胞(NK细胞)活性;比色分析检测巨噬细胞吞噬中性红的能力;流式细胞术测定脾T细胞亚群;ELISA法测定白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)含量,生物法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性,Griess法测定NO含量.结果:当质量浓度为0.2～12.8 mg/L时两种多糖均可促进淋巴细胞增殖及丝裂原诱导的淋巴细胞增殖,提高NK细胞活性,增强腹腔巨噬细胞吞噬能力并促进TNF-α和NO分泌.两种多糖均可促进MLR,在质量浓度为12.8 mg/L时,Gl-BSP促增殖作用明显强于Gl-SP,Gl-SP或Gl-BSP(0.2～12.8 mg/L)可显著增加IL-2、IFN-γ的分泌,但相同浓度的Gl-BSP增加IL-2和IFN-γ分泌的作用均强于Gl-SP.在一定的浓度范围内,两种多糖均可显著增加双向MLR反应中CD3 T、CD4 T和CD8 T细胞百分率,Gl-BSP在质量浓度为0.2～12.8 mg/L或3.2～12.8 mg/L时,增加CD4 或CD8 T细胞的作用较Gl-SP更为显著.在质量浓度为0.2～0.8 mg/L时,Gl-BSP组的CD4 T和CD8 T细胞的比值大于Gl-SP组.结论:Gl-SP和Gl-BSP在体外试验中具有相似的免疫调节活性,Gl-BSP的某些免疫调节作用强于Gl-SP.     

口服灵芝孢子油对小鼠的扶正及减毒作用研究

目的观察灵芝孢子油的扶正减毒作用。方法以正常和H11荷瘤小鼠为对象，通过检测外周血WBC数、骨髓有核细胞数、脾脏指数、胸腺指数来观察口服灵芝孢子油（2．5，1．25，0．625g/kg）对于环磷酰胺（Cy）化疗及^60Co放疗的减毒作用；通过小鼠碳廓清实验、血清溶血素测定实验检测药物对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果灵芝孢子油中高剂量组均可明显对抗由大剂量Cy、^60Co照射造成的正常及荷瘤小鼠外周血WBC，骨髓有核细胞数，脾脏指数和胸腺指数下降（P〈0．01，P〈0．05）。灵芝孢子油各剂量均可显著提高荷瘤小鼠吞噬系数α，中高剂量组可明显提高荷瘤小鼠的血清半数溶血值（P〈0．01，P〈0．05）。结论灵芝孢子油可减低Cy和^60Co所致的骨髓抑制毒性，并可显著提高小鼠细胞和体液免疫功能。     

灵芝液体发酵产漆酶最佳培养基和培养条件研究

目的研究灵芝液体发酵产漆酶的最佳培养基和培养条件。方法以灵芝S3号菌株为试验材料,以灵芝漆酶活性为衡量指标,通过正交试验分别对灵芝液体发酵培养基及培养条件进行优化筛选。结果筛出最佳培养基组成为葡萄糖30g/L、棉花0.2%、磷酸氢二铵0.66g/L、干酪素0.5%、聚山梨酯-800.15%;优化培养条件为初始pH5.5、装液量75mL、接种量12.5%、菌龄5×24h、培养时间9×24h。结论优化培养基及培养条件后,发酵液中灵芝漆酶活性显著提高。     

灵芝抗癌活性及放化疗对HL-7702细胞的保护作用

目的：研究灵芝精粉（灵芝醇提物+水提物）、灵芝精粉氯仿提取物、氯仿提取后的醋酸乙酯提取物、2次提取后的剩余物对肝癌BEL-7402和胃癌MGC-803细胞的抑制效果及其对HL-7702细胞顺铂损伤、⁶⁰Coγ射线辐射损伤的修复与保护作用。方法: 采用MTT法检测灵芝抗癌活性及放化疗时对HL-7702细胞保护作用。结果: 灵芝氯仿提取物的抗癌活性为最强：在0.125 mg·mL^-1时,对癌细胞的抑制率已超过50％。对已受顺铂损伤的HL-7702细胞,4种提取物未能显示出修复作用,但氯仿提取物预处理可显著降低其损伤程度。对受辐射的HL-7702细胞,仅氯仿提取物对中、高剂量照射下的辐射损伤体现一定的修复作用；但4种提取物预处理均可降低其辐射损伤的程度。结论: 灵芝氯仿提取物对癌细胞的抑制作用,对正常细胞放化疗损伤的保护作用,均体现了显著的效果。     

5种中草药水提取液对灵芝三萜含量的影响

目的研究5种中草药水提取液对灵芝液体培养的菌丝体生物量和三萜含量的影响。方法在基本培养基中分别添加了终浓度为5%的中草药水提取液,液体培养4 d后,测定各灵芝菌丝的生物量和三萜含量。结果与结论中草药水提取液对菌丝体生物量均有促进作用,其中银杏促进作用最明显,增幅达27.7%,而生地最弱,增幅为4.6%;而生地水提取液对灵芝菌丝体的三萜含量有抑制作用,其余4种有促进作用,其中银杏增幅最高为17.1%。     

女贞子提取物总三萜酸降血糖作用的实验研究

目的:观察女贞子三萜酸对实验性糖尿病大鼠的治疗作用。方法:建立大鼠糖尿病模型观察该药对空腹血糖、血清胰岛素、胆固醇、甘油三酯、糖化血清蛋白的影响,以及对正常大鼠糖耐量、血糖的影响。结果:女贞子三萜酸能明显降低血糖(P<0.01)和甘油三酯(P<0.01),改善糖耐量;对血清胰岛素、糖化血清蛋白、胆固醇等影响不明显。结论:女贞子三萜酸降血糖作用较强,对血酯具有一定的调节作用。     

真空气流植物细胞破壁技术在灵芝药材提取前处理中的应用

[目的]研究真空气流植物细胞破壁技术对灵芝药材多糖提取的影响.[方法]将灵芝药材按照该工艺进行破壁,破壁药材与未破壁药材分别粉碎成约1g的药材小块,分别以40、60、80℃温浸2h,测定其多糖提取率;80℃条件下于1、2、3、4、5h取样测定其多糖提取率.同时测定破壁药材和未破壁药材的多糖含量.[结果]破壁后,多糖损失14%;但是破壁灵芝多糖的提取率均远远高于未破壁的灵芝药材.[结论]灵芝药材经过真空气流植物细胞破壁加工后在温浸的条件下可以明显提高灵芝多糖的提取率.     

Antioxidant activity of Ganoderma lucidum in acute ethanol-induced heart toxicity

The hot water extract of the mushroom Ganoderma lucidum was shown to have antioxidative effect against heart toxicity. Investigations into the mechanisms of action, level of lipid peroxidation level in vivo, and superoxide scavenging activity were also conducted. The mice were divided into six groups with ten animals in each group. Ganoderma lucidum, at doses of 10, 25 and 50 mg/kg (p.o.) was administered. Superoxide anions were assayed by UV spectrophotometer using the cytochrome C reduction method. The results of this study showed that Ganoderma lucidum exhibited a dose-dependent antioxidative effect on lipid peroxidation and superoxide scavenging activity in mouse heart homogenate. Additionally, this result indicated that heart damage induced by ethanol shows a higher malonic dialdehyde level compared with heart homogenate treated with Ganoderma lucidum. It is concluded that the antioxidative activity may therefore contribute to the cardioprotective effect of Ganoderma lucidum, and may therefore protect the heart from superoxide induced damage.