全文获取类型
收费全文 | 12280篇 |
免费 | 963篇 |
国内免费 | 1107篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 296篇 |
儿科学 | 427篇 |
妇产科学 | 121篇 |
基础医学 | 1595篇 |
口腔科学 | 227篇 |
临床医学 | 1581篇 |
内科学 | 1482篇 |
皮肤病学 | 376篇 |
神经病学 | 414篇 |
特种医学 | 296篇 |
外国民族医学 | 3篇 |
外科学 | 430篇 |
综合类 | 3244篇 |
预防医学 | 1054篇 |
眼科学 | 267篇 |
药学 | 977篇 |
34篇 | |
中国医学 | 226篇 |
肿瘤学 | 1300篇 |
出版年
2024年 | 123篇 |
2023年 | 475篇 |
2022年 | 399篇 |
2021年 | 423篇 |
2020年 | 456篇 |
2019年 | 425篇 |
2018年 | 241篇 |
2017年 | 330篇 |
2016年 | 392篇 |
2015年 | 374篇 |
2014年 | 524篇 |
2013年 | 516篇 |
2012年 | 738篇 |
2011年 | 821篇 |
2010年 | 745篇 |
2009年 | 688篇 |
2008年 | 856篇 |
2007年 | 726篇 |
2006年 | 746篇 |
2005年 | 838篇 |
2004年 | 575篇 |
2003年 | 446篇 |
2002年 | 398篇 |
2001年 | 339篇 |
2000年 | 284篇 |
1999年 | 276篇 |
1998年 | 199篇 |
1997年 | 254篇 |
1996年 | 170篇 |
1995年 | 162篇 |
1994年 | 103篇 |
1993年 | 89篇 |
1992年 | 53篇 |
1991年 | 58篇 |
1990年 | 36篇 |
1989年 | 43篇 |
1988年 | 13篇 |
1987年 | 7篇 |
1986年 | 5篇 |
1985年 | 2篇 |
1984年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 281 毫秒
131.
目的比较非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者外周血和胸水脱落细胞T790M突变检出率的差异。方法收集52例NSCLC患者的胸水和外周血标本,检测两者的T790M突变,并对检测结果进行分析。结果外周血标本和胸水脱落细胞T790M突变的阳性率分别为30.8%、46.2%。外周血检测T790M突变阳性的16例胸水脱落细胞检测结果均阳性,外周血检测阴性的28例胸水脱落细胞检测结果22例阴性,6例阳性。外周血检测初步判为临界阳性的8例中胸水脱落细胞检测结果4例阴性,2例阳性,2例弱阳性。结论胸水脱落细胞比外周血标本检出率高,有胸水标本的患者建议优先选择胸水检测T790M突变。 相似文献
132.
在调查云南少数民族G6PD缺乏症时,采用G6PD硝基四氮唑蓝纸片法筛查,按WHO标准化方法进行生化变异型鉴定,再用错配碱基PCR引入酶切位点法进行DNA突变型研究,首次在傣族中发现G6PDcDNA突变型:1388G→A。 相似文献
133.
目的肢带型肌营养不良症(LGMD)是常见的常染色体遗传肌肉病,特点为髋肩带肌无力、萎缩,进行性发展至远端肌肉,男女均可受累,有明显的遗传异质性,国外研究发现重型LGMD分别涉及13q12、17q21、4q12、5q33区域编码γ-、α-、β-、δ-糖蛋白的4个基因座位。中国人群中LGMD的致病基因研究尚无报道,拟通过粘附蛋白(adhalin)基因突变的检测,鉴定其致病基因。方法用PCR-SSCP及DNA测序法对adhalin基因第2、3外显子进行了突变检测及鉴定。结果发现1例散发的9岁女患者adhalin第2、3外显子存在纯合Arg77Cys突变,此突变在本实验的40条野生染色体中未发现。结论发现中国人群中重型LGMD(DLMD)存在adhalin基因突变。提示17q21区的adhalin基因是中国人LGMD的一个致病基因。 相似文献
134.
目的 探讨信号转导和转录激活因子 (STAT) 6基因 3′非翻译区G2 96 4A位点多态性和第一外显子GT串联重复序列遗传多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性的关系。方法 用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术检测STAT6基因G2 96 4A位点多态性 ;用聚合酶链反应 短串联重复多态性 (PCR STR)技术对STAT6基因第一外显子微卫星进行分型 ,并将PCR产物克隆及测序鉴定 ;采用病例 对照法研究了 1 35例变应性哮喘患者和 1 0 9例对照。结果 ( 1 )湖北地区汉族人群STAT6基因G2 96 4A位点基因型以GA型最为常见 ;哮喘组与对照组STAT6基因G2 96 4A位点的等位基因频率和基因型频率GG、GA、AA之间差异无统计学意义 (P >0 .0 5)。 ( 2 )STAT6基因第一外显子微卫星多态性共检出GT串联重复次数为 1 3、1 4、1 5、1 6的 4种等位基因 ;第一外显子微卫星的多态性检测出 1 3/1 4基因型在哮喘患者组和正常对照组相比差异具有统计学意义(P =0 .0 0 1 4 )。 ( 3)STAT6基因第一外显子GT二核苷酸串联重复序列多态性中 1 3 GT重复等位基因与 2 96 4A变异体之间存在连锁不平衡 (P =0 .0 0 0 0 2 1 8)。结论 STAT6基因 3′非翻译区G2 96 4A位点多态性与湖北汉族人哮喘易感性无明显相关性 ;第一外显子GT二核苷酸串联重 相似文献
135.
