高表达醛糖还原酶相似基因细胞株的建立和鉴定

目的 建立高表达醛糖还原酶相似基因的细胞株。方法 通过阳离子脂质体转染法将醛糖还原酶相似基因导入HepG2细胞，建立稳定表达该基因的细胞株，采用PCR，RT-PCR等方法鉴定醛糖还原酶相似基因在HepG2中的表达情况。结果 成功建立了高表达醛糖还原酶相似的转染细胞株。     

硬膜外阻滞复合异丙酚60例临床观察

目的：探讨异丙酚适时给药方法和剂量的临床效应。方法：组①异丙酚负荷量1．5mg/kg，5min后开始维持3.75mg.kg^-1.h^-1；组②负荷量0．75mg/kg，随之接与组①相同维持量；组③以0．2mg.kg^-1.h^-1共5min为负荷量，随后接维持量。结果：（1）组①血压下降，呼吸抑制、血氧饱和度低于90％的发生率较高。组②③不发生呼吸抑制和血氧饱和度严重降低。（2）有良好的镇静制动作用，其深度调整容易。（3）术中无恶心呕吐或鼓肠，停药后清醒迅速无不适。结论：以适当方式给一定量的异丙酚，是良好的硬膜外麻醉辅助用药。     

LC—MS法测定人血浆中克林霉素浓度及药代动力学研究

目的 :建立人血浆中克林霉素浓度的高效液相色谱 -质谱法 ,测定志愿者口服盐酸克林霉素胶囊后的血药浓度 ,并对供试制剂和参比制剂的生物等效性进行评价。方法 :血浆中加入内标西沙必利后碱化 ,以乙酸乙酯提取 ,进行高效液相色谱 -质谱法检测。色谱柱为 Kromasil ODS1 5 0× 4 .6 mm,5 μm,流动相为甲醇 -1 %冰醋酸 ( 5 7∶ 4 3) ,流速 0 .8ml/min,质谱检测采用选择性离子检测方法。 2 0名健康志愿者随机分成两组 ,分别服用供试胶囊和参比胶囊 ,临床实验方案采用双交叉实验设计法。结果 :克林霉素的线性范围为 0 .0 0 5～ 1 5 μg/ml,最低检测浓度为 1 ng/ml,本测定方法的提取回收率在 1 0 0 .5 %～ 1 0 5 .2 % ,用本法测定了 2 0名志愿者随机交叉口服单剂量 6 0 0 mg后血浆中药物的浓度经时变化过程 ,并对其药动学参数进行估算。测得的 2种胶囊的主要药代动力学参数无显著性差异。结论 :该法简便 ,准确 ,灵敏度高     

儿童髓母细胞瘤中VEGFR-2的表达

目的：探讨血管内皮生长因子受体VEGFR－2在儿童髓母细胞瘤中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化LSAB法检测84例获随访的儿童髓母细胞瘤中的VEGFR－2表达，按术后生存期3，5，10年分为A，B，C三组，使用Cox回归统计分析。结果：84例儿童髓母细胞瘤中，VEGFR－2阳性表达74例（88．09％），A，B，C三组间VEGFR－2阳性表达分别为100％，88．89％，55．33％（P＜0．01），Cox回归分析显示VEGFR－2是影响生存时间的一个独立的预后因子，它与预后存在负相关关系。结论：VEGFR－2表达水平可作为儿童髓母细胞瘤的预后指标之一。     

抗前列腺增生药SL—89．0519—08的合成

目的：研究治疗前列腺增生的α1－受体拮抗剂SL－89．0519－08的合成路线。方法：以5－氯－2－甲氧基苯胺为原料，经环合，烃化，脱保护基和亲核取代等步骤，合成了目标化合物，同时对原料合成工艺进行了摸索。结果：合成的目标化合物经IR，^1HMNR,EI-MS和HRMS得以确证。结论：该合成工艺和路线适宜工业化生产。     

