海南文昌汉族人群中两种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变的研究

目的:分析海南文昌人群中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因1376G→T、95A→G突变。方法:应用硝基四氮唑蓝定量法进行G6PD缺乏症的筛查,用等位基因特异PCR检测1376G→T、95A→G突变。结果:在358位海南文昌汉族人中,发现G6PD缺乏症患者20例,其中9例患者有1376G→T突变,3例患者有95A→G突变。结论:1376G→T、95A→G突变是文昌人群中常见的突变。     

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值姜艳，谭玉芹，鞠吉雨，冯永堂，王健（潍坊市第二人民医院潍坊２６１０４２潍坊医学院免疫学教研室）聚合酶链反应（ＰＣＲ）是具有灵敏、快速、特异的一基因诊断技术。我们对结核性胸膜炎的胸水标本行ＰＣＲ结核菌检测，同时用胸...     

聚合酶链反应产物特异性的阳性证实

以聚合酶链反应(PCR)法在mRNA水平检测T淋巴细胞受体α链可变区基因表达为例,介绍用~(32)P标记的人工合成寡核苷酸探针对PCR产物特异性作阳性证实的方法。该法以干琼脂糖凝胶作为支持物、相对较为简便和省财。用Ca探针以干凝胶作支持物的杂交结果,证实29个Vα基因的PCR扩增中物均为特异性的,放射自显影的带型与位置和溴乙锭染色所示完全吻合。     

HLA-B_(27)与急性前葡萄膜炎相关性的临床研究

目的 :应用SSP PCR(Sequencespecialprime polymerasechainreaction)基因检定技术对急性前葡萄膜炎 (a cuteanterioruveitis ,AAU)患者HLA B2 7基因进行检测 ,并且对HLA B2 7阳性与阴性患者临床特征加以分析。方法 :采用SSP PCR基因检定技术检测 98例AAU患者及 82例正常人样本的HLA B2 7基因。并对HLA B2 7阳性与阴性患者临床特征进行观察。结果 :98例AAU患者样本中有 5 7例样本呈HLA B2 7阳性 ,82例正常人样本有 4例样本呈HLA B2 7阳性 ,阳性率分别为 5 8.2 %和 4 .9%。经 χ2 检验 ,χ2 =4 1.33,P <0 .0 0 5 ,二组间有显著差异。HLA B2 7阳性患者多见于男性 ,单眼多见 ,粉尘状KP ,发病时视力下降明显 ,易于复发 ,且并发症少为其特征 ,激素治疗效果佳。结论 :采用SSP PCR基因检定技术测定HLA B2 7快速、简单、准确性高、客观性强 ,值得推广和应用。HLA B2 7与急性前葡萄膜炎有着高度相关性。HLA B2 7阳性患者与阴性患者在临床特征上有着一定程度的差异。     

逆转录-聚合酶链反应检测胃癌淋巴结微转移

目的 检测胃癌常规病理检查阴性的淋巴结微转移的发生及与其它临床参考指标的关系。方法 利用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测68枚胃癌胃周淋巴结癌胚抗原（CEA）mRNA基因表达，同时比较RT－PCR与免疫组化（IHC）方法的检测敏感性。结果 CEAmRNA RT－PCR是一种很敏感的方法，可以检测1／10^6个转移的癌细胞；检测19例胃癌患者取材的68枚胃周淋巴结，IHC阳性率28％（19／68），RT－PCR阳性率57％（39－68），两组之间差异有非常显著性意义（P＜0.01）；RT－PCR阳性率与胃部临床参考指标密切相关，且随着病期进展而增大。结论 CEA mRNA RT-PCR是比免疫组化更敏感的方法，可以预测胃癌淋巴结微转移，能够有效地避免已有微小转移的患者被漏诊。     

端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义

[目的 ]探讨细针穿刺乳腺肿瘤组织的端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义 .[方法 ]用聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定法检测 79例术前乳腺肿瘤细针穿刺活检标本和大体标本的端粒酶活性 ,并与病理诊断进行比较 .[结果 ]乳腺癌 6 5例中穿刺组织端粒酶呈阳性的为 5 7例 ,阳性率为 88% ;大体组织端粒酶呈阳性的为 5 4例 ,阳性率为 83% .淋巴结转移者端粒酶活性高于无淋巴结转移者 .乳腺良性疾病 14例中端粒酶呈阳性的为 2例 ,阳性率为 14 % .[结论 ]术前乳腺肿瘤穿刺组织的端粒酶活性检测有利于乳腺肿瘤的早期诊断及鉴别诊断 .     

子宫内膜癌组织中p16 mRNA及P16蛋白的表达

①目的　探讨抑癌基因 p16与子宫内膜癌发生、发展的关系。 ②方法　应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组织化学技术 ,对 4 2例子宫内膜癌及 15例正常子宫内膜组织中 p16mRNA及P16蛋白进行检测 ,并结合临床病理特征进行分析。③结果　子宫内膜癌组织中p16mRNA及P16蛋白的阳性表达率分别为6 9.0 5 %和 5 9.5 2 % ,显著低于正常组织 (χ2 =6 .0 15、8.6 2 5 ,P <0 .0 5 )。p16mRNA及P16蛋白的表达缺失与肿瘤的组织学类型无关 (χ2 =0 .10 0、0 .2 94 ,P >0 .0 5 ) ,而与组织学分级和临床分期有关 (χ2 =3.95 4、6 .873,P <0 .0 5 )。④结论　p16mRNA和P16蛋白的表达缺失在子宫内膜癌的发生和发展中可能起重要作用     

等位基因特异PCR技术检测结核分支杆菌rpoB基因突变研究

目的 建立并评价等位特异多聚酶链反应检测结核分支杆菌耐利福平基因rpoB突变的方法。方法 设计与rpoB基因突变后的碱基配对的引物用于扩增突变基因，建立AS－PCR检测rpoB基因突变的方法，并对58株结核菌进行了检测。结果 AS－PCR检测结核菌耐利福平相关基因rpoB的敏感性为77.3%，特异性达91.7%。AS－PCR检测rpoB基因，有1628A→T、1657C→T，G和1673C→T突变分别占耐利福平结核菌株的18.2%，22.7%和36.4%。检测rpoB突变与MIC测定RFP耐药率和PCR－SSCP检测的总符合率分别为86.2%和74.1%。检测试验可在3－4h内完成。结论 AS－PCR方法是检测结核菌耐利福平基因突变的敏感和快速方法，可在临床实验室使用并为临床医师提供治疗依据。     

母体血浆中游离胎儿DNA在产前诊断中的应用

目的：建立一种从孕妇血浆中检测胎儿DNA的无创性产前诊断新方法。方法：对30例孕7－41周妇女血浆进行聚合酶链式反应，特异性扩增的胎儿基因为Y染色体上的DYZ1位点，扩增片段的大小为149bp。30例孕妇血浆均经过酚－氯仿法提取DNA作为模板，进行聚合酶链反应。结果：20例妊娠男性胎儿孕妇中有17例出现DYZ1基因扩增条带，检出率为85．0％。10例妊娠女性胎儿孕妇中未出现阳性扩增条带，无假阳性结果。本研究中早、中、晚孕期性别符合率分别为80％、80％、90％，总符合率为85％。结论：使用酚－氯仿法提取血浆中的DNA，可以提高模板的浓度和纯度，改善PCR条件，提高了结果的准确性，作为无创性产前诊断方法有应用于临床。