人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G,HLA-G)突变体cDNA,并使其在HLA-I类阴性的K562细胞上获得稳定表达,为研究配-受体之间的识别机制奠定基础。方法:用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-GcDNA,得到全长HLA-GPCR产物后,用桥式PCR方法进行定点点突变,将突变的目的基因亚克隆于逆转录,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体,采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测,观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达。结果:HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达。结论:成功构建了mG-pLNCX表达载体,并使HLA-G突变体分子在HLA-I类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达。 相似文献
136.
肝癌细胞微细胞介导染色体转移方法学的建立与探讨 总被引:13,自引:0,他引:13
目的建立肝癌细胞微细胞介导染色体转移方法,为肝癌转移抑制基因的染色体功能定位建立技术平台。方法人单染色体供体细胞通过微核化、出核、融合步骤将随机标记有耐药neo基因的正常人8号染色体导入到大鼠肝癌高转移细胞系C5F中,对微细胞杂交克隆进行药物筛选和单细胞克隆,并填序列标签位点-PCR和全染色体涂染荧光原位杂交方法验证人染色体转移的结果。结果获得具有G418和HAT双重抗性的微细胞杂交细胞,通过单细胞分离克隆方法获得15个具有双重抗性的微细胞杂交克隆,序列标签位点-PCR结果发现导入染色体的随机片段丢失,全染色体涂染荧光原位杂交结果发现导入的人8号染色体与大鼠染色体发生了稳定的重组。结论成功建立微细胞介导的染色体转移技术,为肝癌转移抑制基因的染色体功能定位奠定了技术基础。 相似文献
137.
变性高效液相色谱检测 PKD2基因突变 总被引:3,自引:2,他引:3
目的 利用变性高效液相色谱分析技术 ( denaturing high- performance liquidchromatography,DHPL C) ,检测 2型常染色体显性遗传性多囊肾病致病基因 ( polycystic kidney diseasegene 2 ,PKD2 )突变。方法 收集临床确诊的汉族常染色体显性遗传性多囊肾病 ( autosomal dominantpolycystic kidney disease,ADPKD) 94个家系 ,提取外周血白细胞 DNA,用聚合酶链反应 ( polymerasechain reaction,PCR)扩增目的基因的全编码区 ,DHPL C对 PCR产物进行突变筛选 ,出现异常峰型的DNA片段进行核苷酸序列测定 ,明确突变位点和类型。结果 以 5 0名健康志愿者为正常对照 ,从 94例患者家系中成功检测出 8种突变 ,包括 2种无义突变、3种移码突变、3种错义突变。无义突变分别位于第 5和13外显子 ( 12 4 9C→ T,2 4 0 7C→ T) ,编码氨基酸分别在 4 17和 80 3位形成终止密码子。移码突变分别位于第2、12和 13外显子 ( 6 36 - 6 37ins T,2 348- 2 35 1del AGAA,2 4 0 1del A)。错义突变分别位于第 1、4和 5外显子 ( 5 6 8G→ A,96 4 C→T,116 8G→A) ,其编码氨基酸发生改变 ( 190 Ala→ Thr,32 2 Arg→Trp,390 Gly→ Ser)。结论 所检测出的 8种突变 ,为 ADPKD患者的基因诊断、产前诊断和囊肿前诊断积累了资料 相似文献
138.
139.
一种新的β地中海贫血双重突变杂合体[—28(A→G).CD17(A→T… 总被引:4,自引:2,他引:4
为研究不同民族β地中海贫血的基因突变,作者应用聚合酶链反应(PCR)结合等位基因特异性寡核苷酸(ASO)探针点杂交技术,对现居新疆的一个布依族家系的β地贫进行了基因分析,发现其中两名成员为-28(A→G)和CD17(A→T)的双重杂合体。结合家系调查表明,为同一染色体上的双重突变,文献中未见报道。这种基因的携带者表现为轻型β地中海贫血,从而为认识β地盆高度的异质性、为研究我国少数民族β地贫的基因背 相似文献
140.
目的 构建HPI毒力岛缺失的EAggEC17-2突变株,初步研究EAggEC菌株携带的耶尔森菌HPI毒力岛合成铁载体Ybt的功能。方法以EAggEC17-2为出发菌株,irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有氯霉素(Can)抗性基因(cat基因)标记。通过接合转移和同源重组,构建了缺失约24kb的HPI毒力岛功能核心区区域EAggEC17-2的仝岛缺失株EA85。应用流式细胞技术(FACS)检测指示菌株WA-CS irp1::KN(pC3G3.3N)荧光强度的变化情况,对EA85缺失株和出发菌株进行了合成Ybt的功能比较研究。结果成功构建了EAggEC17-2HPI全岛缺失株EA85。EAggEC17-2菌株具有表达Ybt的功能,而缺失株EA85丧失了合成Ybt的能力。结论EAggEC17-2HPI毒力岛的缺失,使Ybt的合成彻底阻断。EAggEC17-2具有的合成Ybt的功能是由其染色体携带的HPI毒力岛所决定的。 相似文献