干扰素治疗病毒性肝炎的分子机理及展望

干扰素是目前临床治疗病毒性肝炎的首选药物。其抗病毒作用的分子机理是:首先与效应细胞膜干扰素受体结合,激活胞膜和胞浆中的蛋白激酶,使胞浆中干扰素刺激基因结合因子α亚基磷酸化,磷酸化的干扰素刺激基因结合因子α亚基与γ亚基进入细胞核内,与效应细胞基因的干扰素刺激反应元件结合并激活该元件,启动效应细胞大量转录、翻译合成干扰素抗病毒效应分子,如2′-5′AS、起始因子蛋白激酶及Mx蛋白等,阻断病毒mRNA转录、阻止病毒蛋白合成及抑制病毒复制,发挥抗病毒生物活性。干扰素抗病毒基因治疗研究已取得一定进展,并展现出良好前景。     

神经干细胞与脑肿瘤基因治疗

基因治疗是脑肿瘤治疗的重要辅助手段,但由于肿瘤细胞常常浸润到周围正常脑组织,使得脑肿瘤治疗难以彻底。随着对神经干细胞的深入研究,发现神经干细胞能够迁移追踪肿瘤细胞,并具有多潜能分化、免疫原性低等诸多优点。此外,在动物实验中发现,神经干细胞能整合于宿主细胞,长期、稳定表达外源性基因。因此,神经干细胞是脑肿瘤基因治疗的理想载体。     

神经生长因子基因转染联合强化铁营养防治豚鼠爆震性聋的实验研究

Objective To study the protective effects of adenovirus-mediated human beta-nerve growth factor gene (hNGFβ) transfer combined with iron fortified nutrition on blast hearing damage in guinea pigs. Methods Deafness was induced by blast (172dB SPL) in 35 healthy guinea pigs. Seven days after noise exposure, 10 guinea pigs were inoculated with adenovirus-mediated hNGFβ (Ad-hNGFβ) into the perilymphatic space (the gene group), another 10 guinea pigs were given hNGFβ combined with iron fortified nutritional diet (the combination group), still another 10 guinea pigs were inoculated with artificial perilymphatic fluid (APF), and 5 guinea pigs served as control, given neither medicine nor noise exposure. Auditory brainstem response (ABR) threshold shifts were monitored in the guinea pigs before blast exposure and after gene transfer. Changes in cochlear morphology were examined with immunohistochemical and HE staining. Results One week after successful inoculation of hNGFβ, it was noted that Ad-hNGFβ protein was expressed in each turn of the cochlea, and its intensity was almost equal. After gene transfer in the combination group and the gene group, ABR threshold shifts at week 1 and 4 were significantly smaller than those of the APF group. HE staining showed that the number of the spiral ganglion cells in the combination group and the Ad-hNGFβ group was significantly higher than that of the control group after 4 weeks (P<0.01). Conclusions Ad-hNGFβ combined with iron fortified nutritional diet was effective in the prevention and treatment of blast hearing damage of cochlear hair cells.     

基因治疗在肝脏移植中的应用

基因治疗已成为目前在分子水平治疗疾病的手段 ,在基础与临床方面研究都取得了较大进展。移植中应用基因治疗有许多优越性 ,现阶段基因治疗应用于动物肝脏移植的实验研究已证明具有其可行性。基因治疗可以针对某个特异的移植器官 ,达到局部免疫抑制的效果 ,而且活体内基因转导可以产生持续的生物调控基因产物的长期表达[1 ] 。另外 ,基因治疗能在低温下进行 ,不影响离体肝的功能。一、肝脏移植基因治疗的转移方法1.间接法 :将目的基因在体外转导至原代培养的靶细胞如肝细胞或心肌细胞 ,然后将已发生结构改变的靶细胞再转入组织或器官如肝脏…     

基因疗法的展望

综述近年基因疗法中主要的两种治疗方法，即反义寡核苷酸疗法及ＤＮＡ免疫疗法或ＤＮＡ疫苗。二者目前虽未达到临床实用阶段，实验研究已经表明今后对乙型、丙型病毒性肝炎以及原发性肝癌的治疗会产生根本性改变，大力研究上述两种疗法以使病毒及肿瘤疾患的治疗达到一个全新的境界实为当务之急。     

阳离子脂质体介导rhBMP-2基因转染兔骨髓基质干细胞体外分化成骨活性的实验

目的:探讨阳离子脂质体介导的重组人骨形态发生蛋白(Adv-rhBMP-2)基因对兔骨髓基质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MMSCs)体外成骨活性的影响。方法:2002-05/07在解放军总医院骨科研究所完成。脂质体介导的基因转染和检测方法:pEGFP-rhBMP-2的扩增、浓度及纯度鉴定。①脂质体包裹质粒DNA,转染MMSCs后测定转染率。②检测rhBMP-2,碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原的表达。结果:脂质体介导的基因转染后的检测结果:①脂质体介导pEGFP-rhBMP-2转染MMSCs后所测定的最大转染率为14.18%。②pEGFP-rhBMP-2转染的MMSCs中rhBMP-2,ALP和Ⅰ型胶原的表达呈阳性,而pEGFP转染的细胞和未染细胞rhBMP-2,ALP和Ⅰ型胶原的表达弱阳性。结论:①MMSCs是一种较理想的骨组织工程种子细胞。②脂质体介导质粒rhBMP-2的基因转移安全性好,但转染率相对较低,随着新一代高转染率脂质体的问世,这种治疗方法有望率先进入临床。     

核酶技术的研究进展

核酶是一类具有酶活性剂ＲＮＡ分子，可序列特异性定点切割靶ＲＮＡ，从而在发子水平和细胞水平真正实现对失控基因或有害其因表达的粗效阻断，本文对目前发现的几种核酶，特别是锤头状核酶及发夹状核酶的研究进展进行了简要介绍。     

在鼠中经体内转导肝祖细胞可作为基因治疗的平台

以异体产生的干细胞为基础的移植可能受限于类似传统器官移植的异体移植排斥反应，避免这种排斥反应的途径就是利用自身干细胞，但这可能会带来原有疾病复发的危险，尤其是在存在基因缺陷的背景下。