游离细胞甘露糖受体的亲和细胞化学电镜观察

目的 对小鼠腹腔巨噬细腻及人精子的甘露糖受体（ＭＲ）进行超微结构定位。方法 采用甘露糖基化牛血清白蛋白（ＤＭＡ）结合１０ｎｍ胶体金制备探针ＤＭＡ－Ｇ１０,以此探针标记小腹腔巨噬细胞和获能前后的人精子,并用疼爱 射电子显微民制备的ＤＭＡ－Ｇ１０具有基露糖基结合特性。小鼠腹腔巨噬细胞可分为明、暗中类型。“暗细胞”不含ＭＲ,“明细胞”细胞膜表面含ＭＲ,该受体与ＤＭＡ－Ｇ１０结合后内化入细胞内。人 子发生     

眼用环孢霉素A缓释超微粒的制备及眼内分布研究

目的探讨壳聚糖-胆固醇双亲性聚合物包载环孢霉素A的缓释性及超微粒制备及眼内分布.方法壳聚糖-胆固醇双亲性聚合物与环孢霉素A共溶于溶剂中,对水透析形成超微载药微粒,37℃条件下测试超微粒体外释放状态.以放射性99锝标记壳聚糖超微粒,制成滴眼剂,以SPECT测试超微粒在兔眼中的滞留时间.结果壳聚糖载药超微粒可在6小时内缓释环孢霉素A,超微粒在给药后4小时在眼表具有良好的滞留性.结论以壳聚糖双亲性聚合物包载环孢霉素A对干眼症的治疗具有潜在的应用价值.     

不同粒径的水飞蓟素固体脂质纳米粒口服吸收比较研究

目的:考察不同粒径的固体脂质纳米粒对大鼠口服吸收水飞蓟素的影响。方法:以山榆酸甘油酯为载体材料,分别制备了150,500,1 000 nm 3种粒径的水飞蓟素固体脂质纳米粒,给大鼠灌胃后,采用RP-HPLC测定不同时间点血药浓度,数据经3p97软件进行处理。结果:口服150 nm水飞蓟素固体脂质纳米粒后的AUC分别是500,1 000 nm的2.08,2.54倍(P<0.05),这表明150 nm固体脂质纳米粒的生物利用度明显高于其他2种制剂。结论:固体脂质纳米粒粒径对水飞蓟素的口服吸收有着显著影响。     

Fe3O4及Fe3O4-Glu纳米颗粒的毒性和致突变性研究

[目的]研究直径约15 nm的四氧化三铁纳米颗粒(nano-Fe3O4)、谷氨酸包覆的四氧化三铁纳米颗粒(nano-Fe3O4-Glu)的毒性及致突变性.[方法]①单次给药实验在以往急性毒性实验的基础上,对昆明种小鼠口服一次给药,分别得到nano-Fe3O4、nano-Fe3O4-Glu的最大耐受量.②小鼠骨髓细胞微核试验nano-Fe3O4及nano-Fe3O4-Glu分别设150mg/kg、300mg/kg和600mg/kg各三个剂量组,另设阴性对照组和环磷酰胺组,分别计算其微核率.③小鼠精子畸形试验两种受试物分别设150 mg/kg、300 mg/kg、600 mg/kg三个剂量组及阴性对照组和环磷酰胺组,连续5 d染毒,染毒后第35 d处死,分别计算其精子畸形率.④体外CHL细胞染色体畸变试验nano-Fe3O4设1.05μg/ml、2.10μg/ml、4.20μg/ml三个剂量组,nano-Fe3O4-Glu设30μg/ml、60 μg/ml、120 μg/ml三个剂量组,另设阴性、阳性对照组和空白对照组.在加S9mix和不加S9mix时,分别计算细胞染色体畸变率.[结果]两种受试物的小鼠经口染毒最大耐受量均大于600 mg/kg;小鼠骨髓细胞微核试验中两种受试物的微核率均低于2‰;小鼠精子畸形试验中,nano-Fe3O4各剂量组小鼠精子畸形率均高于3.8%,与阴性对照组比较有统计学差异(P＜0.01);体外CHL细胞染色体畸变试验中,在加与不加体外活化系统(S9mix)的条件下,两种受试物的CHL细胞染色体畸变率均低于5%.[结论]在本试验条件下,nano-Fe3O4及nano-Fe3O4-Glu对小鼠体细胞均未见有致突变性,而nano-Fe3O4对雄性小鼠生殖细胞有致突变性;在体外试验中,两种纳米颗粒均未见有致突变性.     

ELISA法与胶体金法检测健康人群抗-HCV的实验研究

〔目的〕为早期发现健康人群丙型肝炎感染状况 ,对漯河市无偿献血人员进行丙型肝炎病毒抗体 (抗 -HCV)检测 ,为安全输血制订丙型肝炎预防措施提供参考依据。〔方法〕采用酶联免疫法 (ELISA)与胶体金法两种方法进行比较。〔结果〕2年 ( 2 0 0 1-2 0 0 2年 )检测献血人员 1682 8人 ,ELISA法阳性 13 3份 ,阳性率 0 .79% ;胶体金法阳性 13 0份 ,阳性率 0 .77%。符合率 97.74% ,二者阳性结果无显著性差异 ( χ2 =0 .0 14 ,P >0 .0 5 )两种方法阴性对照结果一致 ,符合率10 0 %。〔结论〕胶体金法检测抗 -HCV ,具有操作简便 ,观察直观、快速、省时。其特异性、敏感性均达到ELISA水平。可作为筛查无偿献血人员丙型肝炎病毒抗体的重要手段。对丙型肝炎的早期发现 ,预防及控制有重要价值和意义。     

