P53表达在胸腺瘤分型中的意义

目的探讨P53的表达在不同类型胸腺瘤中的意义。方法选取我科2000年5月至2005年12月29例经病理证实的胸腺瘤手术切除标本,采用SP免疫组化方法检测P53蛋白在胸腺瘤中的表达情况。结果P53阳性表达率分别为:良性胸腺瘤7.70%,恶性胸腺瘤I型50.00%,胸腺癌100%。P53的表达随着肿瘤恶性程度的增高而增加(P<0.05)。P53蛋白表达的阳性率与胸腺组织学类型及是否伴有重症肌无力(MG)无关(P>0.05)。结论P53的表达在不同类型胸腺瘤中差异显著,对于判断胸腺瘤良恶性有重要参考价值。     

金黄色葡萄球菌CCC型及OC型质粒的检测

采用已报道的金黄色葡萄球菌质粒DNA的检测方法(简称LL法)。从1982年在南京地区临床分离的131株金黄色葡萄球菌中的125株(95.4%)中检出质粒,可分为21质粒谱。经单向及双向二步琼脂糖凝胶电泳法鉴别,按分子量共有16个CCC型质粒带(P_1～P_(16))。用改良的LL法制备E.coli V517菌株质粒DNA,建立了简便的测定金黄色葡萄球菌质粒DNA分子量的参考系统。结果表明:要本实验条件下,P_1～P_(16)的分子量为1.42 Md～22.24±0.73 Md;以含有14.88、2.66±0.06 Md质粒谱的菌株较常见,占总数的25.2%;2.66±0.06 Md的质粒最常见,在73.3%的菌株中检出。     

红细胞同工酶ADA－EAP一AK_1同步电泳分型方法的建立

综合、改良了分别分型的方法，建立了红细胞同工酶ＡＤＡ一ＥＡＰ一ＡＫ１同步电泳分型方法，为ＡＤＡ，ＥＡＰ和ＡＫ１３种红细胞同工酶在法医学鉴定中更广泛的应用，提供了一种可靠、经济、实用的方法。     

辐射反应性A1蛋白质的分离纯化

本文撮道了用制备电泳和柱层析二种方法结合分离纯化放射病反应性增多的A₁蛋白质。方法简便,操作流程短,重复性娥经鉴定A₁蛋白质是一种未见文献报道的蛋白质。以此制备抗血清可用于放射病临床治疗的监测和放射病病理机制的研究。     

5种拟钉螺酯酶同工酶酶谱的比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术，对湖北和四川两省５种拟钉螺的酯酶同工酶酶谱进行比较研究，并以湖北钉螺作对照，５种拟钉螺酯酶同工酶共分离出８条酶带，酶谱可分成３区，即ＥＳＴ－１、ＥＳＴ－２、ＥＳＴ－３，其基本特征与钉螺显著不同，很容易通过酶谱将拟钉螺与钉螺区分开，同时，５种拟钉螺的酯酶同工酶酶谱之间均存在一定的差异，说明拟钉螺种间酯酶同工酶存在多态，而种间差异程度似与地域隔离的远近有关。结果提示拟钉螺酯酶同工酶的酶谱特征既有助于拟钉螺属的鉴定，又有助于拟钉螺近缘种的区分，从而对拟钉螺的分类有较大的参考价值。     

神经病理性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ及Cα表达的变化

目的 评价慢性神经收缩损伤（CCI）和脊神经结扎（SNL）模型大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ及Cα表达的变化，以探讨其在神经病理性疼痛中枢敏化中的作用。方法 24只SD大鼠随机分为假手术组、CCI组和SNL组，CCI组于左肢制备CCI模型，SNL组于左肢制备SNL模型。分别于术前2d、术后2、4、7d行机械痛阈和辐射热痛阈测定。术后7d测痛后大鼠灌注固定，采用免疫组化法检测脊髓背角蛋白激酶Cγ、Cα和Fos蛋白的表达。结果 与假手术组相比，CCI组和SNL组术后4、7d机械痛阈和辐射热痛阈降低，术后7d脊髓背角蛋白激酶Cγ、Cα和Fos蛋白表达增加（P〈0．05）。与CCI组相比，SNL组机械痛阈、辐射热痛阈在各时间点差异无统计学意义，蛋白激酶Cα和Fos蛋白表达差异亦无统计学意义（P〉0．05），而蛋白激酶Cγ表达升高（P〈0．05）。结论 神经病理性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ及Cα表达的增加，可能是产生中枢敏化的机制之一。     

Total and free tissue factor pathway inhibitor in pregnancy hypertension.

