丹参酮ⅡA预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠神经保护作用及GFAP表达的影响

目的探讨丹参酮ⅡA预处理对局灶性脑缺血的保护作用及其作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为4组：生理盐水＋大脑中动脉梗死组（NS＋MCAO组）、丹参酮ⅡA预处理组、假手术组和空白组。采用ZeaLonga线栓法造大脑中动脉梗死模型,观察各组组织病理学改变,测定胶质细胞酸性蛋白（GFAP）的表达水平。结果丹参酮ⅡA预处理能减轻局灶性脑缺血模型大鼠的神经损伤,丹参酮ⅡA预处理组GFAP表达程度较NS＋MCAO组高（P〈0.05）。结论丹参酮ⅡA预处理能够促进缺血后星型胶质细胞活化增殖,减轻缺血性脑损伤。     

丹参酮ⅡA对Lewis肺癌小鼠Bcl-2及Bax表达的影响

目的通过研究丹参酮ⅡA（TanⅡA）对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织Bcl-2及Bax的影响,探讨TanⅡA抗肿瘤机制。方法建立Lewis肺癌小鼠模型,将动物随机分为生理盐水（NS）组、TanⅡA组、TanⅡA＋环磷酰胺（CTX）组和CTX组共四组。腹腔连续注射给药。10d后计算各组的抑瘤率。用免疫组化方法测定Bcl-2及Bax表达水平。所有数据用SPSS13.0处理。结果各用药组对Lewis肺癌小鼠肿瘤均有不同程度的抑制作用：TanⅡA＋CTX组抑瘤率最高。盐水组、TanⅡA组、TanⅡA＋CTX组、CTX组各组Bcl-2阳性表达率分别为（59.83±3.38）%、（45.89±5.31）%、（25.26±4.09）%和（30.93±4.13）%。各组Bax阳性表达率分别为（31.96±8.50）%、（39.66±3.81）%、（52.24±5.25）%和（46.58±4.10）%。各项指标以TanⅡA＋CTX组效果最好。结论 TanⅡA通过上调Bax、下调Bcl-2的表达诱导肿瘤细胞凋亡来抑制肿瘤生长,与环磷酰胺有协同作用。     

丹参酮ⅡA抗肿瘤作用的研究进展

丹参酮ⅡA(TanⅡA)是唇形科鼠尾草属植物丹参的主要有效成分,具有抗炎、抗氧化作用,目前主要用于治疗心血管疾病。TanⅡA对多种肿瘤细胞有直接杀伤作用,并可诱导肿瘤细胞分化和凋亡,抑制肿瘤细胞的侵袭和转移,因此TanⅡA作为抗肿瘤药物具有较好的临床应用前景。其抗肿瘤作用机制与抑制DNA合成、抑制端粒酶活性、影响凋亡相关基因、干扰有丝分裂相关蛋白、改变肿瘤细胞表面蛋白的表达等因素有关。     

丹参酮ⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3增殖与凋亡的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制和诱导凋亡作用及其可能机制。方法:培养人卵巢癌细胞SKOV3,经TanⅡA作用后,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定丹参酮ⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3的增殖抑制作用;流式细胞术检测细胞周期;RT-PCR检测Survivin与Smac/DIABLO mRNA表达水平;免疫荧光细胞化学检测Survivin蛋白及Smac/DIABLO蛋白的表达。结果:1.0～10.0μg/ml TanⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3具有生长抑制作用,并具有时间-剂量依赖性。实验组较对照组G1/G2期细胞数量增多,而S期细胞数量减少(P<0.05)。随着TanⅡA干预浓度的增加和作用时间的延长,Survivin mRNA的表达受到明显抑制(P<0.05),而Smac/DIABLO mRNA的表达明显上调(P<0.05)。Survivin蛋白及Smac/DIABLO蛋白均表达于SKOV3细胞,其表达多定位于细胞质中,偶见于细胞核。结论:TanⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3具有生长抑制和诱导凋亡作用,其作用机制可能是通过抑制人卵巢癌细胞SKOV3 Survivin和促进Smac/DIABLO的表达而实现的。     

丹参酮ⅡA对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响

目的探索丹参酮ⅡA对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡和周期的影响。方法培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞株,按照丹参酮ⅡA浓度的不同将实验分为5组,A组为空白对照组(0μg/m L),B组为溶剂对照组(0.25%DMSO),C组为低浓度组(1μg/mL),D组为中浓度组(5μg/mL),E组为高浓度组(25μg/mL)。通过处理不同时间(24 h、48 h、72 h)后,观察各组细胞的生长状态及形态学变化;采用CCK 8法检测各组细胞的体外增殖情况;采用Flow Cytometry法检测细胞的凋亡率和周期分布情况。结果随着丹参酮药物浓度和作用时间的增加,细胞数量逐渐减少、贴壁性变差、细胞碎片及漂浮细胞增多。Ishikawa细胞的增殖率逐渐下降,Ishikawa细胞的凋亡率和G 2/M期细胞百分比增加,呈时间浓度依赖性增加。结论丹参酮ⅡA可以抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖,促进其凋亡,并可诱导其发生G 2/M期阻滞。     

