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目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位点(IRES)的真核表达载体中,构建共表达质粒.Lipofectamine2000介导转染真核细胞BHK-21,反转录PCR检测E2和GM-CSF两个基因的转录,Western印迹法和间接免疫荧光法(IFA)检测细胞内E2基因表达产物的抗原性.通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,IFA法测定血清抗体效价,FACS测定免疫小鼠脾细胞中CD4 /CD8 淋巴细胞构成比,初步观察共表达质粒的免疫原性.结果:经酶切鉴定与序列测定证明重组共表达质粒中含有E2和GM-CSF两个基因且序列正确.转染细胞的反转录PCR可见E2和GM-CSF两个基因的转录.Western印迹结果可见转染细胞的裂解液在相对分子质量50 000位置有特异性条带.将转染细胞制成荧光抗原片,经IFA检测可见胞浆中出现特异荧光.免疫小鼠的最高血清抗体效价为1:160,但细胞免疫未观察到明显的提高.结论:构建的共表达质粒pE2-IRES-mGM-CSF具有良好的免疫原性,能有效刺激小鼠特异性体液免疫应答,提高了E2基因重组质粒诱导的血清抗体效价. 相似文献
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模拟呼吸性细支气管微速气流采集粉尘张克维谷峰生产性粉尘监测是衡量粉尘对人体影响的必要手段。我国一直应用较高速的气流动力捕集粉尘。我们模拟呼吸性细支气管微速气流,对能到达呼吸性细支气管及肺泡部的粉尘进行采样研究,结果报告如下。一、方法1.采样仪器设计:... 相似文献
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李绍芝 《山东中医药大学学报》1990,(1)
采用超声心动图对43例细脉者左心室舒缩功能进行了检测,并以26例滑脉和30例平脉作为对照组,发现细脉者8项左心室舒缩功能指标与各对照组比较有非常显著性差别(P>0.01)。说明细脉者具有左心室收缩功能和舒张功能的异常.左心室舒缩功能的减退是细脉产生的重要原因之一。不同原因的细脉者左心室舒缩功能的差别无显著性(P>0.05),揭示不同原因的细脉其产生的机理存在着同一性。 相似文献
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目的:检测各种肾小球疾病患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)并探讨其临床意义。方法:应用间接免疫荧光法(IIF)检测20例正常人及131例各种肾小球疾病患者血清中ANCA。结果:131例患者中有11例ANCA阳性性(阳性率为8.4%),且均为P-ANCA阳性,而20例正常对照组无1例阳性(P<0.05)。ANCA阳性中以新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,分别为67%、25%、16.7%。新月体性肾炎与IgA肾病等原发性肾小球疾病组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:ANCA在各种肾小球疾病中并不少见,尤其是新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,推测ANCA可能在这些疾病的发病机理中起了一定的作用。 相似文献
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对抗中性粒细胞胞浆抗体的新认识 总被引:3,自引:0,他引:3
1982年,Davies等首次发现节段性坏死性肾小球肾炎患者血清中存在抗中性粒细胞胞浆抗原的IgG类抗体,即抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophilcytoplasmicantibody,ANCA)。1985年VanderWonder发现在... 相似文献