OBJECTIVE: To clarify the role played by tissue factor pathway inhibitor (TFPI) in pregnancy hypertension. METHODS: Using enzyme-linked immunosorbent assays, hemostatic measurements were obtained for women with pre-eclampsia (n=51), nonproteinuric hypertension of pregnancy (n=62), postpartum pre-eclampsia 24 h after childbirth (n=31), and no hypertension (healthy pregnant controls, n=100). RESULTS: There was a significant increase in circulating free TFPI levels in women with pre-eclampsia (9.7+/-6.2 ng/mL) or nonproteinuric hypertension of pregnancy (8.3+/-5.3 ng/mL) compared with healthy controls (5.3+/-2.1 ng/mL). In women with pre-eclampsia the levels remained elevated after placental delivery (10.6+/-4.0 ng/mL). Free protein S levels were significantly higher in women with pre-eclampsia (40.0%+/-10.7%), nonproteinuric hypertension of pregnancy (37.1%+/-12.5%), or postpartum pre-eclampsia (39.3%+/-9.1%) than in healthy pregnant controls (32.2%+/-8.5%). CONCLUSION: Increased levels of the physiologically active free forms of TFPI and free protein S, 2 coagulation inhibitors, may protect women with pregnancy-induced hypertension from the risks of hemostatic activation.     

O-GlcNAc糖基转移酶在原核和真核细胞中的表达和提纯

目的 :本文为进一步研究蛋白 O- Glc NAc糖基化修饰提供重要资源。方法 :为了探索制备纯化具有生物学活性的重组 OGT的有效方法 ,本文用大肠杆菌和 Hi5昆虫细胞表达并纯化具有活性的重组 OGT。携带人 OGTc DNA的 PET32 a质粒在大肠杆菌中表达出带有 1个 S- Tag的重组人 OGT融合蛋白 ,然后用与 S-蛋白质偶联的琼脂糖凝胶颗粒从细菌裂解液中亲和纯化 OGT融合蛋白。结果 :其纯化的 OGT在电泳中显现单一条带并具有生物活性 ,但其活性在洗脱后丧失。在 Hi5昆虫细胞中表达的鼠肝 OGT带有一 His6 tag,经镍离子螯合柱纯化后 ,其比活性达到 0 .88nmol· min- 1 · mg- 1 OGT。结论 :在这两个表达系统中制备重组 OGT各有利弊。     

地塞米松对内毒素作用下人脐静脉内皮细胞表达组织因子、凝血酶调节蛋白和蛋白S的影响

目的观察地塞米松(DEX)对内毒素(LPS)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后表达组织因子(TF)、凝血酶调节蛋白(TM)和蛋白S(PS)的影响.方法24孔板培养的第1～5代HUVEC,在含不同浓度LPS和DEX的无血清培养基中培养一定时间后裂解细胞,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定裂解液中的TF、TM和PS含量.结果在LPS刺激下,HUVEC表达TF的量呈剂量依赖性升高,在LPS0.1μg/ml下TF的表达量为对照组的4倍(P＜0.01),同时加入0.5 μg/ml和1.0 μg/ml DEX则可使TF的表达量由128.3±25.7 pg/105细胞分别降至94.9±19.4 pg/105细胞和98.8±7.8 pg/105细胞(P＜0.05);LPS(0.01～10μg/ml)可抑制HUVEC表达TM,在LPS 10 μg/ml下,TM表达量降至对照组的60%(P＜0.05).DEX可拮抗LPS抑制HUVEC表达TM的效应,0.1 μg/ml、0.5 μg/ml和1.0 μg/ml DEX可使LPS(10 μg/ml)作用下TM的表达量由0.282±0.014 ng/105细胞分别增至0.409±0.009、0.462±0.017和0.362±0.019 ng/105细胞(P＜0.05);LPS(0～10 μg/ml)可抑制HUVEC表达PS,在LPS浓度1.0 μg/ml及10 μg/ml时,PS的表达量分别为对照组的43%和38%(P＜0.01).DEX则拮抗LPS抑制HUVEC表达PS的效应,0.5 μg/ml DEX可使LPS刺激下PS的表达量由13.1±4.8%/2×105细胞增至48.5±10.2%/2×105细胞(P＜0.01).结论LPS促进HUVEC表达TF,抑制HUVEC表达TM和PS.DEX能部分拮抗上述作用,提示DEX可能纠正内毒素血症时的高凝状态.     

Close correlation between high-density lipoprotein and triglycerides in normotriglyceridaemia.

The relationship between high-density-lipoprotein (HDL) particle size subclasses and the levels of the major lipoprotein lipids was studied in 74 men consecutively referred to the lipid clinic. HDL (density 1.070-1.21 kg l-1) was separated by polyacrylamide gradient gel electrophoresis (GGE) into five size-defined subclasses, in order of decreasing size as follows: HDL2b, HDL2a, HDL3a, HDL3b and HDL3c. Cholesterol and triglyceride concentrations in very-low-density (VLDL), low-density (LDL) and high-density (HDL) lipoproteins were determined. The level of VLDL triglycerides was negatively correlated with HDL2b (r = -0.66, P less than 0.0001), and positively correlated with HDL3b concentrations (r = 0.65, P less than 0.0001). Both correlations were restricted to subjects with VLDL triglyceride concentrations of less than 1.80 mmol l-1, i.e. those with normotriglyceridaemia. Patients with a history of myocardial infarction and/or angina pectoris (n = 18) had significantly lower HDL2b levels than subjects with asymptomatic hyperlipidaemia (n = 50), i.e. 0.16 vs. 0.22 mg protein ml-1 (P less than 0.05), despite essentially similar cholesterol and triglyceride levels in the VLDL, LDL and HDL fractions, including HDL2 and HDL3 cholesterol.