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目的探讨龟板提取物(Testudinis Carapax et Plastrum extracts,TCPE)对血清饥饿诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法采用血清饥饿3 d的方法建立PC12细胞凋亡模型,并将细胞分为对照组,模型组,TCPE低、高剂量(3、30μg/mL)组。在施加处理因素3 d后,用MTT比色分析测定细胞吸光度值,Annexin V/PI双染流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blotting检测Caspase-3、BMPs信号通路的表达水平,并检测BMPs信号通路阻断后TCPE的抗凋亡作用。用Bio-Rad Quantity One凝胶分析系统对条带进行半定量分析。结果 MTT与流式细胞术结果显示,TCPE能提高PC12细胞活性,降低PC12细胞凋亡率,并呈剂量依赖性,TCPE组与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05、0.01)。Western blotting结果显示,TCPE能降低Caspase-3表达,增加BMP4、BMPR-IA、p-Smad1/5/8的表达,TCPE组与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05、0.01)。TCPE对BMP2、BMP7、BMPR-II的表达没有影响,BMPR-IB没有被检测出。BMP4中和抗体减弱了TCPE的抗凋亡活性。结论 TCPE具有抑制血清饥饿诱导PC12细胞凋亡的作用,且这种作用呈剂量依赖性,其作用机制可能与激活BMP4信号通路表达有关。 相似文献
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为了进一步探讨骨形态发生蛋白(BMP)/分化抑制因子(Id)通路在龟板抗PD大鼠多巴胺能神经元凋亡中的作用,本实验用6-羟基多巴胺(6-OHDA,0.2%)于大鼠左侧黑质致密带注射2μl造成PD模型,设立正常对照组、模型组和龟板组,用免疫组织化学染色方法观察PD大鼠中脑黑质骨形态发生蛋白IB受体(BMPR-IB),Smad8和Id1阳性细胞数目;用Western-blotting检测BMPR-IA、BMPR-IB、BMPR-Ⅱ、Smad1、Smad5、Smad8和Id1蛋白表达水平的变化。免疫组化染色显示龟板组PD大鼠中脑黑质BMPR-IB,Smad8和Id1的阳性细胞数明显多于模型组(P<0.05)。Western-blotting结果显示龟板组PD大鼠中脑黑质BM-PR-IB,Smad8和Id1的蛋白表达水平高于模型组,而BMPR-IA,BMPR-Ⅱ,Smad1和Smad5没有被检测出。以上结果表明龟板能上调6-OHDA诱导的PD大鼠中脑黑质BMPR-IB,Smad8和Id1的表达,这可能是其抗PD大鼠多巴胺能神经元凋亡的分子机制。 相似文献
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龟板含药血清对大鼠骨髓间质干细胞体外增殖的影响 总被引:19,自引:0,他引:19
[目的]观察益肾中药龟板血清对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外增殖的影响。[方法]使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞进行培养,经5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,分别从光学显微镜下的形态学特征、免疫细胞化学染色后的MSC表型特征、四甲基偶氯唑盐(MTT)染色后MSC的吸光值以及以Brdu、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色后MSC的阳性细胞数变化等角度观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSC的生长变化。[结果]不同浓度的龟板血清均以浓度依赖方式促进MSC增殖活力和增加Brdu、PCNA阳性细胞数,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。[结论]龟板血清可促进MSC的增殖而有利于细胞脱氧核糖核酸(DNA)合成,推测这可能是龟板补肾的机理之一。 相似文献
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龟板为龟科动物乌龟 Chinemysreevesii( Gray)的腹甲 ,是常用中药。我们从龟板入汤剂的角度出发 ,对三种不同炮制品进行了较系统地定性和定量分析 ,为临床合理利用龟板提供了一定的依据。1 实验样品龟板购自莱阳药材公司经加工处理过的干燥药材。将其粉碎成适宜块状 ,混合均匀 ,随机取样 ,制备下列炮制品。1 .1 生品 为上述经加工处理过的干燥生龟板块。1 .2 砂烫品 将砂置锅中 ,用武火炒至砂滑利状态 ,投入定量大小分档的净龟板 ,炒至质酥、表面呈淡黄色 ,取出 ,筛去砂 ,称重 ,平均得率为 88%。1 .3 砂烫醋淬品 将一定量龟板砂烫后… 相似文献
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78.
目的 研究龟板联合石菖蒲有效成分β-细辛醚对6-OHDA诱导的SD大鼠帕金森病(PD)模型的神经保护作用及机制。方法 以大鼠自主活动度和滚轴实验研究动物的行为学,以中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)观察多巴胺能神经元的损伤程度,并观察纹状体中α-突触核蛋白(α-syn)含量来探讨药物作用机制。结果 模型组自主活动次数、滚轴运动能力均显著低于正常对照组(P <0.05);多巴胺能神经元中TH阳性细胞数明显减少;纹状体内的α-syn蛋白水平明显升高。龟板联合β-细辛醚给药后能明显改善模型组大鼠的行为学表现,增加TH阳性细胞数,降低纹状体内α-syn蛋白水平。结论 龟板联合β-细辛醚具有神经保护作用,能对抗模型组大鼠PD模型中的神经损伤,其机制可能与下调α-syn蛋白水平有关。 相似文献
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80.
龟板对脊髓损伤后脊髓雌激素α受体及其基因表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :观察龟板对脊髓损伤后脊髓雌激素α受体 (ER -α)及其基因表达的影响。方法 :以改良的Allen法建立大鼠脊髓损伤模型 ,随机分为对照组、模型组和龟板治疗组 ,用免疫组织化学和原位杂交方法检测脊髓中ER -α及其mRNA的表达。结果 :模型组中脊髓ER -α受体及其mRNA的阳性细胞数与对照组比较显著减少 ;治疗组中ER -α及其mRNA的阳性细胞数与模型组比较显著增加。结论 :龟板可增加脊髓损伤后脊髓ER -α及其基因的表达。 相似文献