补肾法诱导间充质干细胞向神经方向分化研究

目的　在干细胞具先天之精属性新理论指导下 ,探讨补肾中药龟板对间充质干细胞的体外诱导作用。方法　体外分离培养间充质干细胞 ,以龟板水煎液对其进行体外诱导 ,免疫组化鉴定NSE、Nestin、GFAP等标志。结果　龟板可体外诱导间充质干细胞转分化为神经干细胞 ,但还没有被诱导为神经元样细胞与星形胶质细胞。结论　补肾法可促进干细胞之间的相互转换 ,初步验证了干细胞具先天之精属性新理论。     

胶类中药只能烊化不可煎熬

中药中常用的胶块、膏油、饴糖类药有：阿胶、鹿角胶、龟板胶、海龟胶、鸡血藤膏、益母草膏、雪梨膏、麦茅糖、蜂蜜、鱼油等。这类药一般都宜兑八热药液中烊（溶）化服用。而硬胶块阿胶、鹿角胶、龟板胶，在临方调配时置铜盅内捶杵细碎成粉状，以易于溶解。待熬煎好药液后，趁热倒入碗内并投入打碎的胶药，用筷子不停地拌搅至完全溶化为止。值得关注的是，凡系正品的胶块绝对可以溶化，完全不能溶解的为伪品，真伪识别也在于此。[第一段]     

龟板醇提物对大鼠骨髓间充质干细胞氧化损伤的修复及其抗脂质过氧化作用

目的研究龟板95%乙醇提取物(醇提物)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)氧化损伤修复及其抗脂质过氧化作用。方法使用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经CD44鉴定后以H2O2作用于MSC3h,建立MSC氧化损伤模型,通过MTT法检测不同质量浓度龟板醇提物(0.166、0.833、1.66、3.32、4.98mg/mL)对MSC损伤的修复。50只SD大鼠,随机分为5组,受试组分别ig0.01、0.03、0.09g/(kg.d)龟板醇提物;阳性对照组ig维生素E200mg/(kg.d);对照组ig等量的蒸馏水。每天1次,共7d,分别用TBA比色法、亚硝酸盐法测定大鼠肝中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与H2O2(1∶10)损伤组比较,龟板醇提物各组具有显著性差异(P<0.01、0.05);与对照组比较,龟板醇提物低、中、高剂量组MDA水平均明显降低(P<0.01),同时能明显提高SOD活力(P<0.01、0.05)。结论龟板醇提物对大鼠MSC氧化损伤具有明显修复作用,同时,具有抗脂质过氧化作用。     

中药龟板活性部位GC-MS生物活性指纹图谱和应用

目的 探求调控骨髓间质干细胞中药的共性。方法 硅胶柱层析龟板活性部位浸膏，用石油醚-乙酸乙酯作洗脱剂，梯度洗脱，得到16个样品；采用MTT法研究了它们对rMSCs的增殖调控作用，根据总离子图的相似保留时间和相应峰面积，获得促进rMSCs的增殖的指纹图；同样根据它们的总离子图的相似保留时间和相应峰面积也获得了抑制rMSCs增殖的指纹图；用中药龟板提取物有效部位指纹图谱预测中药汤剂“四物汤”和“栽培红厚壳果仁”共7个样品。结果 活性实验结果显示Ts-2、Ts-3、Ts-11、Ts-12、Ts-16能促进rMSCs的增殖作用（P〈0．05）；Ts-4对rMSCs具有明显抑制作用，其他样品对rMSCs的增殖作用不显著（P〉0．05），不具统计学意义；龟板活性部位指纹图谱预测其他中药活性正确率为86％。结论 这种以生物活性为基础的指纹图谱具有科学性，为寻找相似活性的中药提供新思路。     

龟板调控BMSCs增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏松症的研究进展

近年来,中医药在抗骨质疏松症方面显示出独特优势。龟板被证实可通过miRNA及其靶基因、信号通路及相关因子调控BMSCs功能,从而抗骨质疏松症。本文对龟板调控BMSCs增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏松症的研究进展进行综述,发现龟板体外可通过调节BMP-4、VDR、RARα、Id1等表达调控BMSCs增殖;可上调HGF/c-met轴、SDF-1/CXCR4轴促进BMSCs迁移;可通过调节成骨相关因子、miRNAs和信号通路调控BMSCs成骨分化。此外,龟板体内可有效抗PMOP、GIOP和SOP。本文旨在为中医药防治骨质疏松症提供相关参考。     

