IL-1Ra和IL-10真核表达质粒载体的构建及其表达检测

目的:构建人IL-1Ra和人IL-10真核表达质粒载体并检测其表达。方法:用双酶切方法切取PCDI-IL-1Ra和PCDI-IL-10质粒中包含人IL-1Ra和人IL-10 CDS全长序列的cD-NA片段,并分别连接到真核表达质粒pcDNA3.1上,然后用壳聚糖转染上述质粒到原代软骨细胞,RT-PCR检测其mRNA水平的表达。结果:成功将人IL-1Ra和IL-10 CDS全长序列的cDNA片段克隆到真核表达载体,mRNA水平检测到目的基因的表达明显提高。结论:真核表达质粒可以用于外源基因的原代软骨细胞导入和表达,为进一步的基因治疗研究提供依据。     

血管内皮生长因子受体-2在膀胱癌组织中的表达及其重要意义

血管内皮细胞生长因子（VEGF）在维持肿瘤微脉管系统中发挥了重要作用，针对其进行抗新生血管的治疗已成为肿瘤治疗的新靶点。VEGF受体（VEGFR）特别是VEGFR2，在上皮性肿瘤细胞中的表达异常，使VEGF以自分泌或旁分泌方式刺激肿瘤细胞生长并发生转移。     

清热化湿法对温病湿热证大鼠胃窦SP表达的影响

1 实验材料 1.1 动物 清洁级Wistar雄性大鼠,体重200g±20g,购于华中科技大学同济医学院实验动物学部,动物合格证号TJLA-2004,107.肥甘饮食:以常规饲料加20%油脂、10%蜂蜜配制.     

重组腺相关病毒-阳离子脂质体载体的构建及评价

目的探讨重组腺病毒相关病毒（rAAV）-阳离子脂质体（LyoVec）复合载体的构建方法及其转染率评价。方法构建rAAv～GFP，rAAv—LyoVec复合载体及rAAV—GFP—LyoVec。倒置荧光显微镜观察，测定rAAV—GFP，LyoVec—GFP及rAAV—GFP-LyroVec对定量C6细胞的转染率，筛选出高转染率载体。结果rAAV—GFP组24、48、72和96h转染率分别为16％、23％、21％和9％；LyoVec-GFP组为28．5％、33％、32％和11％；rAAV—GFP—Lyovec组为49％、59％、64％和20％。rAAV-GFP—LyoVec纽分别在24、48、72和96h的转染率显著高于rAAV—GFP组（P〈0．01）及LyoVec—GFP组（P〈0．01）。结论新构建rAAV—LyoVec复合载体基因的转染效率远远高于rAAV或LyoVec独立转染。     

食管良性病变中GST-π和P53表达与食管鳞癌的关系及临床意义

食管上皮异型增生时黏膜组织已发生质变,而在此前的过渡期,人们对其鳞状上皮的黏膜变化了解较少.我们研究食管良性病变内镜、组织学特征与胚胎型谷胱苷肽硫转移酶（GST-π）、P53表达的相互关系,并与食管鳞癌者进行比较,为可能的癌前病变筛查提供依据.     

美洲大蠊变应原Cr-PⅡ基因的克隆、表达及结构预测

采用RT-PCR技术从美洲大蠊中扩增出变应原Cr-pⅡ基因,并将其克隆至pMD18-T载体中.经序列测定和分析证实,所克隆的片段含有长度为1 185 bp的完整开放阅读框(ORF),与台湾株来源的Cr-pⅡ(Per a1.0103)有95.9%的同源性.用Nde Ⅰ和Not Ⅰ将目的片段从T载体中切下,定向亚克隆入表达载体pET24a(+),然后成功转化大肠杆菌菌株BL21 Star.经IPTG诱导得到45kDa的重组蛋白,Western-blot分析表明其具有良好的IgE结合活性.并通过生物信息学方法获得了目的蛋白的抗原表位和3D结构模型.     

参麦注射液对休克大鼠肝脏I-κβα和白细胞介素-18 mRNA表达的影响

肠黏膜在机体受到如失血性休克等严重损伤时,正常的机械屏障结构或功能受损造成细菌移位,细菌和毒素通过门脉循环后,首先损伤肝细胞,引起肝组织严重损伤和功能障碍[1]。人参和麦冬是我国经典中药,对机体有着明显的保护作用,具有毒性低等特点,较易进入组织发挥作用。近些年的研究发现人参和麦冬合剂具有提高机体免疫力、降低血脂、保护细胞的功能。本实验建立大鼠“双击”模型(失血性休克 内毒素),藉以模拟临床中病人失血性休克后发生的细菌移位过程,通过测定血清中NO和一氧化氮合酶(NOS)水平和肝组织中I-κBα和白细胞介素-18(IL-18)mR…     

正常生育男性成熟精子mRNA的种类和特征

目的:剖析具有正常生育能力男性成熟精子mRNA的种类和丰度。方法:健康并育有后代的成年男性10例,禁欲1周后取精液,上游法优化精子,Trizol试剂提取精子总RNA。混合所有总RNA进行基因表达系列分析(SAGE)。结果:所建SAGE文库共获877个克隆,测序得到21 052个标签,出现两次以上的独特性标签有2 712种。经与SAGEm ap数据库比对,19.7%的独特性标签没有基因匹配,代表新基因;其余能匹配的基因中,67%具有蛋白质结合或核酸结合能力,41%具有催化活性,13%与信号转导有关,与细胞运输、精子结构、转录调节相关者分别达到10%左右。结论:人成熟精子中存在数量庞大、种类繁多的mRNA。     

美国称开发出新型“丙型肝炎疫苗”

日前,美国Saskatchewan大学疫苗和传染病组织(VIDO)的研究人员开发出新型的丙型肝炎疫苗,该研究结果已发表于最新出版的国际著名学术杂志《一般过滤性微生物学》(Journal of General Virology)中。他们的实验结果显示,该疫苗能减少实验小鼠体内丙型肝炎病毒蛋白的表达量,并且与之前的疫苗相比,其病毒蛋白水平少了100000倍。这种新疫苗的独特之处是利用身体自己的树突状细胞充当疫苗。树突状细胞(dentritic cells)是免疫系统中一种特殊的细胞类型,是最重要的抗原呈递细胞,它在抗肿瘤免疫中起到重要作用。树突状细胞由血液循环中的造血祖…     

肿瘤坏死因子α对重症急性胰腺炎低钙血症的影响及作用机制

我们通过检测重症急性胰腺炎大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF—α）、血钙水平及骨、肾组织甲状旁腺激素受体（PTHR）mRNA表达，同时观察抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体（TNF—αMCAb）治疗后对血钙、血清TNF—α水平及骨、肾组织PTHR mRNA表达的影响，并探讨TNF—α在重症急性胰腺炎低钙血症发生中的作用机制。