邻苯二甲酸丁基苄酯诱发HeLa细胞株DNA-蛋白质交联影响的初步研究

目的研究邻苯二甲酸丁基苄酯（BBP）的遗传毒性。方法采用不同浓度BBP（0、5、25、125、625μmol·L^-1）对HeLa细胞进行体外染毒2h,利用KCl-SDS沉淀法检测DNA-蛋白质交联DPC效应。结果不同浓度的BBP均能引起HeLa细胞DPC系数的上升,但这种效应在低浓度（5μmol·L^-1）时不显著（P〉0.05）;而在高浓度（25、125、625μmol·L^-1）时,BBP能够显著地或非常显著地（P〈0.01,P〈0.05）诱导HeLa细胞产生DNA-蛋白质交联效应。结论邻苯二甲酸丁基苄酯可诱发HeLa细胞株DNA-蛋白质交联。     

糖皮质激素通路介导邻苯二甲酸二丁酯对大鼠睾酮合成的抑制作用

目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)抑制大鼠睾酮(T)合成的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠按数字表法随机分为5组,即0.25、0.50、1.00和2.00g/kg DBP剂量组和溶剂对照组,每组16只.经口灌胃,每天1次,连续30 d,染毒结束后,每组处死8只动物,另8只饲养15 d后处死.放射免疫法检测血清T和糖皮质激素(GC)水平;RT-PCR法检测11 β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)和类固醇生成急性调控蛋白(StAR)基因表达水平;Western blotting检测糖皮质激素受体(GR)表达水平.结果 染毒期,1.00和2.00 g/kg DBP剂量组血清T水平分别为(0.260±0.218)和(0.260±0.342)ng/ml,GC水平分别为(13.470±5.661)和(13.740±3.977)ng/ml,对照组血清T水平为(1.045±1.222)ng/ml,GC水平为(9.224±3.496)ng/ml,1.00和2.00g/kg DBP剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(tT值分别为-2.295、-2.295,tGC值分别为2.159和2.296,P值均小于0.05);1.00和2.00 g/kg DBP剂量组StAR基因表达水平降低,STAR/β-Actin比值分别为0.657±0.060和0.407±0.033,与对照组(0.871±0.081)比较,差异有统计学意义(t值分别为-3.707和-8.037,P值均小于0.05);1.00和2.00 g/kg DBP剂量组11β-HSD基因表达水平(11β-HSD/β-Actin比值分别为0.538±0.138和0.988±0.133)和GR蛋白表达水平(GR/β-Actin比值分别为0.785±0.106和0.956±0.076)与对照组(0.285±0.106和0.275±0.035)比较,差异有统计学意义(t11β-HSD/β-Actin值分别为2.829、7.860,tGR/β-Actin值分别为8.064和10.77,P值均小于0.05),与DBP剂量呈正相关,r值分别为0.776和0.790.恢复期,DBP各剂量组上述指标与对照组比较差异均无统计学意义.结论 DBP能通过GC通路介导对大鼠T合成的抑制作用.     

Study on developmental abnormalities in hypospadiac male rats induced by maternal exposure to di-n-butyl phthalate (DBP)

The objective of this study was to establish a hypospadiac rat model by maternal exposure to di-n-butyl phthalate (DBP) and to evaluate the developmental abnormalities of hypospadiac male rats. Timed-pregnant rats were given DBP by gastric intubation at doses of 0, 250, 500, 750 or 1000 mg/kg body weight (bw)/day from gestation day (GD) 14 to 18 to establish a hypospadiac rat model. The hypospadias was observed in the 500 and 750 mg/kg bw/day groups, the incidence of which was 6.8 and 41.3%, respectively. Transverse serial histological analysis of genitalia of hypospadiac male rats confirmed the malformation. With exposed dose increasing, the serum testosterone (T) levels of male rats inversely decreased, and in the same dosage group the serum T levels of hypospadiac rats were significantly lower than the levels of nonhypospadiac counterparts. The other reproductive lesions such as cryptorchidism and decreased ratio of anogenital distance/body weight (AGD/bw) were also observed. Autopsy analysis revealed the development of reproductive organs (prostate, testes, epididymis, pituitary gland) and nonreproductive organs (adrenal gland, liver, kidney, heart, spleen) of hypospadiac rats and nonhypospadiac counterparts. The results indicated that the reproductive system and developmental condition of hypospadiac male offspring were damaged severely by DBP.     

