北京医学会病毒学会的回顾和展望

中华医学会北京分会医学病毒专业委员会(北京医学会病毒学会)于1992年4月成立。第一届委员会由赵铠、陈伯权、赵锦铭、宋燕燕、段树学、王树惠、皮国华、杨佩英、俞永新、谷志远、冯树异教授组成，赵铠院士任主任委员，陈伯权教授为副主任委员，赵锦铭为常委兼秘书，主持日常工作，推荐顾方舟院士、田庚善教授为学会顾问；1998年10月由杨光林、赵锦铭、宋燕燕、段树学、王树惠、皮国华、杨佩英、貌盼勇、王佑春、朱万孚、杨晓峰教授组成第二届委员会，杨光林教授任主任委员，赵锦铭教授为副主任委员，秘书为赵锦铭(兼)、张建华，推荐病毒界前辈顾方舟院士、赵铠院士为学会顾问；2003年7月在中华医学会北京分会主持下，经过通信提名、单位审核提名等程序推举产生了第三届委员会，第三届委员会由赵锦铭、刘建源、王佑春、段树学、宋燕燕、朱万孚、史利卿、彭小忠、秦鄂德、刘海林、杜豫教授组成，并选举赵锦铭教授为主任委员，刘建源、王佑春教授为副主任委员，推举顾方舟、赵铠两院士继续担任本学会顾问，推举史利卿(兼)、许立峰为秘书。     

立夫特谷热的实验室早期诊断

立夫特谷热(rift valley fever，RVF)是流行于非洲次撒哈拉地区的急性病毒性人畜共患病，病原体为立夫特谷热病毒(RVFV)，由节肢动物传播。RVFV属于布尼亚病毒科白蛉病毒属，基因组为单股负链RNA，由大(L)、中(M)、小(S)3个节段构成，每个节段包裹在单独的核衣壳中。L节段编码L蛋白即病毒RNA聚合酶；M节段编码包膜糖蛋白G1和G2及两个非结构蛋白；S节段则利用双义链策略编码N和NSs蛋白。     

巢式PCR检测龈下菌斑中HCMV、EBV、HSV-1与慢性牙周炎活动性的关系

目的　建立临床检测龈下菌斑标本中人巨细胞病毒 (HCMV)、Epstein Barr病毒 (EBV)、单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1 )巢式PCR方法 ,研究这 3种病毒与慢性牙周炎活动性的关系。方法　收集6 2例慢性牙周炎患者 (男性 2 7例、女性 35例 ,平均年龄 5 3岁 )的牙周炎活动部位、牙周炎静止部位的龈下菌斑 ,提取DNA后使用巢式PCR检测HCMV、EBV、HSV 1 ,比较分析其在同一病人不同部位的检出率。结果　牙周炎活动部位的HCMV检出率为 38.7%,EBV的检出率为 5 8%,HSV 1的检出率为30 .6 %,两种以上病毒合并感染的检出率为 4 0 .3%;牙周炎静止部位的HCMV检出率为 1 4 .5 %,EBV为 2 2 .6 %,HSV 1为 1 1 .3%,两种以上病毒合并感染的检出率为 1 1 .3%。这 3种病毒及其合并感染在牙周炎活动部位的检出率均高于牙周炎静止部位 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　提示HC MV、EBV、HSV 1与慢性牙周炎的活动性相关。     

呼吸道合胞病毒M2-1蛋白多克隆抗体的制备

目的:制备呼吸道合胞病毒(RSV)M2-1蛋白多克隆抗体, 为进一步研究RSV生物学特性奠定基础。方法:纯化RSV M2-1蛋白, 免疫新西兰家兔, Western blot检测M2-1多克隆抗体效价。结果:Western blot检测可见约48 kD的特异性条带, M2-1蛋白多克隆效价为1:1000。　结论：本实验成功的地制备了RSV M2-1蛋白多克隆抗体。     

EB病毒LMP2A特异性CTL的体外诱导及分析

用EBV LMP2A重组痘苗病毒 (rVV LMP2A )转染人树突状细胞 (DC ) ,转染后的DC分别在第 1、 7、 14天刺激相同MHC背景的T细胞 ,在IL 2作用下诱导LMP2A特异性CTL。用LDH释放法检测CTL杀伤活性 ;流式细胞术 (FACS )检测CTL诱导分化过程中CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD5 6 + 等细胞的分群变化 ;RT PCR检测细胞分化过程中FasLmRNA表达 ;生物活性法检测功能性细胞因子IFN γ的分泌。结果显示本法诱导的CTL对靶细胞有特异性杀伤活性 ,第 2次和第 3次DC刺激后杀伤活性有所上升 ;在CTL诱导分化的第 7、 14、 2 1天细胞分群以CD4 + 、CD8+ 细胞为主 ;RT PCR证实所诱导的细胞内有FasLmRNA的表达 ;随细胞培养天数的增加IFN γ分泌增加 ,在第 14天达到较高水平。研究表明重组痘苗病毒载体rVV LMP2A转染的DC刺激T细胞可诱导出EBV LMP2A特异性CTL。     

