一株具有抗稻瘟霉活性的海洋细菌32-11-2-2的筛选和分离鉴定

目的:从中国东海微生物样品中分离筛选活性细菌菌株,并对活性菌株32-11-2-2进行鉴定.方法:采用无限稀释和平板划线法分离微生物样品,利用稻瘟霉模型进行活性筛选;并对其中的活性菌株32-11-2-2的形态、培养特征以及生理生化特征进行研究,使用16S rDNA序列分析的方法对菌株32-11-2-2进行了分类鉴定.结果:分离得到421株细菌,包括活性菌株54株,其中活性菌株32-11-2-2是一株弱嗜盐菌,具有陆地芽孢杆菌的形态特点,能产生胞外淀粉酶、过氧化氢酶,液化明胶、石蕊牛奶反应阳性,16S rDNA序列分析该菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)同源性达到98%以上.结论:活性菌株32-11-2-2是一株适应了海洋环境的枯草芽孢杆菌.     

结核杆菌Esat6与hGM-CSF双顺反子表达载体的构建及鉴定

目的 从质粒pVAE中克隆目的基因Esat6,与hGM-CSF一起构建双顺反子表达载体pIEG,并进行鉴定.方法 以质粒pVAE为模板扩增出Esat6基因,与pIRES的MCS A进行重组,构建pIEsat6重组质粒.然后再以pORF-hGM-CSF为模板扩增出hGM-CSF基因,与pIRES载体的MCS B进行重组,构建pIGM重组质粒,上述两重组质粒经PCR、限制性内切酶图谱及DNA序列测定分析等多种方法进行鉴定后,再通过酶切、连接把hGM-CSF构建于pIEsat6质粒中,形成双顺反子真核表达载体pIEG.结果 通过PCR可克隆得到相应大小的产物,酶切鉴定所切下的两片段大小约为0.29 kb和0.47 kb,与预计相符.测序结果与报道一致.结论 成功构建结核杆菌Esat6基因与hGM-CSF双顺反子真核表达载体,为进一步研究其结核融合DNA疫苗及其转染DC疫苗原型的免疫保护效果奠定了基础.     

瑞士乳杆菌发酵乳对去卵巢大鼠骨密度和骨强度的影响

<正>瑞士乳杆菌发酵乳较普通酸乳能更好提高血清钙的含量[1],本研究探讨长期食用瑞士乳杆菌发酵乳对去卵巢大鼠的骨密度、骨矿物质及骨强度影响。     

青岛地区革兰阴性杆菌的分布及耐药性监测

目的了解青岛地区常见革兰阴性杆菌的种类、分布及耐药状况,为临床用药提供依据。方法收集青岛地区4所医院临床分离的2362株革兰阴性杆菌,采用ATB Expression自动细菌鉴定系统对菌种进行鉴定,用K-B法进行药物敏感性实验。结果分离出的革兰阴性杆菌中,主要以大肠埃希菌（ECO）、铜绿假单胞菌（PAE）、肺炎克雷伯菌（KPN）、不动杆菌属（AC-）、阴沟肠杆菌（ECL）多见;大多数革兰阴性杆菌对广谱青霉素、第三代头孢菌素、氨基糖苷类和喹诺酮类抗菌药物的耐药率高;头孢吡肟（FEP）对革兰阴性非发酵菌抗菌作用差,对肠杆菌科细菌耐药率较低,为17.5%-33.9%;头孢哌酮/舒巴坦（CFS）和哌拉西林/他唑巴坦（TZP）对革兰阴性杆菌的抗菌作用强,耐药率分别为9.9%-24.6%和9.3%-29.2%;亚胺培南（IMP）对革兰阴性杆菌的抗菌活性最强,除PAE外,细菌耐药率均〈5%。结论革兰阴性杆菌对常用抗菌药物耐药性较高,开展地区性细菌耐药监测十分重要。     

鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定、磺胺耐药基因研究

目的了解20株鲍氏不动杆菌(ABA)β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶编码基因、氯己定、磺胺耐药基因存在状况。方法对20株ABA进行了9种β-内酰胺酶基因、3种氨基糖苷类修饰酶基因和氯己定、磺胺耐药基因检测,以耐药基因为分子标记作检测结果的样本聚类进行菌株亲缘性分析。结果20株ABA中blaTEM阳性13株(65%)、blaADC阳性12株(60%)、blaSHV阳性1株(5%),其他β-内酰胺酶基因均阴性;20株ABA中氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ阳性12株(60%)、aac(6′)-Ⅰ阳性13株(65%)、ant(3″)-Ⅰ阳性14株(70%);14株检出qacE△1-sul1基因(70%),以耐药基因为分子标记作检测结果的样本聚类分析显示,其中9株为克隆传播。结论该20株菌β-内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶密切相关,并存在克隆传播。     

常用抗菌药物对外伤后细菌性致死性肉芽肿病原菌的体外抗菌活性研究

目的了解常用抗菌药物对外伤后细菌性致死性肉芽肿(FBGT)病原菌的体外抗菌活性,为该病的诊治提供实验室依据。方法应用改良的新鲜兔脑厌氧肉汤分离培养病原菌,用API鉴定系统20A鉴定细菌,最低抑菌浓度(MIC)测定采用肉汤稀释法。结果从4例FBGT患者中分离到5株疮疱丙酸杆菌,其对青霉素、氨苄西林、替卡西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮、克林霉素、亚胺培南/西司他丁的MIC值均在0.125~1.0 mg/L,对甲硝唑的MIC为64~128 mg/L。结论FBGT病原菌生长缓慢,需在营养丰富的厌氧肉汤中生长增殖,增殖成功后可在厌氧血平板中生长,该病原菌对甲硝唑全部耐药,不能应用该类药物治疗;青霉素、氨苄西林、克林霉素等常用抗菌药物体外抗菌活性较高,临床可选择这些不同种类的药物联合治疗。     

5年革兰阴性杆菌耐药性变迁分析

目的分析近5年主要革兰阴性杆菌对常用抗菌药物耐药性的变迁。方法对医院1999-2003年1464株革兰阴性杆菌的药敏试验进行回顾性分析,药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果铜绿假单胞菌、大肠埃希菌对哌拉西林的耐药率分别由1999年的17.6%、42.9%增至2003年的79.2%、68.9%;对环丙沙星的耐药率分别由1999年的4.3%、40.0%增至2003年的36.0%、73.5%;大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物耐药率>50.0%,对三代头孢菌素的耐药率多在30.0%~40.0%;不动杆菌属对哌拉西林、头孢曲松的耐药率由1999年的31.2%、36.0%增至2003年的67.5%、74.1%;沙雷菌属对头孢他啶、头孢曲松、庆大霉素、阿米卡星和哌拉西林的耐药率增长迅速;亚胺培南对革兰阴性杆菌依然保持强大抗菌活性,头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦也显示较强的抗菌活性。结论近5年革兰阴性杆菌对常用抗菌药物的耐药率增长迅速,如何抑制细菌耐药率的过快增长已成为全球性的难题。     

家用空调污染解决方案

最近，在上海举行的“家用空调污染与解决方案”专家研讨会上传出消息，家用空调散热片上隐藏着大量细菌，可引起食物中毒的蜡样芽孢杆菌的污染检出率高达100%。上海市疾病预防控制中心有关专家公布的一项“空调微生物污染状况调查”，让家用空调内部隐藏的污染问题再一次引起人们的警惕。     

苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用

目的考察苛求芽孢杆菌(ATCC 26904)分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸的有效性。方法苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经DEAE-cellulose层析纯化后,用于以积分法分析尿酸酶反应曲线预测反应体系本底的直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸。结果苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶只含1种肽链,分子量为34.7 kD(1kD=0.992 1 ku),其米氏常数为(0.22±0.01)mmo1/L(n=11),黄嘌呤抑制常数为(36±3)μmo1/L(n=4)。用此尿酸酶,只要被分析反应曲线终点的底物浓度低于起点的30%,应用积分法就能可靠预测本底;直接测定反应前吸收,可使直接动力学尿酸酶法不受常见血清成分、酶活性变化和15μmo1/L黄嘌呤等干扰。监测0.025 U/ml尿酸酶反应5 min的数据,其线性响应范围为1~50μmol/L;所得临床标本血清尿酸含量(Ck)与过氧化物酶偶联间接终点平衡法(Ce)正相关(Ck=-0.008 1.046Ce,r=0.996,n=206),但Bland-Altman法分析表明两种方法不一致。结论苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶可用于直接动力学尿酸酶法测定尿酸,并可保障其优势。