大蒜素协同抗癌药对肿瘤细胞杀伤作用的研究

目的:探讨大蒜素对人胃癌细胞系MGC-803和SGC-7901细胞周期的影响及其与周期特异性药物联合使用,增强抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用.方法:苔盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制率以观察大蒜素对胃癌细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪及瑞士-姬姆萨染色光镜观察检测细胞周期的改变;3μg/ml大蒜素与周期特异性抗癌药物博莱霉素A5和长春新碱联合使用,观察药物细胞毒活性的改变.结果:大蒜素可抑制MGC-803细胞生长,24h IC50为6.4μg/ml,也可抑制SGC-7901细胞的生长,24h IC50为7.3μg/ml;以3μg/ml、6μg/ml、9μg/ml终浓度大蒜素分别作用两种胃癌细胞系24h后,与对照组比较,G0/G1细胞周期百分率明显减少,而G2/M期明显增加(P＜0.01);6μg/ml大蒜素作用培养细胞24h后,与对照组比较细胞分裂指数明显增加.提示两种细胞系经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于M期;大蒜素与两种抗癌药物联合使用,作用于MGC-803细胞,BLM A5和VCR的24h IC50值分别由单独应用的1.210μg/ml和0.125μg/ml下降到0.370μg/ml和0.031μg/ml,作用于SGC-7901细胞,BLM A5和VCR的24h IC50值分别由单独应用的1.760μg/ml和0.287μg/ml下降到0.680μg/ml和0.074μg/ml,显示低剂量大蒜素增强了抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用.结论:大蒜素可使MGC-803及SGC-7901两种细胞周期阻滞于M期;大蒜素与M期特异作用抗癌药物联合使用,具有协同抗肿瘤作用.     

银环蛇毒素对白血病K562细胞株凋亡诱导作用的研究

目的 探讨银环蛇毒素及其若干组分在体外对白血病K562细胞株的凋亡诱导作用。方法 采用阳离子交换层析法分离纯化银环蛇粗毒，应用MTT法、荧光显微镜和流式细胞术等研究毒素对K562细胞株的凋亡作用。结果 除Ⅳ峰毒素外，银环蛇粗毒及分离的部分组分IV峰、Ⅶ峰和Ⅷ峰等毒素的荧光显微图末见特征性的凋亡小体，DNA含量分布组方图中的二倍体峰前末见Gl细胞群。结论 银环蛇毒对K562细胞具有杀伤作用，但并非是细胞凋亡作用，而是致细胞坏死，而粗毒中的某些组分可能具有促K562细胞凋亡作用。     

MDR1基因稳定表达的人肝癌多药耐药细胞株的建立

目的 建立多药耐药基因(MDR1)稳定表达的人肝癌Bel-7402耐药细胞株，为应用RNA干扰技术逆转肿瘤多药耐药基因的表达提供实验模型。方法 应用阿霉素(ADM)长期培养筛选建立Bel-7402耐药细胞株，应用MTT法、流式细胞仪(FCM)及逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)对该细胞株相关特性(耐药范围、致死剂量、p-糖蛋白功能及其表达阳性率、MDR1基因检测)进行比较研究。结果 经MTT法检测，耐药细胞株耐药性明显增高，FCM检查发现从敏感细胞到耐药细胞，其阿霉素潴留功能由77．7％降至25．1％，P-糖蛋白(P—gp)阳性率由1．4％升高至54．0％，RT-PCR检查显示该细胞中MDR1 mRNA呈高表达。结论 成功建立了稳定表达MDR1基因的人肝癌Bel-7402耐药细胞株，该细胞中P—gp呈高表达，稳定性好。     

纳米羟基磷灰石溶胶对人舌癌细胞株的作用研究

目的 观察纳米羟基磷灰石溶胶(Hap—sol)对人舌癌细胞株Tca8113生长的影响，并探讨其可能机制。方法 将Hap—sol加入Tca8113细胞培养液，Hoechst 33342荧光染色观察细胞形态；DNA抽提琼脂糖凝胶电泳观察DNA“梯状”条带；测定细胞DNA断裂百分率；细胞酸性磷酸酶染色观察溶酶体活性。结果 不同浓度Hap—sol(10～60μl／孔)作用于Tca8113细胞5天及50μl／孔作用不同时间(1～6天)后，荧光显微镜观察细胞出现典型凋亡形态学改变；DNA抽提琼脂糖电泳出现凋亡细胞特征性“梯状”条带；DNA断裂百分率及细胞酸性磷酸酶着色深度随Hap—sol浓度增大或处理时间延长而逐渐增高或明显。结论 Hap—sol能诱导体外培养的人舌癌细胞株Tca8113发生凋亡，启动溶酶体是其可能机制之一。     

茶多酚诱导膀胱癌EJ细胞株凋亡与细胞内钙离子变化的相关性

目的：探讨茶多酚对膀胱癌EJ细胞株抑制增殖的分子机理。方法：采用流式细胞术、噻唑蓝(MTT)比色法和激光共聚焦成像技术，分别测定膀胱癌EJ细胞株的凋亡状态、细胞的周期变化、线粒体功能及细胞内离子钙浓度水平变化。用茶多酚处理EJ肿瘤细胞。结果：细胞的周期依浓度的改变而变化，浓度增加至20μg／ml发生明显的凋亡，OD值与浓度呈负相关性。细胞内钙离子浓度与时间、浓度的增加呈量效正相关。钙离子浓度逐渐升高亦呈现为时效、量效正相关性。结论：茶多酚能影响肿瘤细胞的增殖、凋亡过程。茶多酚诱导所致线粒体变化、细胞内钙离子超载可能在肿瘤凋亡中起着重要作用。     

