氧化砷和维甲酸对PLZF-RARa阳性U937细胞的作用

目的：研究氧化砷（As2O3）和全反式维甲酸（AT—RA）对PLZF-RARα阳性细胞的作用。方法：稳定转染PLZF-RARα基因的U937细胞（U937／PLZF）经As2O2、ATRA处理后，Wright—Giemsa染色观察细胞形态，MTr法检测细胞生长增殖状态，流式细胞术（FCM）检测细胞周期和细胞表面分化抗原CD11b、CD64、CD14等的表达变化，荧光免疫细胞化学染色检测融合蛋白表达，细胞化学染色和硝基蓝四氮唑（NBT）还原试验观察细胞功能分化情况。结果：U937／PLZF细胞在去除四环素条件培养后，PLZF—RARα表达明显增加。As2O3（0．51μmol／L）联合ATRA（1μmol／L）使U937／PLZF细胞核质比缩小，核仁减少但未消失；生长增殖受抑；S期细胞减少；CD11b表达增高；PLZF—RARα蛋白表达减弱，分布以胞核弥漫细小颗粒为主。细胞化学染色和NBT反应变化不明显。结论：0．5μmol／L As2O3联合1μmol／LATRA可使PLZF—RARα阳性U937细胞产生轻微的形态学分化趋势，尚不足以引起其发生功能分化。     

Gadd45β和Gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用

目的 探索Gadd45β和Gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用,为砷中毒的人群防治提供依据。方法 收集贵州省兴仁县雨樟镇交乐病区砷中毒人群以及格沙屯正常人群分别作为砷中毒组和对照组,实时荧光定量PCR检测各组人群Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平。同时,分别以不同剂量亚砷酸钠、不同时间处理MIHA细胞,流式细胞术测定细胞周期改变情况,实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平和蛋白表达情况。在上述实验基础上,针对Gadd45β和Gadd45γ基因分别设计的siRNA作用于染砷的MIHA细胞,反向验证Gadd45β和Gadd45γ基因在砷致细胞周期改变过程中的影响。统计学分析采用独立样本t检验比较两组间差异,采用单因素方差比较多组间差异。结果 人群实验研究发现,与对照组相比,砷中毒患者Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平升高（t = 2.576,P = 0.011;t = 2.312,P = 0.022）;MIHA细胞中,随亚砷酸钠染毒剂量、染毒时间增加,细胞G2/M期比例明显升高（F剂量 = 340.136,P＜0.001;F时间 = 49.194,P＜0.001）;在相对较低亚砷酸钠浓度（低于20 μmol/L）、一定时间内（低于48 h）Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA和蛋白表达水平随染砷剂量、染砷时间升高而升高,超过该浓度范围和作用时间后,出现表达下降的现象（Gadd45β:F剂量-蛋白 = 37.568,P＜0.001;F剂量- mRNA = 9.771,P＜0.001;F时间-蛋白 = 61.144,P＜0.001;F时间- mRNA = 46.366,P = 0.001;Gadd45γ:F剂量-蛋白 = 12.989,P = 0.001;F剂量- mRNA = 23.613,P＜0.001;F时间-蛋白 = 27.425,P＜0.001;F时间- mRNA = 37.969,P＜0.001）。转染siRNA分别下调Gadd45β和Gadd45γ的表达后,细胞周期都出现G2/M期比例下调（t = 3.053,P = 0.038;t = 14.47,P＜0.001）。结论 砷致Gadd45β和Gadd45γ基因表达水平升高在其诱导MIHA细胞出现G2/M期阻滞过程中发挥重要作用。     

