细胞间粘附分子—1^125I标记及其纯度、免疫活性的鉴定

目的：建立细胞间粘附分子－1（intracellular adhesion molecule-1 ICAM-1)^125I标记方法及鉴定其纯度和免疫活性。方法：用氯胺－T法标记ICAM－1,用Sephadex G-50柱层析分离,用纸层析法鉴定^125I-ICAM-1的纯度,放免法检测其免疫活性,结果：^125I-ICAM-1比活度为77．84uCi/ug蛋白,标记率为65．54％,^125I-Na的放化纯度为97．27％,^125I-ICAM-1能够与ICAM－1－Ab的最大结合为88．64％,并且随ICAM－1－Ab滴度的降低而增高。结论：成功建立^125I标记ICAM－1的方法,并且^125I-ICAM-1具有一定的免疫活性。     

新生儿败血症血清可溶性细胞间粘附分子1水平的变化

目的：探讨血清可溶性细胞间粘附分子1（sICAM-1）在新生儿几血症早期诊断中的价值。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验,观察3组新生儿血清sICAM-1水平。脐血组：34例正常新生儿脐血。对照组：25例非感染性疾病新生儿。败血症组：33例治疗前（入院第1d）及有效治疗后7－18d（出院当天）的败血症新生儿。结果：血清sICAM-1水平3组间有显著差异（P＜0.01）。败血症组治疗前明显增高,治疗后略有下降,但治疗前后比较差异无意义（P＞0.05）;血培养阳性与阳性之间比较,不同程度败血症治疗前与治疗后比较,差异均无意义（P均＞0.05）。结论：血清sICAM-1测定可作为新生儿败血症早期诊断指标,但不能评判疗效。     

脑星形细胞瘤中神经细胞黏附分子与PCNA的表达及其关系

目的 :研究人脑星形细胞瘤中神经细胞黏附分子 (neuralcelladhesionmolecule ,NCAM)的表达情况及其与肿瘤增殖活性 (PCNA)的相关性。方法 :收集人脑星形细胞瘤标本 48例 ,行SP法染色。结果 :正常脑组织NCAM全部表达 ,星形细胞瘤中I～II级、III级、IV级组阳性表达率分别为 95 % (1 9/ 2 0 ) ,3 8 9% (7/ 1 8)和 2 0 % (2 / 1 0 ) ,阳性细胞表达程度随肿瘤恶性程度的增高反而降低。其表达程度与PCNA免疫反应分数 (IRS)呈负相关 (r =- 0 .6 5 7,P <0 .0 5 )。结论 :随人脑星形细胞瘤恶性程度的增高 ,NCAM表达下调 ,提示NCAM表达减少参与肿瘤的生物恶性发展。     

程序性细胞死亡分子10调控EphB4信号通路促进胶质母细胞瘤迁移和侵袭的作用及其机制

目的探讨程序性细胞死亡分子10(PDCD10)调控胶质母细胞瘤(GBM)迁移和侵袭的作用与机制。方法采用慢病毒转染GBM细胞系(U251和U373)构建稳定转染的PDCD10过表达(oxPDCD10)或沉默(shPDCD10)的GBM细胞系。分别采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。蛋白质印迹法(Western blot)检测PDCD10、酪氨酸蛋白激酶受体B4(EphB4)、细胞外调节蛋白激酶(Erk)1/2和pErk1/2的表达。在过表达PDCD10的GBM细胞进一步下调EphB4(siEphB4)。两组间比较采用t检验,多组间均数比较采用方差分析。结果PDCD10和EphB4在GBM患者中高表达且具有相关性(203.4±17.9比100.0±12.4,t=8.225,P<0.05),差异有统计学意义。shPDCD10的GBM细胞系迁移和侵袭低于对照组,而oxPDCD10的GBM细胞系迁移(152.8±27.3比97.6±16.4,P<0.05)和侵袭(152.9±11.8比89.4±16.6,P<0.05)高于对照组(t=5.405,P<0.05),差异均有统计学意义。shPDCD10引起EphB4和p-Erk1/2的表达低于对照组,而oxPDCD10调控EphB4表达高于对照组。在oxPDCD10的GBM细胞上转染siEphB4后,逆转了oxPDCD10引起的GBM细胞迁移和侵袭高于对照组(t=3.009,P<0.05),差异有统计学意义。结论GBM中PDCD10通过调控EphB4的表达,激活ErK1/2信号通路,促进胶质瘤的迁移与侵袭。     

Fifty years of the mitochondrial pyruvate carrier: New insights into its structure,function, and inhibition

The mitochondrial pyruvate carrier (MPC) resides in the mitochondrial inner membrane, where it links cytosolic and mitochondrial metabolism by transporting pyruvate produced in glycolysis into the mitochondrial matrix. Due to its central metabolic role, it has been proposed as a potential drug target for diabetes, non-alcoholic fatty liver disease, neurodegeneration, and cancers relying on mitochondrial metabolism. Little is known about the structure and mechanism of MPC, as the proteins involved were only identified a decade ago and technical difficulties concerning their purification and stability have hindered progress in functional and structural analyses. The functional unit of MPC is a hetero-dimer comprising two small homologous membrane proteins, MPC1/MPC2 in humans, with the alternative complex MPC1L/MPC2 forming in the testis, but MPC proteins are found throughout the tree of life. The predicted topology of each protomer consists of an amphipathic helix followed by three transmembrane helices. An increasing number of inhibitors are being identified, expanding MPC pharmacology and providing insights into the inhibitory mechanism. Here, we provide critical insights on the composition, structure, and function of the complex and we summarize the different classes of small molecule inhibitors and their potential in therapeutics.     