Cellulose acetate phthalate microparticles containing Vibrio cholerae: steps toward an oral cholera vaccine

Abstract

Oral cholera vaccine (OCV) has been recommended in some endemic areas and epidemic situations since 1999. Although safe and effective vaccines are currently on the market, the burden of transport and storage remains an issue. Herein, we report an approach to develop an alternative OCV in the form of a gastro-resistant powder. Heat-killed Vibrio cholerae (VC) was encapsulated with a spray-drying technique at different temperatures. Cellulose acetate phthalate (Aquacoat® CPD) was chosen as the core polymer and the addition of alginate was studied. The microparticles (MPs) produced were characterized by surface morphology, particle size, drug loading, antigenicity and gastro resistance. The MPs obtained were 6?µm in size and had appropriate drug content, ranging from 8.16 to 8.64%. Furthermore, antigenicity was maintained, never dropping below 85%, and enteric properties were achieved for all the formulations. Next, an in vivo study was carried out with Aquacoat® CPD MP prepared at 80?°C with and without alginate. Two different doses were assayed, 30 and 60?mg, and compared to the VC suspension. The evoked immune responses showed that alginate containing MPs, especially at the 30?mg dose, displayed values that were very similar to those of VC. In conclusion, spray-dried alginate VC MPs seem to be a promising step toward a powder-form cholera vaccination.     

塑料食品袋溶出酞酸酯DBP与DEHP的测定

目的 了解塑料食品袋在接触脂溶性溶剂时溶出邻苯二甲酸二丁酯(di—n-butylphthalate，DBP)、邻苯二甲酸二异辛酯[di-(2-ethylhexyl)phthalata，DEHP]的状况。方法 采用毛细管柱气相色谱-质谱联用(gas chromato-graphy-mass spectrometry，GC／MS)的选择离子检测(selected ion recording，SIR)技术，结合溶剂浸泡提取的办法。结果 购自上海市场的10种塑料食品袋在60℃正己烷中均不同程度地溶出了酞酸酯增塑剂，DBP和DEHP的溶出量范围分别为1．52～134．45μg／g和1．36-356．29μg／g。结论 提示人们不要用塑料食品袋盛装直接入口的含油脂高的食品。     

固体超强酸S2O82-/ZrO2-SiO2催化合成邻苯二甲酸二正丁酯

目的合成增塑剂邻苯二甲酸二正丁酯。方法以固体超强酸S2O8^2-／ZrO2-SiO2为催化剂，邻苯二甲酸酐和正丁醇为原料，考察了影响收率的因素，采用正交实验法讨论了最佳合成工艺条件：n(邻苯二甲酸酐)：n(正丁醇)=1：2．5，反应时间2h，固体超强酸催化剂S2O8^2-／ZrO2-SiO2的用量为反应物总质量的2．5％的条件下合成邻苯二甲酸二正丁酯。结果邻苯二甲酸二正丁酯产率可达95％。结论固体超强酸作为催化剂，有性质稳定、价廉易得、易回收处理、能重复使用多次且对设备无腐蚀的优点。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、氯氰菊酯单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠生殖发育的不良影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和氯氰菊酯(CYP)单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠生殖发育的不良影响。方法选择SPF级3周龄雄性SD大鼠24只,随机分为4组,分别为对照组(喂饲玉米油)、DEHP染毒组(500mg/kg)、CYP染毒组(80mg/kg);DEHP、CYP联合染毒组(DEHP 500mg/kg+CYP 80mg/kg),每组6只。采用经口灌胃方式染毒,每天1次,连续染毒30天。于末次染毒24小时后处死动物,测定大鼠体重、睾丸湿重,并计算睾丸系数;测定血清睾酮水平;制备睾丸病理组织切片,光镜观察其组织学改变,电镜观察生殖细胞超微结构;测定睾丸标志酶乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。结果与对照组相比,DEHP、CYP单独及联合染毒组睾丸下降时间和包皮分离时间明显延迟,肛门生殖器间距明显缩短(P<0.05或0.01);DEHP单独染毒组睾丸重量及睾丸系数明显降低,血清睾酮水平显著下降(P<0.05),睾丸匀浆中ALP、ACP和LDH活性明显增高,SDH活性显著下降(P<0.01);DEHP、CYP单独及联合染毒组睾丸病理组织学、生殖细胞超微结构均可见明显异常。结论 DEHP、CYP单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠均具有明显的生殖毒性作用,可引起生精细胞、支持细胞和间质细胞的变性、坏死及功能障碍,从而导致雄性生殖系统发育和功能的显著异常。其中,DEHP单独染毒呈现主效应,DEHP、CYP联合染毒对大鼠的生殖毒性未呈现明显交互影响。     