丹参酮ⅡA定向诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究

目的:丹参酮ⅡA体外定向诱导成人骨髓间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞。方法:采用Ficoll-Paque液离心和贴壁法分离成人MSC,体外扩增,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达,FGF-2对MSC增殖和分化的影响。采用含丹参酮ⅡA的无血清达乐伯克改良必需基本培养基(DMEM)诱导MSC分化为神经元样细胞,免疫组化鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、巢蛋白(nestin)的表达。结果:成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得0.5×10⁶,15代可获得(2-3)×10¹²个细胞,流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD90、CD105、CD166表达阳性,CD11a、CD14、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性。FGF-2促进hMSC生长,并且对MSC的分化能力基本没有影响。丹参酮ⅡA诱导后,MSC胞体收缩,突起伸出;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF-M、nestin表达阳性,GFAP阴性。结论:丹参酮ⅡA可以在体外诱导成人骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。     

高效液相色谱法同时测定市售醒酒护肝产品中9种天然功效成分的方法建立

目的 利用高效液相色谱法同时检测市售醒酒护肝产品中9种天然功效成分（葛根素、槲皮素、水飞蓟宾、五味子醇甲、姜黄素、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA）。方法 样品经体积分数为90%的乙醇超声提取,10 000 r/min离心10 min,取上清液进样,经C18柱用甲醇-水（用H3PO4调pH为2.5）进行梯度洗脱,柱温20℃,流速为0.8 mL/min。色谱峰保留时间定性,外标标准曲线法定量。 结果 在优化的条件下,9种组分在各自的线性范围内相关系数（ r）≥0.998,检出限和定量限分别为0.38～0.73 mg/kg〔信噪比（S/N）=3〕和1.27～2.43 mg/kg（S/N=10）,加标回收率为88.9%～103.2%,加标样品的相对标准偏差为1.3%～3.7%。结论 [本研究成功建立市售保健品中多类醒酒护肝功效成分的高效液相色谱同时测定方法,能够满足市售醒酒护肝产品的常规分析和质量评价要求。     

Tanshinone IIA prevents LPS-induced inflammatory responses in mice via inactivation of succinate dehydrogenase in macrophages

Metabolic reprogramming is associated with NLRP3 inflammasome activation in activated macrophages, contributing to inflammatory responses. Tanshinone IIA (Tan-IIA) is a major constituent from Salvia miltiorrhiza Bunge, which exhibits anti-inflammatory activity. In this study, we investigated the effects of Tan-IIA on inflammation in macrophages in focus on its regulation of metabolism and redox state. In lipopolysaccharides (LPS)-stimulated mouse bone marrow-derived macrophages (BMDMs), Tan-IIA (10 μM) significantly decreased succinate-boosted IL-1β and IL-6 production, accompanied by upregulation of IL-1RA and IL-10 release via inhibiting succinate dehydrogenase (SDH). Tan-IIA concentration dependently inhibited SDH activity with an estimated IC₅₀ of 4.47 μM in LPS-activated BMDMs. Tan-IIA decreased succinate accumulation, suppressed mitochondrial reactive oxygen species production, thus preventing hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) induction. Consequently, Tan-IIA reduced glycolysis and protected the activity of Sirtuin2 (Sirt2), an NAD⁺-dependent protein deacetylase, by raising the ratio of NAD⁺/NADH in activated macrophages. The acetylation of α-tubulin was required for the assembly of NLRP3 inflammasome; Tan-IIA increased the binding of Sirt2 to α-tubulin, and thus reduced the acetylation of α-tubulin, thus impairing this process. Sirt2 knockdown or application of Sirt2 inhibitor AGK-2 (10 μM) neutralized the effects of Tan-IIA, suggesting that Tan-IIA inactivated NLRP3 inflammasome in a manner dependent on Sirt2 regulation. The anti-inflammatory effects of Tan-IIA were observed in mice subjected to LPS challenge: pre-administration of Tan-IIA (20 mg/kg, ip) significantly attenuated LPS-induced acute inflammatory responses, characterized by elevated IL-1β but reduced IL-10 levels in serum. The peritoneal macrophages isolated from the mice displayed similar metabolic regulation. In conclusion, Tan-IIA reduces HIF-1α induction via SDH inactivation, and preserves Sirt2 activity via downregulation of glycolysis, contributing to suppression of NLRP3 inflammasome activation. This study provides a new insight into the anti-inflammatory action of Tan-IIA from the respect of metabolic and redox regulation.     

不同发汗条件对发汗丹参中丹参酮类含量的影响

目的 探究不同发汗条件对发汗丹参中丹参酮类含量的影响,筛选丹参的发汗条件。方法 以发汗堆积量(A)、发汗环境温度(B)、发汗时间(C)3个条件因素水平,采用正交设计方法对同一批次丹参鲜品进行发汗处理,采用高效液相色谱法对发汗丹参中丹参酮类（丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ）的含量进行测定。结果 不同的发汗条件因素对发汗丹参中丹参酮类的含量有显著影响,不同发汗条件因素对丹参酮类的影响依次为发汗环境温度(B)、堆积量(A)、发汗时间(C)。结论 丹参酮类的含量受不同的发汗条件影响显著,为制定丹参药材产地初加工技术标准及其标准操作流程提供实验基础和参考依据。