缬草提取物对大鼠实验性肺纤维化的干预作用

目的 探讨缬草提取物对博莱霉素所致大鼠肺间质纤维化的干预作用及其机制。方法 健康Wistar大鼠气管内一次性注入博莱霉素5 mg•kg –1制作肺纤维化模型，取造模存活大鼠65只，随机分为缬草低、高剂量组和秋水仙碱组各16只，模型组17只。造模后第2天始分别灌胃给予缬草提取物100，20 mg•kg-1和秋水仙碱100 μg•kg–1，以及0.9%氯化钠溶液10 mL•kg-1，每天1次。各组于第7天处死大鼠6只，第28天处死剩余大鼠。另取8只正常大鼠，气管内一次性注入0.9%氯化钠溶液1.0 mL• kg –1，灌胃给予0.9%氯化钠溶液10 mL• kg–1作为健康对照组，于第28天处死。大鼠处死后，取右下肺叶做HE染色和Masson染色观察肺组织结构改变；免疫组织化学法检测肺组织中的转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF β1）表达改变；取左下肺叶检测羟脯氨酸（HYP）含量。结果模型组大鼠观察期内死亡3只（18.75%），7 d肺组织呈现重度肺泡炎改变合并有TGF β1表达显著升高，28 d肺组织胶原纤维重度增生并HYP水平显著升高；缬草不同剂量组及秋水仙碱组第7天肺泡炎较模型组减轻，TGF β1表达较模型组弱（P＜ 0.05)，第28天缬草不同剂量组及秋水仙碱组肺纤维化病变较模型组减轻，羟脯氨酸含量较模型组低（P＜0.05)。结论缬草提取物可以有效防治博莱霉素诱导的大鼠肺泡炎及肺纤维化，其机制可能是降低TGF β1表达。     

参麦注射液对家兔术后伤口愈合的实验研究

目的观察参麦注射液对家兔伤口愈合的影响。方法对家兔行开腹术后缝合，家兔每日静注一次参麦注射液，观察术后伤口组织羟脯氨酸（Hyp）的含量。结果：参麦注射液对术后第4天伤口组织Hyp含量明显增高。结论参麦注射液有促进家兔术后伤口愈合的作用。     

HG颗粒对四氯化碳复合法致肝纤维化大鼠肝胶原纤维及羟脯氨酸含量的影响

目的研究HG颗粒对（四氯化碳）CCl4致肝纤维化大鼠肝脏胶原纤维及羟脯氨酸（Hyb）含量的影响。方法70只SD大鼠，除空白对照组10只外，其余各组大鼠皮下注射CCl4，同时子高脂饲料和20％乙醇喂养6周建立肝纤维化大鼠模型，存活大鼠随机分为5组，加上空白对照组，动物共计6组，分别给予药物或蒸馏水。空白对照组：蒸馏水0．1ml／kg；模型对照组：蒸馏水0．1ml／kg；HG颗粒高，中，低3种剂量组：6，3，1．5g生药／kg；复方鳖甲软肝片组：1g／kg，灌胃治疗，1次／d，连续g周。观察大鼠肝胶原纤维及Hyb含量的变化。结果模型大鼠肝胶原纤维及Hyb含量均明显增高。HG颗粒3剂量组治疗后均能降低大鼠肝胶原纤维组织及Hyb含量，复方鳖甲软肝片亦可降低胶原纤维及Hyb含量。结论HG颗粒对CCl4复合法致肝纤维化模型大鼠具有显著的治疗作用。     

异硫氰酸苯酯衍生化-HPLC法测定龟甲中胶原蛋白

目的 采用异硫氰酸苯酯衍生化法分析龟甲中胶原蛋白.方法 龟甲中胶原蛋白经酸水解后分解为含有羟脯氨酸的氨基酸混合物,经异硫氰酸苯酯衍生化后,以0.1mol/L醋酸钠溶液-乙腈(94:6,pH6.5)与乙腈-水(80:20)为二元流动相,经C18色谱柱分离,254nm处测定羟脯氨酸.通过测定样品中羟脯氨酸的量来计算样品中胶原蛋白的量.结果 羟脯氨酸在0.02～0.20mg/mL时与峰面积呈良好的线性关系,回收率为102.0%.结论 建立的龟甲中胶原蛋白的HPLC分析方法分离效果好、准确、快速、干扰少.     

肝纤康对大鼠肝纤维化的抑制作用及其机制研究

目的观察肝纤康对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响并探讨其可能机制。方法用CCl4复制大鼠肝纤维化模型,同时予以肝纤康灌胃治疗,测定血清ALT、MDA、HA、LM及肝组织GSH、Hyp含量,并观察肝组织病理变化。结果模型组血清ALT、MDA、HA、LM及肝组织Hyp含量显著升高,肝组织GSH含量显著降低,肝纤维化病变明显;肝纤康治疗组血清ALT、MDA、HA、LM及肝组织Hyp含量明显降低,肝组织GSH含量明显升高,肝纤维化病变明显减轻。结论肝纤康对大鼠肝纤维化具有明显抑制作用,其机制可能与减轻肝细胞脂质过氧化损伤,减少细胞外基质在肝组织沉积有关。     

