小鼠内皮抑素基因真核表达载体的构建和表达

目的 构建小鼠内皮抑素（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）ｃＤＮＡ的真核表达载体并将其在体外培养的脑胶质瘤细胞内表达。方法 将带有分泌信号的小鼠ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎｃＤＮＡ克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,构建ＣＭＶ启动子控制的载体ｐｃＤＮＡ－ｓＥｎｄｏ,并将上述载体转染体外培养的脑胶质瘤细胞（ＳＨＧ４４）,采用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ鉴定其表达,应艇牛微血管内皮细胞抑制实验检测其活性,结果 成功地构建了真核表达     

单链抗体构建、表达及临床应用的研究现状

<正> 7O年代,德国学者Kohler和英国学者Mil- stein利用细胞融合技术第一次研制了单克隆抗 体(McAb)。今天,它已经对医学、生物学、免疫学 等诸多学科的发展发挥着巨大的作用。然而,由于 目前制备的单克隆抗体多为鼠源性的,在体内易 产生人抗鼠的抗体反应,加之其分子量大,血管通 透性差,给临床应用带来了一定的困难。而来自人 的单抗的研究尚有一定的难度。近年来,随着基因 工程日新月异的发展,通过大肠杆菌可表达具有 生物活性的抗体片断,通过PCR技术的不断完 善,快速克隆抗体某一基因的可变区成为可     

重组人骨形态发生蛋白-2/7融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达和初步活性测定

构建重组人骨形态发生蛋白－２／７融合体, 研究其在大肠杆菌中的表达及生物学活性。利用ＤＮＡ 重组技术,将编码人骨形态发生蛋白－２ （ＢＭＰ－２） 成熟肽的０．３６ ｋｂ 基因片段与编码人骨形态发生蛋白－７ （ＢＭＰ－７） 成熟肽的０．４４ｋｂ 基因片段连接,得到重组人骨形态发生蛋白－２／７ 融合基因; 经测序鉴定后,将其克隆到表达载体ｐＢＶ２２２中,转化大肠杆菌ＤＨ５α, 温度诱导表达。表达蛋白经初步纯化后测定其对培养小鼠成骨样细胞增殖、分化及碱性磷酸酶活性的影响。克隆质粒转化的工程菌,经４２℃诱导４～６ ｈ 后,高效表达重组人骨形态发生蛋白－２／７, 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现一新的蛋白带, 分子量约２９ ｋｕ,约占菌体总蛋白的２０％ ,表达蛋白以包涵体的形式存在,经初步纯化、裂解、复性后的ＢＭＰ－２／７ 蛋白具有促进成骨样细胞分化、增殖及增加碱性磷酸酶活性的作用。ＢＭＰ－２／７ 融合基因的构建和表达,可能提供一种全新的具有诱导成骨作用的蛋白     

甲状腺癌差异表达cDNA消减文库的构建

目的 应用抑制性消减杂交技术，构建人甲状腺癌与正常甲状腺差异表达的cDNA消减文库。方法 分别从甲状腺癌及正常甲状腺组织中提取总RNA，应用高效、灵敏的抑制性消减杂交技术，构建成功cDNA消减文库，再转染大肠杆菌进行文库扩增。结果 构建成功具有高消减效率的人甲状腺癌组织cDNA消减文库，文库扩增得到了400个克隆，随机挑取50个制备质粒，酶切分析均得到50bp-400bp大小插入片段，这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段。结论 人甲状腺癌组织cDNA消减文库的建立为进一步克隆甲状腺癌特异性表达的新基因奠定了基础。     

“ISO”构建医院管理的新模式

什么是医院ISO9000质量管理?这对医院管理将产生哪些影响?会给患者带来什么好处?医院实施ISO9000质量认证的前景如何?哈医大二院通过几年的实践，做出了成功的回答，创出—条推动医院管理工作健康发展的新模式。     

腺相关病毒与变异体DHFR和GFP重组载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

全身化疗仍然是目前治疗恶性肿瘤的主要手段之一,而化疗对骨髓造血的抑制严重影响治疗肿瘤的疗效。将耐药基因导入造血干细胞可以保护机体的造血,从而提高对化疗敏感肿瘤患者对化疗药物的耐受性,增大化疗药物的剂量,缩短化疗间隔时间提高疗效。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)能稳定整合宿主细胞染色体中、感染静止期细胞和无致病性等优点,已成为基因治疗中的热点载体。变异体二氢     

药事管理学科理论构建方法研究

目的 :进一步完善我国药事管理学科理论。方法 :采用演绎理论和扎根理论 ,研究药事管理学科理论构建的程序与方法。结果与结论 :药事管理学科理论具有多样性和实证性等特点 ,尚需不断努力研究和完善。     

创新思想政治工作 努力构建和谐医院

本文结合医院思想政治工作的特点，提出在新的历史条件下，创新医院思想政治工作必须开拓新思想，寻找新载体，增创新优势。用创新的精神，站在深化改革的前沿，充分认识做好医院职工思想政治工作的重要性。用创新的精神，结合医院管理工作的实际情况，努力建立适应形势要求的思想政治工作新机制，以先进性教育为主题，以构建和谐医院为契机，把医院建设成精神风貌健康向上，医德医风高尚优良、干部队伍勤政廉洁、广大职工爱岗敬业、学术思想严谨活跃、人际关系团结和谐、文化氛围浓厚高雅、医院环境整洁优美的社会主义文明窗口。用创新精神，抓住机遇，从思想、方法、内容、载体、机制5个方面，积极探索医院思想政治工作的创新走势。     

人源性基质金属蛋白酶-1原核表达载体的构建与鉴定

目的构建人源性基质金属蛋白酶-1(MMP-1)原核表达载体. 方法从人肝组织提取总RNA,以此为模板,逆转录巢式 PCR扩增MMP-1全编码区基因片段,构建含目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-C2x重组质粒亚克隆,经双酶切及核苷酸测序进行分析鉴定. 结果成功地构建了人MMP-1原核表达载体. 结论构建的人MMP-1原核表达载体,为以后MMP-1融合蛋白的表达并获得具有抗原性的MMP-1融合蛋白奠定了基础.     

用Internet技术构建新型农村合作医疗网络

本文针对海南省新型农村合作医疗结算网络系统建设的实际情况，提出了一套依托于覆盖全省的现有互联网络，采用浏览器／服务器(B／S)体系结构，构建海南省新型农村合作医疗结算网络的技术方案，重点讨论了网络的拓扑结构和方案的设计要点，并对实现的技术方案进行了综合评价，以作为对我国建立新型农村合作医疗信息系统的一点初步探讨。