基于特征图谱的金银花与山银花(灰毡毛忍冬)质量表征比较研究

目的阐明金银花与山银花药学质量表征的共性与特性。方法采用HPLC-DAD法,Waters XBridge C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长为211 nm,柱温30℃,建立金银花和山银花特征图谱质量表征方法;基于特征图谱中的特征峰的所属化学类型及代表性成分的峰面积和含量对15批金银花和10批山银花饮片进行药学质量表征,并对二者的药学质量特点进行比较分析。结果(1)建立的金银花和山银花的特征图谱及质量表征方法表征了二者质量表征特征值:特征峰、相对保留时间、相对峰面积、代表性成分含量及其相对含量。(2)金银花和山银花均具有特征峰30个,其药学架构涵盖4种化学类型,其中金银花/山银花各类型特征峰数目分别为:环烯醚萜类16/6,酚酸类8/11,黄酮类4/5,三萜皂苷类2/8个。(3)二者具有共有特征峰15个,其中环烯醚萜类6个、酚酸类6个、黄酮类2个、三萜皂苷类1个。(4)在金银花/山银花特征峰中指认了11个代表性成分:环烯醚萜类3/2、酚酸类6/6、黄酮类1/1、三萜皂苷类1/2;其代表性成分含量(mg/g)分别为:断氧化马钱子苷(21.756~29.826)/(6.936~14.643)、獐芽菜苦苷(12.204~30.139)/(26.109~31.608)、当药苷(13.806~23.27/(-),绿原酸(24.686~36.595)/(36.796~42.979)、异绿原酸A(14.010~20.452)/(50.544~58.013)、异绿原酸C(2.896~4.681)/(6.986~7.960)、异绿原酸B(0.935~1.260)/(1.389~1.738)、新绿原酸(0.888~1.560)/(2.025~2.635)、隐绿原酸(0.565~0.852)/(0.947~1.122),木犀草苷(0.579~0.690)/(0.527~0.642),灰毡毛忍冬皂苷乙(14.471~20.243)/(35.487~54.576)、川续断皂苷乙(-)/(31.191~35.731)。结论建立的特征图谱质量表征方法可准确地表征金银花与山银花的药学质量,二者质量表征共性为:具有相同的药学架构及部分共有特征成分;又具有明显的特性:金银花环烯醚萜类特征峰较多,当药苷为其特有环烯醚萜类成分,断氧化马钱子苷和木犀草苷的含量高于山银花;而山银花酚酸类和三萜皂苷类特征峰较多,川续断皂苷乙为其特有三萜皂苷类成分,异绿原酸A、灰毡毛忍冬皂苷乙、绿原酸、獐芽菜苦苷、异绿原酸C、新绿原酸、异绿原酸B和隐绿原酸的含量均高于金银花。研究结果可为金银花与山银花的质量控制及合理应用提供科学依据。     

现时金银花与山银花比较鉴别分析

目的对市售金银花与山银花真伪与种类鉴别的方法进行研究同时考察商品质量。方法采用体视显微、薄层色谱、液-质联用、标识成分(绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙)含量测定等方法对获得的27批样品进行了比较检定。结果花表面腺毛非腺毛的有无及形态、花萼特征、是否检出灰毡毛忍冬皂苷乙可作为鉴别金银花与山银花的依据;27批样品中,16批为金银花,其中1批掺有加重粉;11批为山银花,其中7批灰毡毛忍冬、2批红腺忍冬、1批华南忍冬、1批黄褐毛忍冬。结论体视显微特征和薄层色谱法可鉴别金银花与山银花,结合高效液相测定结果实现了对27批样品的质量考察与比较鉴别研究。     

山银花的组织培养研究进展

正山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、华南忍冬Lonicera Confusa DC.或黄褐毛忍冬Lonicera fulvotomentosa Hsuet S.C.Cheng的干燥花蕾或带初开的花[1]。具有抗病原微生物、抗炎退热、抗氧化、抗肿瘤、抗过敏、抗动脉粥样硬化、降血脂、保护肝脏、免疫调节等药理作用[2-3]。近年来,山银花的种植区域越来越广,如何提高其产量与质量一直备受关注。组织培养作为一种现代生物技术,在植物种质保存和优良品种快速繁育方面具有重要的应用价值。本文对山银花近十年组织培养的研究进行了综述,为进一步深入研究提供理论参考。     

国家药品标准修订公示信息

国家药典委员会近期对中药制剂处方中金银花变更山银花品种和27个品种的拟修订标准进行征求意见,期限见下表,修订内容详见国家药典委员会网站(http://www.chp.org.cn)。请相关单位认真复核,若有异议,请尽快向国家药典委员会反馈意见。     