胆管癌免疫检查点抑制剂治疗研究进展

胆管癌是一种罕见的恶性肿瘤,总体预后较差。根治性手术治疗是目前唯一可使早期胆管癌病人获得长期生存的策略。对于多数晚期胆管癌病人,系统治疗成为主要手段,但目前可用于治疗胆管癌的一线药物选择有限,疗效有限。近年来,免疫检查点抑制剂等免疫治疗策略利用宿主免疫系统进行有效的抗肿瘤反应,在多种实体肿瘤中取得令人鼓舞的结果。笔者回顾并总结免疫检查点抑制剂在治疗胆管癌中的研究进展。     

食管癌调强放疗靶区与肺体积比和处方剂量的关系

目的 研究食管癌调强放射治疗中能够做出既定目标的放疗计划时,靶区体积与肺体积比值和处方剂量的关系,从而帮助临床医生根据靶区情况,选择适合的处方剂量。方法 随机选取临床上已进行放射治疗的食管癌患者80例;其中病变范围包括全部食管癌类型,靶区根据ICRU（International Commission Radiological Units）50、62号文件进行勾画;设定统计参数及计划目标。根据参数的统计结果进行统计学分析;通过拟合计算求出满足既定目标的体积比临界值。结果 体积比与肺V₅、V₂₀、V₃₀以及肺平均受量具有线性正相关关系。给予60 Gy的处方剂量时,体积比的临界值为10%;给予50 Gy的处方剂量时,体积比的临界值为13%。结论 根据研究结果可以预见：食管癌调强放疗中当靶区体积与肺体积比值超过10%时,考虑给予的处方剂量不高于60 Gy;当靶区体积与肺体积比值超过13%时,给予处方剂量时应谨慎选择,但对于各段食管癌靶区超出肺段的患者可适当放宽。这为临床医生勾画靶区期间在处方剂量和靶区范围的选择上提供了参照。     

神经系统轴突三维定向生长的数值模拟

目的研究轴突在三维组织中的定向生长问题,探讨轴突沿非平坦基底定向生长时基底的低起伏程度对轴突的生长速率、成束和解束速率的影响。方法根据实验观察,设轴突生长的牵引力与靶细胞分泌的可扩散吸引分子的浓度梯度成正比,轴突成束和解束的侧向力与生长锥分泌的可扩散吸引分子和排斥分子的浓度梯度成正比,并且,吸引力指向浓度高的方向,排斥力指向浓度低的方向,浓度满足扩散方程。对于非平坦基底,有效力为沿基底轮廓线的切向分量。数值计算采用三维有限差分法和改进的Euler法。结果(1)轴突在三维组织中定向生长的基本特征与在二维培养基实验中的观察是一致的,只是在形态上有三维与二维之分;(2)非平坦基底的低起伏程度影响轴突的生长,随着起伏加剧,生长锥的前进速率减小、侧向速率增加。结论(1)许多基于二维培养实验所揭示的轴突生长的基本规律在三维情况下仍然是成立的;(2)基底的几何性质是影响轴突生长速率的重要因素之一。     

神经系统轴突生长的数值模拟

目的数值模拟神经系统在发育过程中轴突的生长情况。方法根据神经发育原理,建立具有一定刚性的非线性混合抛物型偏微分方程组,运用ADI差分格式和改进的欧拉法作数值分析。结果 (1)在一个正方形平面区域内有10个轴突以相等的间距围成圆形,当中心有1个靶细胞时,轴突生长路径的数值模拟结果与前人所做的有关结果一致;(2)轴突的初始位置同(1),当中央有4个两两上下并排分布的靶细胞时,数值模拟结果很好地反映了轴突生长时的趋化性;(3)在区域的近上、下边界分别有一串靶细胞和一串轴突时,数值模拟结果较好地反映了轴突结集生长时的成束和解束现象。结论本文给出的数学模型和数值主法能够较好地模拟有关实验所观测到的主要现象。     

Clustering the adhesion molecules VLA-4 (CD49d/CD29) in Jurkat T cells or VCAM-1 (CD106) in endothelial (ECV 304) cells activates the phosphoinositide pathway and triggers Ca2+ mobilization

Ligation of very late antigen (VLA)-4 (α₄β₁ integrin) with a cross-linked anti-α₄ subunit monoclonal antibody (mAb) triggered a biphasic Ca²⁺ response in Jurkat cell populations and in peripheral human lymphocytes. Cross-linking vascular cell adhesion molecule (VCAM)-1 (the counter-receptor of VLA-4) in ECV 304 endothelial cells generated a biphasic Ca²⁺ response. Tumor necrosis factor-α-primed human umbilical cord vascular endothelial cells also responded to the cross-linked mAb with a biphasic Ca²⁺ profile. Ligated VLA-4 (Jurkat cells) or VCAM-1 (ECV 304) stimulated the production of myo-inositol 1,4,5-trisphosphate. ECV 304 cells induced a biphasic Ca²⁺ response in Fura2-loaded Jurkat cells, whereas a transient response was observed when Jurkat cells were added to Fura2-loaded ECV 304 cells. The Ca²⁺ responses in these experiments involved VLA-4/VCAM-1 interactions since they were significantly reduced (～ 80%) by prior treatment of the target cells with the relevant noncross-linked mAb. Close contact between the cells triggered mutual Ca²⁺ signaling as shown by spectrofluorimetric and confocal microscopy time-dependent recordings. Fibronectin and its CS-1 fragment (V25) triggered a sustained Ca²⁺ response in Jurkat cells (confocal microscopy). Our results suggest that the VLA-4 and VCAM-1 adhesion molecules can transduce a signal that involves activation of the phosphoinositide pathway and the mobilization of Ca²⁺.