大鼠砷暴露致雌激素效应及对甲状腺功能的影响

目的 探讨大鼠砷暴露和雌激素受体(estrogen receptor α, ERα)抑制剂干预后,对雌激素及其受体和甲状腺相关激素及受体的影响,阐释砷的甲状腺毒性作用途径。 方法 大鼠亚砷酸钠饮水染毒,并给予雌激素受体抑制剂(ICI182780)干预。通过ELISA检测大鼠血清雌二醇(estradiol, E2)、总三碘甲状腺原氨酸(total triiodothyronine, TT3)、总甲状腺素(total thyroxine, TT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)水平;透射电镜观察大鼠甲状腺组织病理形态学结构改变;实时荧光定量法检测甲状腺组织ERα、甲状腺激素受体α(thyroid hormone receptor α, TRα)相对表达量。蛋白免疫印迹法检测甲状腺组织TRα蛋白水平。 结果 砷暴露后雌性大鼠E2表达水平较对照组上升(P<0.05),雌雄大鼠低砷组ERα、TRα相对表达量较对照组均下降(P<0.05)。高剂量砷暴露后雌性大鼠TSH、TT3及TRα表达水平较对照组上升,TT4较对照组下降(P<0.05)。ICI182780可降低雌性大鼠E2表达水平的上升,也对砷暴露大鼠TT4、TSH、ERα、TRα表达的改变有反向调节作用(P<0.05)。 结论 低砷暴露对雌性大鼠有明显的雌激素效应,高砷暴露可造成大鼠甲状腺功能紊乱或损伤。ERα可能是体内砷暴露发挥雌激素效应的主要途径之一。ICI182780可拮抗砷暴露导致的雌激素效应并缓解甲状腺功能的损伤。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定海鱼中无机砷

目的建立测定海鱼中无机砷含量的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法。方法海鱼样品经稀硝酸超声热水浴提取后,AS7阴离子交换色谱柱分离,3.5 mmol/L(NH4)2CO3+1%甲醇与100 mmol/L(NH4)2CO3+1%甲醇流动相梯度洗脱,电感耦合等离子体质谱仪测定,以保留时间定性,外标法定量。结果在1~100μg/L的线性范围,6种砷形态化合物的回归方程均呈良好的线性关系,相关系数均优于0.9996,检出限为0.05~0.25μg/L,定量限为0.17~0.84μg/L,3个浓度加标回收率为88.5%~106.4%,相对标准偏差为2.5%~4.9%。结论本方法满足海鱼中无机砷含量的测定要求,提取快速,稳定,操作简单,检出限低,方法的重现性好,灵敏度高。     

氢化物发生原子荧光光谱法测定NBS菠菜中砷

美国国家标准局 (ＮＢＳ)制备的菠菜标准参考物 (编号 15 70 )除含丰富的硅质外 ,还含有大量的Ｋ、Ｃａ、Ｐ、Ｎ、Ａｌ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｓｒ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｂｒ、Ｎｉ、Ｃｒ、Ｔｈ等近三十种元素所组成的盐类 ,其中 ,Ｋ、Ｃａ、Ｐ、Ａｌ、Ｆｅ等元素含量高达几百毫克每千克以上[1 ] ,基体非常复杂。氢化物原子荧光法具有抗基体干扰强 ,灵敏度高等优点[2 - 3 ] 。本法利用ＡＦＳ - 2 30双道原子荧光光度计 ,采用断续流动进样 ,氩氢焰原子化 ,氢化物发生原子荧光法。该法有效降低样品基体干扰 ,具有样品进样体积小、灵敏度高等优点。1 　实验部…     

重组人神经营养因子-4/5蛋白抗三氧化二砷神经毒作用

目的 :初步观察重组人神经营养因子 - 4/ 5 ( h NT- 4/ 5 )蛋白对三氧化二砷毒性的抑制作用。 方法 :利用 h NT- 4/ 5蛋白具有抗神经毒性的特点 ,采用本实验室克隆表达及部分纯化的具有天然 h NT- 4/ 5蛋白生物学活性的重组 h NT- 4/ 5蛋白 ,以不同水平的重组 h NT- 4/ 5蛋白 ( 0～ 10 0μl)与不同浓度的 As2 O3 ( 0～ 16 0μmol/ L )同时加入各组鸡胚前脑神经细胞和 PC12细胞培养液中共同孵育 2 4～ 48小时 ,观察其对染毒鸡胚前脑神经细胞存活和 PC12细胞突起生长的影响作用。 结果 :在鸡胚前脑神经细胞和 PC12细胞中与 As2 O3 共同培养 48小时后 ,对照组与实验组的细胞存活率差异有显著性 ,而且细胞存活率和突起数目随 h NT- 4/ 5浓度增高而提高和增加。 结论 :初步观察到重组 h NT- 4/ 5蛋白具有抑制 As2 O3 的毒性作用 ,为从基因工程途径寻找抗环境毒物因子提供了依据。     

