江苏部分地区慢性乙型肝炎病毒感染者天然耐药的调查

目的 通过连续监测江苏部分地区乙型肝炎病毒（HBV）感染者发生天然耐药基因变异的频度及耐药位点的分布特点,为合理选择抗病毒治疗的药物提供依据.方法 回顾性分析2004～2010年未服用核苷类似物抗病毒药物的352例慢性乙型肝炎（CHB）患者临床资料.应用焦磷酸测序技术及双脱氧链终止法基因测序的方法进行耐药基因的检测.结果 352例CHB患者中,345例基因测序成功,7例测序失败.8例有耐药基因突变,天然耐药突变检出率为2.32％.主要耐药位点为rtV173L、rtL180M、rtA181T、rtM204V、rtV207L、rtS213T、rtV214I、rtN236T.2004～2006年间145例CHB患者均未检测出耐药突变,2007、2008、2009及2010年耐药突变的检出率分别为2.63％、3.92％、4.69％和4％.多因素Logistic回归分析显示耐药突变的发生与感染者年龄相关.结论 江苏部分地区CHB患者有天然耐药基因突变,耐药突变检出率为2.32％.2004～2010年耐药突变检出率呈上升趋势.年龄超过30岁是耐药突变发生的相关因素.     

糖尿病患者院内多重耐药菌感染易感因素分析

目的：探讨糖尿病患者院内多重耐药菌感染,为临床防治提供科学依据。方法选取惠州市中心人民医院2008年1月～2012年12月糖尿病患者发生院内感染的264例进行回顾性分析,以符合多重耐药感染的120例作为病例组,非多重耐药感染的144例作为对照组,所有病例均记录以下项目：一般情况、糖尿病病程、基础疾病、糖化血红蛋白、空腹血糖、餐后2h血糖、并发症、侵入性操作、免疫功能、抗生素的使用、感染后的预后。全部数据输入电脑,采用统计软件SPSS17.0进行汇总分析。结果5年来糖尿病患者院内感染、院内多重耐药菌的发病率逐年上升,以多重耐药感染上升的速度最快。以呼吸道感染最多,最常见的病原菌为革兰阴性菌（54.8%,136/248）。年龄、住院时间、ICU病房、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、昏迷、感染前30d使用抗生素、联用抗生素是多重耐药感染的易感因素。感染后30d内的死亡率高于对照组（P＜0.05）。结论糖尿病患者院内多重耐药菌的感染十分严重,与多种因素有关,预后不良,应针对易感因素采取综合性的防治措施。     

产ESBLs大肠埃希菌CTX—M型耐药基因分析

目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌中的检出率，并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验；采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M酶基因型，对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株（52．79％）ESBLs表型检测阳性，其中91株符合供体菌标准，64株（70．33％）接合成功，接合子均确证产ESBLS。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株（94．23％）携带CTX-M型基因，其中38株（36．54％）检出blaCTX-M-1组基因，69株（66．35％）检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株（79．69％）携带CTX-M型基因，其中18株（28．13％）检出blaCTX-M-1组基因，35株（54．69％）检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型，以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主，同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。     

Newer Options for Treating Drug-Resistant (MDR+) Cancer Cells using Photoradiation Therapy

Emergence of drug resistance with conventional cytotoxic therapy is a major challenge towards the curability of many cancers, especially in patients undergoing autologous BMT with ex-vivo purged hematopoietic support. We have explored the potential role of photoradiation therapy in purging hematopoietic stem cells of various hematological malignancies. Benzoporphyrin derivative, monoacid ring A (BPD-MA), dihematoporphyrin ether (DHE), and MC-540 were evaluated for the “ex-vivo” purging of residual tumor cells from autologous bone marrow (BM) grafts. BPD-MA and DHE photosensitizing activity was tested against two human large cell lymphoma cell lines and colony forming-unit leukemia (CFU-L) derived from patients with acute myelogenous leukemia (AML). In mixing experiments four log elimination of tumor cell lines was observed after 1 hr of incubation with BPD-MA or DHE followed by white light exposure. By comparison, using the same concentration of BPD-MA or DHE, the mean recovery of normal BM progenitors was 4-5.2% for granulocyte-macrophage colony forming unit (CFU-GM) and 5-9.8% for burst forming unit erythroid (BFUE).

The T lymphoblastic leukemia cell line CEM and its vinblastine (VBL)-resistant subline CEM/VBL₁₀₀. along with the acute promyelocyte leukemia cell line HL-60 and its vincristine (VCR)-resistant subline HL-60/VCR, were also tested. Our results demonstrated the preferential cytotoxicity of BPD-MA and DHE toward neoplastic cell lines and CFU-L from AML patients. In addition, DHE was slightly more effective in purging tumor cells expressing the p-170 glycoprotein. These results suggest that photoradiation would be useful for “ex-vivo” purging of malignant cells. Other methods to deal with decreasing drug resistance are also detailed.     