龟板含药血清促进骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白4的表达

目的 龟板有促大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖作用,本研究观察龟板含药血清对MSCs中骨形态发生蛋白4(BMP4)表达的影响.方法 使用密度梯度法分离大鼠骨髓间充质干细胞进行培养,传代纯化,在基础培养液中添加不同浓度龟板含药血清和对照血清,用荧光定量PCR和原位杂交方法检测BMP4 mRNA表达,用ELISA、免疫组织化学和免疫荧光组织化学法结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测BMP4蛋白表达的变化.结果 BMP4蛋白和mRNA表达相一致,龟板含药血清以浓度依赖方式促进MSC的BMP4 mRNA及其蛋白表达.结论 龟板含药血清以时效和量效依赖性促进BMP4在MSCs的表达,可能与龟板促MSCs增殖作用有关.     

龟板在体外对SAC诱导肾虚症病人B淋巴细胞增殖的影响

用SAC诱导的B细胞转化试验观察了龟板煎液在体外对肾阳虚,肾阴虚和正常人B细胞转化功能的影响。结果表明肾阳虚病人的SI(t)和Δcpm(t)明显低于肾阴虚病人(p<0.05),而肾阴虚病人与正常人无明显差异(p>0.05)。此外,还比较了龟板煎液体外对PHA诱导淋巴细胞转化的影响,表明龟板煎液对正常人体外PHA诱导淋转有抑制作用。作者认为,龟板煎液体外对肾阴虚病人B细胞有一定的滋养作用,而对肾阳虚病人则有抑制作用。     

几种龟板的鉴别

龟甲最早见于《神农本草经》,当时用龟背、腹甲入药。宋代以后 ,开始使用龟腹甲入药 ,其形状如板 ,故称“龟板”。 1 995至以前各版《中国药典》规定以龟科动物乌龟 Chinemys reevesii ( Gray)的腹甲入药。但最新版《中国药典》则规定其背甲 .腹甲均入药。由于历史原因 ,龟板药用较背甲多。近些年来 ,龟板紧缺 ,品种就逐趋复杂。在亳州药材市场中 ,我们发现完整的甲壳 (背、腹甲相连 )及背甲品种都较少 ,以腹甲多见。龟壳腹甲盾片如图 1所示。现对常见七种非正品龟板进行了鉴别。1　 8种龟板检索表 :1　龟板前端浑圆 ,胸盾和腹盾间有韧带组…     

龟板含药血清对骨髓间充质干细胞c-met表达及迁移的影响

[目的]探讨龟板含药血清对骨髓间充质干细胞（MSCs）肝细胞生长因子受体（c-met）表达及迁移的影响.[方法]密度梯度离心法分离、培养MSCs,改良boydon小室法检测MSCs迁移功能,Western blot检测c-met蛋白表达,携带siRNA腺病毒转染下调c-met表达.[结果]龟板含药血清共培养明显增强MSCs的迁移能力,且呈浓度依赖性.同时,龟板含药血清增加MSCs的c-met蛋白表达,低表达c-met蛋白可明显减弱龟板含药血清的促MSCS迁移作用.[结论]龟板含药血清可能通过肝细胞生长因子（HGF）/c-met轴促MSCs迁移.     

骨筋宝治疗膝关节骨性关节炎48例

2002年5月～2009年2月我院用骨筋宝汤、酒治疗膝关节骨性关节炎93例,取得了很好的疗效,现报道如下。一般资料93例患者均为我院门诊治疗的病人,其中男58例,女性35例;年龄35～75岁,平均55岁。93例随机分为治疗组48例,对照组45例。病理分析:一般认为与组织退化变性和长期磨损有关,早期关节软骨变黄、粗糙、变脆、失去光泽,甚至发灰,继之出现裂纹,软化或剥脱,骨质裸露,软骨周围增生,骨赘形成,软骨下骨质致密、硬化、关节肥大、畸形以及发生运动受限。晚期可行成关节积液,畸形,关节内游离体。中医认为:此病属痹证,主要是风、寒、湿之邪使经络闭阻,影响气血运行,导致肌肉、筋骨、关节发生酸痛、麻木