大鼠MMP-13重组腺病毒载体的构建

目的　构建大鼠MMP1 3重组腺病毒载体。方法　将MMP1 3cDNA目的片段插入腺病毒柯氏质粒中 ,再将此质粒与腺病毒DNA末端蛋白复合物共转染 2 93细胞 ,通过同源重组构建MMP1 3 重组腺病毒载体。结果　MMP1 3 重组腺病毒载体经PCR鉴定正确 ,包装纯化后 ,检测病毒滴度为 4× 1 0 9PFU/ml。结论　成功地构建了RatMMP1 3 重组腺病毒载体 ,为下一步行MMP 1 3转基因治疗低顺应性膀胱的研究提供了条件     

慢性乙型肝炎45例HBV基本核心启动子变异及HBV-DNA定量检测

采用聚合酶链反应－酶联免疫吸附法检测45例慢性乙型肝炎乙肝病毒基本核心启动子（HBV－Bcp）变异及HBV－DNA定量，结果HBV－Bcp变异阴性组HBV－DNA定量值明显低于HBV－Bcp变异阳性组（P＜0．05），提示HBV－Bcp变异可促进乙肝病毒繁殖，对慢性乙型肝炎患者检测HBV－Bcp变异有一定的临床意义。     

3-(3-吡啶基)-6-芳基-7H-1,2,4-三唑并[3,4-b][1,3,4]噻二嗪的合成与波谱表征

目的：研究分子中含吡啶基的有多个杂环的化合物系列的波谱表征，方法：由烟酸出发，经多步反应，制得有吡啶基的均三唑并噻二嗪化合物，并进行红外，核磁共振氢谱与碳谱测试。结果：得到原料，中间体和产物的红外光谱图，产物的核磁共振氢谱与碳谱图。结论：标题化合物红外光谱1600cm^-1处多有C＝N伸缩振动峰，1250cm^-左右有N－N＝C伸缩振动峰，700cm^-1有C－S－C弯曲振动峰；噻二嗪亚甲基氢的化学位移δ值约为4．46，吡啶基四个氢原子化学位移约为9．3、8．9、8．7、8．0，噻二嗪亚甲基碳化学位移为23。     

B细胞淋巴瘤TIL-T的IL-2Rα基因突变及蛋白表达检测

目的 :检测B细胞淋巴瘤 (B NHL)中肿瘤浸润T细胞 (TIL T)的活化标记IL 2Rα(CD2 5 )的基因及蛋白表达 ,寻找TIL T在B NHL肿瘤微环境中存在意义的实验依据。方法 :将 19例B NHL提取RNA ,采用RT PCR和SSCP检测其IL 2Rα的Ⅳ Ⅷ外显子基因突变与否 ;19例B NHL采用细胞免疫化学染色进行CD3、CD4、CD8、CD2 0、CD2 5细胞免疫表型的分析 ;2 9例B NHL和 2 0例良性淋巴组织 ,采用冰冻切片免疫组化方法进行IL 2Rα(CD2 5 )蛋白表达的检测。结果 :SSCP显示 19例TIL -T的IL 2Rα未发现异常泳动条带。细胞免疫化学染色示B NHL中 5 2 .6 3% (10 /19例 )的CD2 5 +细胞少于 10 % ,TIL T(CD3+)与CD4相关 (r =0 .5 7,P <0 .0 1)并与CD2 5相关 (r =0 .5 0 ,P <0 .0 5 )。免疫组化示 86 .2 % (2 5 /2 9例 )的B NHL中CD2 5表达 (+/- )和 (+) ,且主要表达在TIL T细胞上 ,呈散在分布 ,阳性细胞少于T标记细胞。结论 :19例TIL T的IL 2Rα在RNA水平未发现基因异常 ;CD2 5蛋白在B NHL中呈弱表达趋势。提示部分TIL T不表达CD2 5 ,推测TIL T的IL 2Rα的表达在转录后机制中可能出现异常或TIL T存在活化障碍。