胚胎期暴露DEHP对子代大鼠神经行为的影响

目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)胚胎期暴露,评价其对子代大鼠神经行为的影响,初步探讨DEHP所致子鼠神经毒性的机制。方法雌性Wistar大鼠从妊娠日起用10、100、500 mg/(kg.d)DEHP连续灌胃染毒19 d,观察子代大鼠的神经行为学指标。于子鼠出生第7天和第21天测定海马神经细胞凋亡率,不同剂量的DEHP染毒对海马组织bcl-2、bax基因的表达的影响。结果于子鼠出生6周后,进行水迷宫测试。结果显示,随着DEHP剂量增加,中、高剂量组错误次数增加和潜伏期延长十分明显(F=8.058,P<0.05;F=11.221,P<0.05)。电穿梭测试显示,中、高剂量组电击次数增加和主动逃避时间延长较为明显(F=6.984,P<0.05;F=9.841,P<0.05)。出生后7 d子代大鼠海马神经元的细胞凋亡率高于出生21 d,高剂量组尤为显著。RT-PCR检测表明,与对照组相比,bcl-2和bax基因表达增高(F=253.78,P<0.05;F=66.67,P<0.05),且随着DEHP暴露剂量的升高,表达亦增加。结论 DEHP对子代大鼠神经系统具有明显的毒性作用,存在着剂量-反应关系,其可能通过干扰bcl-2和bax基因的表达而影响子代大鼠神经系统发育。     

塑料瓶装饮料中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸-（2-乙基己基）酯含量及其对大学生的潜在暴露风险

[目的]对大学生每日经由塑料瓶装饮料摄入邻苯二甲酸二丁酯（DBP）和邻苯二甲酸-（2-乙基己基）酯（DEHP）的暴露量进行风险评估。[方法]通过方便抽样的方法对196名大学生进行塑料瓶装饮料摄入情况在线问卷调查,结合114种市售塑料瓶装饮料中DBP及DEHP的检测数据,计算调查人群经塑料瓶装饮料摄入DBP和DEHP的慢性每日摄入值和安全限值分布,运用蒙特卡洛概率模型拟合大学生群体DBP和DEHP每日暴露情况并进行相应的敏感度分析。[结果]受访大学生不同种类饮料摄入量不同,但男、女生的塑料瓶装饮用水摄入量均居首位。DBP和DEHP含量亦因饮料种类而各异,其中咖啡类、乳类及果汁类相对较高。大学生经塑料瓶装饮料DBP和DEHP的暴露值均低于其每日允许摄入量,安全限值均小于1。蒙特卡洛概率模型显示99．90％的大学生经塑料瓶装饮料摄入DBP的暴露量是安全的,仅0．10％存在潜在生殖发育毒性风险,男、女生的生殖发育毒性风险分别为0．02％和0．09％;大学生经塑料瓶装饮料摄入DEHP的暴露量尚不存在健康风险。[结论]大学生经塑料瓶装饮料DBP的摄入水平可能存在一定的潜在生殖发育毒性风险,DEHP的摄入水平则处于安全范围。     

不育男性精液中16种邻苯二甲酸酯类物质的检测与分析

目的检测苏州地区男性精液中邻苯二甲酸酯类物质(phthalic acid esters,PAEs)的水平,分析PAEs对男性生育能力的影响。方法用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测84例不育男性和32例正常生育男性精液中16种PAEs的水平并进行比较。结果苏州地区男性精液中邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁氧基乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)3种PAEs含量较高。不育组的DIBP、DBEP、DEHP含量及PAEs总量高于正常生育组,差异显著(P均<0.01);且精液中DIBP、DBEP、DEHP及PAEs总量与精子总数均呈负相关(P均<0.05)。结论在苏州地区男性精液标本中检测到了PAEs,PAEs蓄积可能是男性不育的原因之一。