CD与bcl-Xs基因联合转染卵巢癌细胞株对5-氟胞嘧啶作用的影响

目的　了解自杀基因胞嘧啶脱氨酶基因 (cytosinedeaminase ,CD)及其前药 5 氟胞嘧啶 (5 fluorucytosine,5 FC)和bcl Xs基因转移联合作用对卵巢癌细胞株生长的影响。方法　以复制缺陷型腺病毒为载体将CD基因和bcl Xs基因体外转染大鼠卵巢癌细胞株NUTU 19细胞 ,加入含 5 FC的培养基。MTT法检测培养细胞吸光度值 ,计算细胞存活率。结果　单一bcl Xs基因转移及单一CD /5 FC系统作用对NUTU 19细胞的生长抑制作用均随病毒滴度的增加而增大 ;将两者联合作用于NU TU 19细胞 ,其生长抑制率比两者单独使用时的生长抑制率之和更高 ,表现为协同效应 (P <0 .0 0 0 1)。结论　CD /5 FC系统与bcl Xs基因转移联合使用对NUTU 19细胞的生长抑制具有协同作用。     

高温对人舌癌细胞粘附性影响的实验研究

[目的]观察高温外理前、后的人舌癌细胞(Tca鄄8113)对层粘连蛋白(Ln)和纤维粘连蛋白(Fn)的粘附能力的影响,探寻高温治癌的机理。[方法]采用结晶紫染色法分别测定在37℃条件下培养24小时和在43℃条件下加热40分钟后继续培养24小时的Tca鄄8113细胞对Ln和Fn的粘附能力。[结果]加温后的人舌癌细胞粘附在包被了Fn和Ln孔板上的数量、密度明显减小;通过酶标仪测定光密度OD值,发现加温组的OD值均低于未加温组的OD值,两组相比,具有显著性差异(P<0.01)。[结论]高温能够降低人舌癌细胞对Fn、Ln的粘附能力,从而降低肿瘤细胞对基底膜的浸润、转移力,达到治疗肿瘤的目的。     

氟尿苷联用化疗药物对胃癌细胞株的抑制作用观察

目的　利用胃癌细胞株 ,观察脱氧氟尿苷 (FUDR)与常用化疗药物的相互作用。方法　利用MTT法测定FUDR与其它四种化疗药的单药和联合用药对胃癌细胞株的抑制率。结果　单种药物化疗敏感性顺序 :GEM >OXA >MMC >FUDR >5FU >CDDP ;联合用药的敏感性顺序 :CDDP FUDR >MMC FUDR >GEM FUDR >OXA FUDR。除GEM FUDR组CI >1外 ,其它三组的CI <1。除MMC FUDR组DRI<1外 ,其他各组DRI均 >1。三组三种药物联合用药的敏感性相似 ,CI均 <1,DRI均 >1。三种药物联用明显优于两种药物的联合用药。结论　FUDR与MMC或铂类化疗药联用对胃癌细胞株有显著的抑制作用 ,与OXA联用最为理想 ,三药联用优于两药联用     

TNF-α基因转染对胃癌细胞系的生长抑制效应

名誉主编Ill,llorarrbotoy-n-che吴盂超WuMe叱咖肋（fecorlrlMilitalyMhMUniversty,戳皿吟凶2（xM.--）学术顾问WAdfor巴德年BaDe。（hnesepofMhcaleiences,Betinglop30）刘新垣iulmp（孔皿吟dInstaofBbo,Cllllleseqofdences,砌吧饲2（XXB）吴妄Wuin（CancerInstitUte,ChineseA脚加阳OfMeicalde。,阿吨l（XXll）汤＄1JffiTpZhaoou（aMhcalUmversity,枷呷饲ZffX）32）主编itoY—n—cief张友会Zllazlzyouhni（CancelnstitUte,ClllxleseAcAsyofMwhedAs。,Betwl（XXll）副主编A田叨h扣hoot.勿一咖姓崔正言ClZhangan（Depe…     

促黄体生成激素释放激素激动剂对卵巢上皮性癌增殖影响

了解促黄体生成激素释放激素激动剂（丙氨瑞林）对人卵巢上皮性癌HO－8910细胞的作用。方法：用MTT比色法和计细胞分裂指数方法，检测与不同浓度丙氨瑞林（0．1－1000nmol／L）共同培养48小时后的人卵巢上皮性癌HO－8910细胞。结果：丙氨瑞林可抑制癌细胞的增殖，使核分裂指数明显降低，与对照比较P＜0．01，MTT比色结果显示抑制作用存在着量效关系，10nmol／L浓度的丙氨瑞林可明显抑制HO－8910细胞的增殖，与对照比较差异有显著性意义（P＜0．05）。结论：丙氨瑞林在体外可明显抑制HO－8910细胞的增殖。