SARS冠状病毒的病原生物学分析及其启示

Severe acute respiratory syndrome (SARS) is the first new epidemic of the twenty - first century. A novel coronavirus (SARS - CoV) has been identified as the causative agent of SAP, S. The genome of SARS - CoV has 29,727 nucleatides in length. The genome organization, with 11 open reading flames, is similar to that of conronaviruses.Phylogenetic analyses and sequence comparisons showed that SARS- CoV is not closely related to any of the known coronaviruses, indicating neither a mutant nor recombinant of well -characterized coronaviruses. It is a complete new coronavirus from nonhuman hostPathological studies show that severe immune response, associated to cytokine dysregulation, may be related to the lung damage of fatal SRAS. Recombination of genomes of wild - type strains with vaccine coronavirus is a potential risk associated with the application of living attenuated coronavirus vaccines. The proteinases, controlling the activities of the SARS- CoV replication, and spike protein, involved in viral entry and pathogenesis, represent attractive targets of anti- SARS drug development. Comparative full-length genome sequence analysis of 14 SARS coronavirus isolates suggests a remarkable genetic conservation of the virus. Anti - SARS vaccine and drug development will benefit from this genetic conservation. SARS-CoV is not likely to change rapidly and thus may not readily mutate to a benign infection. The progress in anti - SARS research has been impressive. However, one of the most effective tools in the control of the SARS is quickly tracing and isolating the contacts of stricken patients before they spread the virus further.     

腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定

目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法：将人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中，通过包装的重组病毒感染，将E6E7基因导入并整合到永生293细胞的基因组中。结果：本研究成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒并感染了永生293细胞，PCR／Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞293TL中确有表达，转化细胞293TC和293TL具有明显的转化表型，和亲本293细胞相比，生长速度快，接触抑制消失，集落形成率提高20倍，且集落明显增大，形成时间短。结论：成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒，HPV18 E6E7基因引起永生化人上皮细胞293的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞，研究其致癌机制。     

人癌胚抗原重组痘苗病毒转染树突状细胞体外诱导的抗肿瘤免疫

目的：研究人癌胚抗原重组痘苗病毒（rV-CEA)转染外周血树突状细胞（DC）后在外体诱导的抗CEA分泌性肿瘤免疫。方法：分离晚期结肠癌患者的外周血单核细胞，在体外用人重组粒－巨噬细胞集落刺激因子（GM－CSF）及白细胞介素4（IL－4）培养成DC，再用rV-CEA转染DC后激发自体T细胞，观察其体外激发自体T细胞的增殖能力及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对自体CEA分泌性肿瘤细胞的杀伤活性，并与野生型痘苗病毒（W－VV）及无病毒转染的DC所激发的T细胞进行比较。结果：经rV-CEA转染的DC能显著刺激自体T细胞的增殖，其激活的T细胞对CEA分泌性自体肿瘤细胞具有特异性杀伤作用。结论：rV-CEA转染的DC可以诱导体CEA分泌性肿瘤免疫。     

鸭乙型肝炎病毒DNA体内转染的研究

利用两种鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）ＤＮＡ双体质粒及环化的ＤＨＢＶＤＮＡ体内转染２ｄ龄鸭及４～２０ｄ龄鸭，大多数鸭产生了短暂病毒血症，少数鸭产持续病毒血症，转染鸭血清中检测得ＤＨＢｓ／ｐｒｅＳＡｇ，ＤＨＢＶＤＮＡ及ＤＨＢＶ病毒颗粒，转染鸭血清腹腔注射１ｄ龄鸭可感染成功，转染鸭肝组织检测到复制型ＤＨＢＶＤＮＡ，提示转染后既有抗原有的表达，又有病毒的复制。另外，用两种ＤＨＢＶＤＮＡ单体质粒体内转染２ｄｘ     

呼吸道合胞病毒（RSV）F和G糖蛋白抗体反应与RSV肺…

采用重组痘苗病毒表达的呼吸合胞病毒和Ｇ糖蛋白抗原，应用间接ＥＬＩＳＡ法对１２０名１４岁以下的正常儿童及４４例ＲＳＶ肺炎患儿血清中ＲＳＶ－Ｆ和Ｇ糖蛋白特异性ＩｇＧ抗体水平进行了检测。研究结果表明，正常儿童血清中两种抗体水平随年龄增长而逐渐增高，３岁以内组与３岁以上组的抗体水平有蚶性差异，２岁以上ＲＳＶ肺炎患儿急性期血清ＲＳＶ－Ｆ和Ｇ抗体平均水平明显低于２岁以上正常儿童的水平、以上说明婴幼儿易发生ＲＳ