锑掺杂纳米二氧化锡颗粒在乙二醇中的分散稳定性

开发了二次球磨湿法制备锑掺杂纳米二氧化锡(ATO)/乙二醇(EG)稳定体系的新方法;选用硅烷偶联剂KH 570,实现了ATO颗粒在EG溶液中的均匀分散和稳定性控制;研究了分散工艺参数对体系的影响,探讨了ATO颗粒的表面包覆改性机理。研究表明:分散剂KH 570的含量和体系的pH显著影响ATO在EG中的分散稳定性,在KH 570含量为1.5%,体系pH为8.5时,ATO/EG浆料的分散性能最佳。KH 570与ATO颗粒表面羟基发生的化学键结合,提高了颗粒表面的疏水性,改善了ATO颗粒与有机极性溶剂及高聚物之间的亲和力。     

快速检测产单核李斯特菌免疫胶体金层析法的研究

目的：为产单核李斯特菌提供了一个方便快捷切实有效的检测技术。方法：采用胶体金标记产单核李斯特菌抗体制备免疫层析检测试剂，通过免疫层析作用对产单核李斯特菌进行检测。结果：通过选用柠檬酸钠改良法制备胶体金，测定其最适结合蛋白浓度为28μg／ml，构建起免疫层析检测试剂和检测方法，检测了冷冻猪肉、牛奶、冰激凌以及不同稀释度的产单核李斯特菌标准样品，灵敏度达87．5％，具有良好的重现性。结论：免疫胶体金层析法用于快速检测产单核李斯特菌是可行的。     

阿霉素纳米粒对颅内移植G422小鼠的化疗实验研究

目的:观察阿霉素纳米粒对颅内移植G422胶质母细胞瘤小鼠化疗后的生存期变化及病理改变,评估阿霉素纳米粒对胶质母细胞瘤的化疗效果。方法:将G422胶质母细胞瘤细胞移植入86只昆明小鼠脑白质中建模,然后随机分为6组,分别是大剂量阿霉素纳米粒(3×2.5 mg.kg-1)、中剂量阿霉素纳米粒(3×1.5 mg.kg-1)、小剂量阿霉素纳米粒(3×1.0 mg.kg-1)、空白纳米粒(3×2.5 mg.kg-1)、阿霉素生理盐水(3×2.5 mg.kg-1)和不予任何治疗的控制组。移植后第2、5、8天由尾静脉给药。肿瘤移植后第10天进行流式细胞仪、组织病理学检查。结果:与同等剂量的阿霉素生理盐水组相比,大剂量阿霉素纳米粒组生存期显著延长。各个剂量的阿霉素纳米粒组化疗效果与剂量呈正相关。组织病理学检查证实大剂量阿霉素纳米粒组肿瘤体积最小,肿瘤边缘清楚,未发现肿瘤细胞浸润,而阿霉素生理盐水组的脑肿瘤边缘不清楚,肿瘤呈浸润性生长。结论:阿霉素纳米粒可以作为治疗人类胶质母细胞瘤潜在的化疗药物。     

癌胚抗原启动子调控融合自杀基因yCDglyTK载体的构建及其应用研究

目的构建靶向性基因治疗载体pcDNA3．1（-）CryCDglyTK，研究癌胚抗原（CEA）启动子是否能控制新型融合自杀基因yCDglyTK在CEA阳性结肠癌细胞中专一性表达和杀伤作用。方法采用PCR、RT—PCR、融合PCR、酶切、连接等技术构建由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3．1（-）cvvCDglyTK表达载体和分别由CEA启动子和巨细胞病毒（CMV）增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3．1（-）CEAyCDglyTK、pcDNA3．1（-）CMVyCDglyTK表达载体，以磷酸钙纳米为载体分别转染CEA阳性的人结肠癌细胞株LOVO细胞和CEA阴性的Hela细胞，采用RT—PCR、免疫荧光法检测感染细胞中yCDglyTK基因的表达，并用MIT法检测感染后细胞对5-氟胞嘧啶（5-FC）的敏感性。结果LOVO细胞在感染以上三种质粒表达载体后均有yCDglyTKmRNA表达，且对5-FC的敏感性明显增强，Hela细胞在纳米-pcDNA3．1（-）CMVyCDglyTK复合物感染后有yCDglyTKmRNA表达，对5-FC的敏感性增强，而在纳米-pcDNA3．1（-）CEAyCDglyTK及纳米-pcDNA3．1（-）CVyCDglyTK复合物感染后则没有yCDglyTKmRNA表达，5-FC对其亦无杀伤作用。结论该实验构建的由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因yCDglyTK靶向性基因治疗载体。能使融合自杀基因在CEA阳性细胞中专一性表达，从而达到靶向治疗肿瘤的目的。     

RP-HPLC法测定固体脂质纳米粒中β-榄香烯的含量

目的建立固体脂质纳米粒注射液中β榄香烯的反相高效液相色谱法。方法色谱柱:HypersilBDSC18(4.6mm×200mm,5μm);流动相:乙腈水(体积比为88∶12);检测波长:210nm;柱温:30℃。结果β榄香烯与其他组分分离良好,线性范围10.6～53.0mg·L-1(r=0.9999),平均回收率为99.6%,RSD为0.93%(n=5)。结论方法简便、准确,可作为该制剂的质量控制方法。