玄参水提物对心室重构大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨玄参对心室重构大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法腹主动脉缩窄法制备大鼠心室重构模型。8周药物干预后,测定大鼠左室及全心肥厚指数(LVWI、HWI);紫外分光光度法测心肌羟脯氨酸的量(hydroxproline,Hyp);病理切片HE染色观察心肌细胞横断面面积;RT-PCR测定心肌组织转化生成因子β1基因(TGF-β1mRNA)表达水平。结果玄参水提液能降低心肌肥厚指数、羟脯氨酸量,减小左心室心肌细胞的横断面面积;显著降低TGF-β1mRNA表达水平。结论玄参水提液对心肌细胞和间质胶原重构两方面都有显著的抑制作用,抗心室重构的作用机制与抑制TGF-β1mRNA表达有关。     

抗TGF—β2抗体对滤过泡瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的 观察抗转化生长因子-β2(TGF-β2)抗体对体外培养的滤过泡成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响.方法 利用手术修复人眼小梁切除术后失败滤过泡修复时切除下来的瘢痕组织进行组织块培养,获得成纤维细胞(FB).将0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用于FB 24h以及0.14μg/mL(半数抑制率质量浓度,IC50)抗体作用0、24、48、72h,通过生物化学显色法、RT-PCR法检测抗TGF-β2抗体对成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量. 结果在FB中加入0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用24h及IC50质量浓度处理0、24、48、72h,结果显示随着抗TGF-β2抗体质量浓度增加及作用时间延长,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达依次减少,羟脯氨酸(HPr)及胶原含量逐渐降低(P＜0.05).结论 抗TGF-β2抗体能减少Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达及合成.     

亚硒酸钠、硫酸镁对石英致细胞因子释放和羟脯氨酸合成影响的体外研究

[目的]观察亚硒酸钠(Na_2SeO_3)、硫酸镁(MgSO_4)对二氧化硅(石英)致巨噬细胞(RAW264.7)释放肿瘤坏死因子(TNF-a)、白介素-1(IL-1)的单独拮抗作用以及对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平变化的单独以及联合拮抗作用。[方法]对数生长期的RAW264.7细胞,调整浓度为2×10~5个/ml。在染200mg/L石英同时单独加入不同浓度Na_2SeO_3、MgSO_4溶液,24h后测定培养液中TNF和IL-1水平,并取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量。另外,在染石英同时联合加入不同浓度的Na_2SeO_3和MgSO_4溶液,培养24h后取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定其中的Hyp含量。[结果]①与石英组比,Na_2SeO_3对RAW264.7细胞释放TNF-α无明显影响,MgSO_4可以显著降低TNF-α的活性(P<0.05),其中以1.0μmol/L MgSO_4的效果更为明显。②与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3、MgSO_4可以降低IL-1的活性,其中以0.5μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4的效果最好(P<0.05)。③与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3、MgSO_4可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P<0.05),其中以2.0μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4的效果最明显。④与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3与MgSO_4联合可以降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平,其中以2.0μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4联合作用效果最明显(P<0.05)。[结论]一定剂量的MgSO_4对石英致巨噬细胞释放TNF-α具有拮抗作用;一定剂量的Na_2SeO_3和MgSO_4对石英致巨噬细胞释放IL-1具有单独拮抗作用,对人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独及联合拮抗作用。     

呼吸道异物患儿肺泡灌洗液中羟脯氨酸基质金属蛋白酶9及其抑制物水平的研究

目的以肺泡灌洗液(BALF)中羟脯氨酸(HYP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其抑制物(TIMP-1)为观察指标，了解呼吸道异物吸入对气道损害、重建的影响。 方法对2002年6月至2003年3月在浙江大学儿童医院住院的46例呼吸道异物患儿，按异物滞留体内时间分为3组(A组：<7d，B组：~30d，C组：>30d)，对3组患儿的BALF进行细胞学分析，并对其中的HYP、MMP-9细胞阳性率和TIMP-1质量浓度进行测定。对照组为12例有异物吸入可疑病史，但最后排除的儿童。 结果对照组与患儿组间细胞学计数差异无显著性(P>0.05)，但肥大细胞仅在患儿BALF中发现。对照组及各组患儿的MMP-9细胞阳性率分别为33.3%、62.5%、80.0%和93.3%，TIMP-1细胞阳性率分别为16.3%、50.0%、80.0%和93.3%，总体差异均有显著性意义(P=0.006和P<0.001)；各组间HYP差异有显著性意义(P<0.001)。 结论气道异物促进MMP-9、TIMP-1及HYP的表达和分泌，提示气道异物可导致支气管肺组织破坏和重建，其程度与异物滞留时间有关。     

绞股蓝延缓大鼠皮肤衰老作用的实验研究

目的：研究绞股蓝提取液对老年大鼠皮肤组织中羟脯氨酸（HYP）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响。方法：将Wistar大鼠随机分成3组：青年对照组、老年空白组、绞股蓝给药组。并分别予以生理盐水NS（20mL／kg），绞股蓝提取液2g／kg灌胃，30天后以生化分析方法测定皮肤组织中SOD活性，HYP含量，并探讨绞股蓝延缓大鼠皮肤衰老的机理。结果：与青年对照组比较，老年空白组皮肤组织中SOD活性明显降低，羟脯氨酸含量显著减少（P〈0．01）。与老年空白组比较，绞股蓝组对羟脯氨酸含量无显著提高作用（P〉0．05）；绞股蓝组提高SOD活性含量。结论：绞股蓝提取液对大鼠皮肤衰老具有延缓的作用。其机制可能通过提高SOD活性以及皮肤中羟脯氨酸的含量来延缓皮肤衰老。