山银花化学成分研究

目的研究华南忍冬Lonicera confusa干燥花蕾(山银花)的化学成分。方法利用反复硅胶柱色谱,Sephadex LH-20、中压柱色谱及半制备液相色谱等方法分离纯化;通过核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构。结果分离得到10个化合物,分别鉴定为绿原酸(1)、槲皮素(2)、木犀草素(3)、木犀草素-3′-O-α-L-鼠李糖苷(4)、芹菜素-7-O-α-L-鼠李糖苷(5)、反式桂皮酸(6)、对羟基苯甲醛(7)、2,5-二羟基苯甲酸-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、苄基-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、脱落酸(10)。结论化合物4~10首次从山银花中分离得到。     

HPLC含量测定和DNA分子标记技术对不同产地金银花的鉴定

目的:通过指标成分含量测定及DNA分子标记技术对不同产地金银花样品进行鉴定,探讨DNA分子鉴定技术在中草药鉴别领域的应用前景。方法:以绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙为指标成分,利用HPLC测定指标成分含量。提取金银花、山银花对照药材及河北和山东产地金银花样品DNA,检测DNA浓度和纯度,采用基于聚合酶链式反应(PCR)方法的DNA分子标记技术鉴别样品。结果:河北和山东产地金银花中绿原酸质量分数3.1%~3.3%,河北、山东产地金银花中木犀草苷质量分数分别为0.049%~0.050%,0.069%~0.078%,2个产地样品中均未检出灰毡毛忍冬皂苷乙成分。采用基于PCR方法鉴定出河北和山东产地各3批样品均为金银花。结论:DNA分子鉴定技术作为含量测定常规方法的补充,具有准确可靠、重复性高等优点,可用于金银花药材的鉴定。     

薄层色谱法鉴别双黄连口服液中金银花成分的改进

目的对双黄连口服液中金银花的薄层色谱鉴别方法进行改进,并对其中是否使用山银花进行鉴别。方法采用薄层色谱法,先将供试品用乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别提取后,制备成两份供试品溶液,再以金银花中成分木犀草苷、绿原酸以及山银花中的特征成分灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙作为对照品,分别点于高效预制硅胶G60薄层板上,利用两个展开系统,展开。一份喷以1％三氯化铝乙醇溶液,于紫外光灯（365nm）下检视并成像;另一份喷以10％硫酸乙醇溶液,于105℃加热至条斑显色清晰,目光下检视并成像,进行分析。结果通过对两份薄层色谱图像分析比较,4份供试品均可检出绿原酸、木犀草苷,未检出山银花中的特征成分灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙,阴性对照样品均显示无干扰。结论该法可快速有效地对双黄连i：2服液中金银花成分进行鉴别和质量控制。     

川渝产山银花中总黄酮和总绿原酸的含量测定

目的建立川渝产山银花中总黄酮和总绿原酸的含量测定方法。方法采用UV法测定总黄酮和总绿原酸。结果总黄酮在0．02—0．08mg／ml范围内具有良好的线性关系（r=0．9998）,回收率为98．15％,精密度实验的相对标准偏差（RSD）为0．45％。总绿原酸在0．8—8μg范围内具有良好的线性关系（r=0．9998）。结论该方法操作简便、快速、有效、灵敏、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为川银花总黄酮和总绿原酸的含量测定方法。     

川渝产山银花中绿原酸和总绿原酸的测定

目的 采用HPLC法和uV法测定川渝产山银花中的绿原酸和总绿原酸.方法 色谱柱为Dikma Kromasil C18柱(250mm ×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(12:88);流速0.8 ml·min-1;检测波长326 nm;柱温30℃;进样量10μ1.结果 绿原酸0.8-8.0 μg具有良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为98.75%,RSD=0.29%.结论 方法操作简便、快速、具有良好的重复性和回收率,可作为川渝产山银花中绿原酸和总绿原酸的含量测定方法.     

小儿咳喘灵颗粒中山银花检查方法的研究

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对小儿咳喘灵颗粒中山银花掺伪进行检查。方法:采用HPLC-ELSD法，以山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙作为检测成分进行检查，并对阳性样品用LC-MS/MS法进行验证。结果:HPLC-ELSD和LC-MS/MS方法线性良好，加标回收率分别为100.9%和102.9%,方法精密度分别为2.2%和2.0%。结论:本方法准确、简便、专属性强，重复性好，可用于检查小儿咳喘灵颗粒中是否存在山银花投料的情况。