第三代头孢菌素的应用与细菌耐药性

随着头孢菌素药物的广泛应用，细菌对该类抗生素的耐药性也迅速增长，笔者就目前第三代头孢菌素类抗生素的应用现状，临床分离致病菌对头孢类抗生素的耐药机制、防治对策以及合理应用抗菌药物综述如下。     

胶质瘤耐药的分子机制

恶性胶质瘤手术后化疗效果不佳，除了血-脑屏障对药物进入脑组织的阻止作用外．肿瘤细胞本身对抗肿瘤药的耐药性也是化疗失败的重要原因，体内外研究发现肿瘤耐药的分子机制很复杂，包括靶基因突变、靶基因扩增、DNA损伤修复能力差异、药物进入肿瘤细胞内浓度减少等一近年来，分子生物学研究发现，肿瘤细胞内某些基因如：MDR、MGMT、卡复苷酸切除修复（NER）、谷光甘肽-S-转移酶（GST）、蛋白激酶C（PKC）、错配修复（MMR）等的表达与否与其耐药密切相关，且对其研究有了很多新的进展。     

182株铜绿假单胞菌感染分布及耐药性分析

目的探讨铜绿假单胞菌临床分离株的感染分布情况及其对14种抗生素体外耐药性,指导临床合理应用抗生素。方法采用K-B纸片扩散法对2004年1月～2005年12月年住院患者分离的铜绿假单胞菌进行抗生素敏感性测定,同时对其感染分布及耐药性进行分析。结果两年内共检出182株铜绿假单胞菌。感染部位依次为:呼吸道(82.4%)、伤口(12%)和泌尿道(3.8%)等。铜绿假单胞菌对14种抗生素敏感性较高的是亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦,分别为3.2%、7.1%、9.8%,耐药率较高的是头孢噻肟、头孢唑啉,耐药率为47.8%、39%。结论本院铜绿假单胞菌分布以呼吸道为主,对碳青酶烯类、β-内酰胺酶抑制剂复合物保持较好的敏感性,但耐药情况有随时间增加的趋势,头孢三代的耐药率高于国家细菌耐药监测研究组(BRSSG)的结果,所以应加强对铜绿假单胞菌耐药性的监测,合理应用抗生素是延缓耐药菌株增加的最有效办法。     

Effect of two new bcl-2 antisenses on drug-sensitivity of cells fromn leukemia patients

Objective: To investigate the effect of two antisense oligonucleotides on cell surviving, bcl-2 expression and apoptosis of leukemia cells. Methods: The experimental assays were performed with cell culture, immunochemistry and flowcytometry. Results: The two antisense oligodeoxynucleotides, combined with Vpl6 or Ara-c or DNR, were able to decline the survival rate of myeleukemic cells, downregulate bcl-2 gene expression and induce apoptosis of leukemic cells significantly, as compared with Vp16 or Ara-c or DNR alone. Conclusion: It is possible for the two new bcl-2 antisenses to be developed into clinical trials for leukemia and tumor with bcl-2 gene overexpression.     

细菌耐药性与新抗菌药物的研究

伴随着抗生素的广泛使用,耐药及多药耐药细菌已经严重威胁了人类的健康.针对细菌产生耐药的各种机制,筛选和研制新型抗耐药细菌药物是战胜细菌耐药性的重要途径.同时,应重视和加强新药研制相关基础研究和微生物药物的筛选,加速开发创新药物,应对不断出现的新病原体和新耐药细菌带来的挑战.     

抗菌药物对致VAP的铜绿假单胞菌体外抗菌活性分析

目的了解呼吸机相关性肺炎(VAP)铜绿假单胞菌(PA)的耐药状况,为合理使用抗菌药物提供依据。方法常规培养分离细菌并用API系统鉴定;药敏试验采用K-B纸片琼脂扩散法和肉汤定量稀释法;双纸片确认试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),三维试验确认法检测AmpC酶。结果PA对常用抗菌药物总耐药率依次为:环丙沙星84.8%,头孢曲松78.0%,头孢哌酮55.9%,左氧氟沙星52.5%,头孢他啶37.3%,头孢哌酮/舒巴坦23.7%,亚胺培南/西司他丁23.7%,头孢吡肟6.8%。PA产ESBLs和AmpC酶的阳性率分别为37.29%和18.64%。头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南/西司他丁对PA的抑菌率分别为78.0%、55.9%和33.9%。结论PA产酶率和多重耐药率已相当严重,临床应根据药敏试验和抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)选用抗菌药物。