三氧化二砷治疗高危骨髓增生异常综合征22例

1996年 4月至 1999年 8月 ,作者用三氧化二砷治疗骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ) 2 2例 ,取得了一定疗效 ,并且发现骨髓中早幼粒细胞比值较高的患者疗效较好 ,现报道如下。1　临床资料1 1　一般资料　 2 2例均为本院住院或门诊患者 ,符合ＭＤＳ的诊断标准[1] ,男 9例 ,女 13例 ,年龄 19～ 6 4岁。难治性贫血伴有原始细胞增多 (ＲＡＥＢ) 9例 ,转变中的ＲＡＥＢ(ＲＡＥＢ Ｔ)11例 ,慢性粒单细胞白血病 (ＣＭＭＬ) 2例。其中 18例曾接受1～ 3疗程化疗 ,12例服用过维甲酸 ,6例服用过维生素Ｄ3,4例用过干扰素 ,2例为初治患者。化疗者治疗时间为 2…     

砷对人淋巴细胞微核率影响的研究

目的 分析人淋巴细胞的遗传物质在砷作用下受到损伤的情况,进一步探讨砷的遗传毒性和砷对人细胞遗传物质作用的机理。方法 我们对不加受试物的对照组与3组经不同浓度NaAsO2处理的处理组的人淋巴细胞微核率进行对比分析。结果 有不同浓度的NaAsO2处理培养的人淋巴细胞,其出现的微核率显著高于非处理组（P＜0．05）。结论 NaAsO2对人淋巴细胞遗传物质有明显的损伤作用。     

2017年-2018年临沂市常见食品中重金属和砷的污染调查分析

目的调查临沂市2017年-2018年常见食品中铅、镉、汞等重金属和砷的污染现状。方法按照国家标准检测方法检测食品中铅、镉、汞、砷的含量,并对检测结果评价。结果检测食品575份,共检测铅、镉、汞、砷2 285项次,检出铅、镉、汞、砷114项次,总检出率为4.98%,超标8项次,总超标率为0.35%。各监测项目中超标率从高到低依次为铅、镉、汞、砷,各类监测食品中,检出率从高到低依次为茶叶、豆类、蔬菜、水果,其余未检出。共检测食品中铅样品560份,5份超标样品,超标率为0.89%,其中豆类样品超标率最高,为3.00%;共检测食品中镉样品575份,3份超标样品,超标率为0.52%,其中豆类样品超标率最高,为1.00%;共检测食品中汞、砷样品575份,均未超标。结论临沂市常见食品中重金属和砷的污染程度较低,但仍存在一定程度的重金属污染,应引起关注并加强监管。     

贵阳市花溪区高坡乡不明原因疾病病因初探

目的：探索一起以多神经炎症状为主的不明原因疾病暴发流行的病因,预防控制类似疾病的发生与流行。方法：采用流行病学现况调查及实验室检测进行了连续5年的调研。结果：该不明原因疾病的发病率为8．51％;从病人粪便标本中分离出1株柯萨奇B组2型病毒,并与其双份血清中和抗体反应呈两倍变化,另有5例病人血清中和抗体滴度大于1：160或1：320;病区煤、土壤、大米、辣椒及病人发砷含量均超过国家标准;病人血红蛋白(Hb)及维生素B。(VitB1)值在正常范围。通过抗病毒治疗病人基本痊愈。结论：病因调查结果认为,此次多神经炎暴发流行不排除病毒感染,不排除环境介质中砷含量较高。