湖南省乙肝病毒基因型分布及临床意义

目的 :研究湖南省乙肝病毒 (HBV)基因型分布及临床意义。方法 :选择湖南省HBVDNA阳性慢性乙肝病人共 185例 ,其中病毒携带者 (ASC) 4 2例 ,慢性轻、中度肝炎 (CH) 38例 ,重型肝炎 (FHF) 80例 (伴有肝硬化者 4 9例 ) ,肝细胞癌 (HCC) 2 5例 ,采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)方法检测HBV基因型。结果 :基因型B136例 (73.5 % ) ,基因型C 4 9例 (2 6 .5 % )。基因型B在FHF中占绝对优势 (83.7% ) ,其次为HCC(76 % ) ,与ASC(5 7.1% )比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。与基因型B相比 ,基因型C在垂直传播感染者中多见 (38.8%与 13.2 % ,P <0 .0 0 1) ;HBeAg阳性率明显增高 (5 7.1%与 30 .9% ,P <0 .0 0 1) ;抗HBe阳性率明显下降 (36 .9%与 6 6 .2 % ,P <0 .0 0 1)。与基因型C相比 ,基因型B感染者ALT水平明显增高 (2 6 4 .5± 2 5 6 .5与 10 0± 12 0 .6 ,P <0 .0 0 1)。结论 :湖南省存在乙肝病毒基因型B和基因型C ;基因型B为优势基因型并与肝脏疾病活动性相关 ,基因型C与母婴垂直传播感染有关     

人源性基质金属蛋白酶-1原核表达载体的构建与鉴定

目的构建人源性基质金属蛋白酶-1(MMP-1)原核表达载体. 方法从人肝组织提取总RNA,以此为模板,逆转录巢式 PCR扩增MMP-1全编码区基因片段,构建含目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-C2x重组质粒亚克隆,经双酶切及核苷酸测序进行分析鉴定. 结果成功地构建了人MMP-1原核表达载体. 结论构建的人MMP-1原核表达载体,为以后MMP-1融合蛋白的表达并获得具有抗原性的MMP-1融合蛋白奠定了基础.     

乙型肝炎患者自然杀伤细胞G2D受体差异表达及其临床意义

目的 探讨乙型肝炎患者自然杀伤(NK)细胞表面NKG2D受体差异表达及临床意义.方法 应用流式细胞术和RT-PCR方法检测慢性乙型肝炎(CHB)患者22例、急性乙型肝炎(AHB)患者18例、HBV携带者(HBVC) 10例以及18名健康对照者(HD)的外周血NK细胞NKG2D蛋白和NKG2D mRNA表达水平,分析NKG2D表达水平与血清中HBV DNA定量的相互关系.采用方差分析和直线回归进行统计学处理.结果 NKG2D mRNA表达水平HBVC组为0.96±0.17、HD组为1.03±0.12、AHB组为1.53±0.30、CHB组为1.51±0.35,各组间的差异有统计学意义(q=7.586、7.485、7.920、7.880,均P＜0.01).NK细胞中NKG2D蛋白表达量AHB组为0.87±0.14、HD组为0.89±0.17、CHB组为0.67±0.09、HBVC组为0.59±0.13,各组间的差异有统计学意义(q=6.92、7.67、7.53、8.16,均P＜0.01).乙型肝炎患者NK细胞NKG2DmRNA表达水平与其对应的血清中HBV DNA水平分别呈负相关(CHB组r=-0.75,P＜0.01;AHB组r=-0.66,P＜0.01;HBVC组r=-0.69,P＜0.01).AHB、CHB NK细胞NKG2D蛋白表达量与血清HBV DNA水平呈负相关(r=-0.47、-0.45,均P＜0.05).结论 NKG2D诱导的NK细胞毒可能在乙型肝炎HBV清除中起一定的作用.     

1-(3-氟苯基) -5-甲基-2-(1H)吡啶酮对肝星状细胞的影响

目的探讨吡啶酮类化合物1-(3-氟苯基)-5-甲基-2-(1H)吡啶酮(FMP)抗肝纤维化的机制.方法MTT法观察FMP对肝星状细胞(HSC)增殖的影响,免疫细胞化学观察FMP对HSC Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响.结果FMP 200、300、400、500、600 μg/mL 在24、48 h 可抑制HSC增殖, 显著强于阳性对照组(P＜0.05).免疫细胞化学显示FMP在 200 μg/mL 可抑制HSCⅠ、Ⅲ型胶原蛋白表达.结论FMP治疗肝纤维化的原理可能与抑制HSC增殖和HSC Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达有关.     

人成熟型转化生长因子-β1融合蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备与初步临床应用

目的 获得兔抗人成熟型转化生长因子-β1(TGF-β1)多克隆抗体,并将其初步应用于临床检测.方法 将人成熟型TGF-β1融合蛋白经亲和层析法纯化,并将其作为抗原免疫家兔,获得兔抗血清,经饱和硫酸铵纯化,获得初步纯化的兔抗人TGF-β1多克隆抗体.采用双抗夹心间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定健康对照者、慢性肝病及肝硬化患者血清TGF-β1的OD值.结果 获得初步纯化的兔抗人TGF-β1特异性多克隆抗体,该抗体能与人TGF-β1起反应.各组血清TGF-β1的检测OD450值为轻、中度慢性肝炎组11.333±6.136,慢性重症肝炎组16.400±6.959,肝硬化组14.975±6.090,健康对照组7.275±3.222;前三组分别与健康对照组比较,差异均有显著性(P＜0.01);慢性重症肝炎组、肝硬化组分别与轻、中度慢性肝炎组比较,差异亦有显著性(P＜0.01).结论 制备的TGF-β1多克隆抗体可初步用于临床检测,判断肝纤维化程度.     

重症病毒性肝炎患者血中五种微量元素的观察

本文观察30例重症病毒性肝炎病人全血中5种微量元素含量的变化并与427例健康人进行对照。结果表明铁、锰、硒在重症肝炎病人组较健康人组明显降低(P<0.01),锌、铜无显著差异(P>0.05),见表1。30例中死亡14例,存活16例,死亡病例组的血硒含量明显低于     

危重型肾综合征出血热临床状况的分析（非条件Logistic模型）

目的：找出影响肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病情转归的危重征象，以供临床医生参考，予以及时处理，以达降低ＨＦＲＳ的病死率。方法：运用多因素非条件Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析，对９６例危重型和１０２例非危重型ＨＦＲＳ的临床资料进行分析。结果：认为急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ），外周血小板计数，意识改变，少尿期长短，消化道大出血和颅内出血对本病严重程度的判断有价值；未发现性别、年龄和入院时病程与病情轻重有关。结论：影响ＨＦＲＳ病情轻重的主要因素是其并发症。要阻断ＨＦＲＳ患者病情的发展，必须立足于早期诊断和合理治疗，尽最大可能纠正机体代谢失衡，维持内环境稳定，防止腔道和颅内出血，预防继发感染，改善肾功能和强心利尿是降低危重型ＨＦＲＳ病死率的有效措施。     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１），经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实这些融合蛋白具有ＨＣＶ的特异抗原活性，提示这些融合蛋白可用于ＨＣＶ感染的临床诊断和发病机理的研究。     

应用非条件Logistic回归分析肾综合征出血热病情影响因素

应用非条件Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析肾综合征出血热病情影响因素湖南医科大学附属湘雅医院谢玉桃胡国龄鲁猛厚刘文恩对１９８例肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者的临床状况（病情影响因素）进行多因素分析，目的在于提醒注意这些因素的出现，以便及时处理、降低病死率。１...