卵巢癌的p53基因治疗实验研究——人野生型p53基因真核细胞表达质粒的构建

目的 :本实验构建了人野生型 p53基因与真核表达载体 pc DNA3的重组体 ,为进行卵巢癌基因治疗研究打下基础。方法 :利用分子生物学基因克隆技术从质粒 p GEX-p53中用双酶切下目的片段 ,挤压法回收与 pc DNA3构成重组体。结果 :成功的构建了人野生型 p53基因真核细胞表达质粒。结论 :带有两个不同的酶切位点的目的片段定向克隆的方法使重组体的构建高效简便 ,挤压法回收目的片段经济有效。     

逆转录病毒载体PLIL-2SN转导人CD3AK细胞方法的建立

目的 :探讨CD3AK细胞在基因治疗中的应用 ,并对逆转录病毒载体转导CD3AK细胞IL 2基因的方法进行研究。方法 :利用逆转录病毒载体PLIL 2SN向人CD3AK细胞中导入IL 2基因。结果 :从转导细胞中RT PCR扩增出 347bpNeoR 基因特异性片段 ,并测出培养上清液中IL 2浓度为 3 .2 76 μg·L-1。结论 :转导的IL 2基因得到表达 ,转导成功。这有助于进一步研究转导后淋巴细胞的功能 ,以开展基因免疫治疗的研究     

不同转移潜能人前列腺癌细胞中KAI1基因的表达

目的:探讨人前列腺癌细胞转移潜能与KAI1基因表达的关系.方法:运用Northern印迹杂交检测KAI1基因在不同转移潜能人前列腺癌细胞中的表达,以甲基化分析和聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)研究KAI1低表达的机制.结果:在转移性人前列腺癌细胞系PC3和PC3M中不论其转移潜能强弱,KAI1 mRNA表达均降低.甲基化分析未发现KAI1基因5'-启动子部位CCm5CGGG甲基化.PCR-SSCP分析显示:KAI1基因第7外显子在PC3和PC3M均显示异常带,PC3M较弱.结论:KAI1基因表达降低与人前列腺癌的转移有关,但其转移潜能的强弱可能不取决于KAI1的调控.KAI1基因的低表达与5'-启动子部位CCm5CGGG甲基化无关,可能与该基因的突变失活有关.     

腺病毒介导RA538基因转移及其诱导肿瘤细胞凋亡的研究

ＲＡ５３８是从维甲酸诱导终末分化的人食管癌细胞系中分离出的一个与分化相关的基因。通过重组体腺病毒将ＲＡ５３８基因成功地转导到人肺腺癌细胞系（ＧＬＣ－８２）中,经Ｘ－ｇａｌ染色证实转导效率达１００％（ＭＯＩ为２５）,转录ＲＡ５３８基因后的ＧＬＣ－８２肿瘤细胞生长受到明显的抑制,抑制率为７７．２％。经流式细胞计数（ＦＣＭ）及ＴＵＮＥＬ检测证实ＲＡ５３８可诱导肿瘤细胞发生凋亡,凋亡率为５９．４％。利用Ｗ     

胃十二指肠疾病患者感染幽门螺杆菌的cagA基因和血清CagA抗体状况

目的 :探讨幽门螺杆菌cagA基因和血清CagA抗体与胃十二指肠疾病的关系。方法 :用聚合酶链反应方法测定 62株由慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者感染HpcagA基因 ;用酶免疫方法测定同一患者血清CagA抗体。结果 :HpcagA基因阳性率为 5 6.45 %。慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者感染HpcagA基因阳性率分别为 5 5 .5 6%、5 4.17%和 63 .64 % ,三种疾病患者之间感染Hp的cagA基因阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者血清CagA抗体阳性率分别为 70 .3 7%、79.17%和 40 .0 0 % ,血清CagA抗体总阳性率为 68.85 %。慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者之间血清CagA抗体阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :HpcagA基因和血清CagA抗体与Hp感染个体发生的不同类型胃十二指肠疾病之间无关联     

视网膜母细胞瘤中Fas和bcl-2的表达及意义

目的　探讨Fas及bcl 2在视网膜母细胞瘤的表达及意义。方法　用免疫组织化学SP方法检测了 45例视网膜母细胞瘤及 12例正常视网膜组织中Fas及bcl 2蛋白的表达 ,并进行比较。结果　Fas在视网膜母细胞瘤组织及正常视网膜组织的表达分别为 0 .2 5 5± 0 .441,0 .0 83± 0 .2 89,两者比较差异无显著性 (P =0 .114 8) ,均呈低表达 ;bcl 2在视网膜母细胞瘤中的表达为2 .70 2± 1.0 82 ,与正常视网膜组织中 0 .16 7± 0 .389相比差异具非常显著性 (P <0 .0 0 0 1)。结论　Fas在视网膜母细胞瘤及正常视网膜中均呈低表达 ;而bcl 2在视网膜母细胞瘤中呈明显高表达 ,其可明显抑制凋亡的发生 ,与肿瘤的发展关系密切。     

靶序列三链DNA对质粒pBR322的Amp^r基因表达的抑制

利用ＣａＣｌ２法成功地将寡核苷酸导入大肠杆菌ＪＭ１０９细胞。质粒ｐＢＲ３２２转化结果表明,寡革酸片段５’－ＡＧＣＧＧＧＡＡＴＡＡＧＧＧＡＡ－３’在转化前（或后）与靶序列结合均能抑制β－内酰胺酶基因的表达,细菌生长受到抑制。体外聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,该片段能与靶序列形成三链结构。这些结果表明多聚嘌呤寡核苷酸是通过与靶序列形成三链ＤＮＡ来抑制β－内酰胺酶基因的表达。     

Study on P16 gene in acute leukemia

P1 6gene is located in human chromosome9P2 1 ,the function of which is to suppresscancer.Itencodes 1 6 ku molecular weight nuclear phosphateprotein,regulates activity of cyclin- dependent kinaseK( CDK4) ,controlscellulartransition from G1phaseto Sphae and cellular proliferation.P1 6gene isasso-ciated with the development,progression and malig-nant changes of many,tumors[1] .In this study weexamined changes of P1 6gene expression in acuteleukemia.1　MATERIALSAND METHODS1 .1　 Samples…     

The Effect of different interventional treatment on P-Glycoprotein in different histopathological types and grades of primary hepatocellular carcinoma

Primary hepatocellular carcinoma( PHC) isvery common in China and chemotherapy has beenone of the classic and important methods for treatingPHC. Transcatheter arterial chemoembolization( TACE) has been one of main non- surgicaltherapiesfor PHC. The intrinsic or acquired multidrug resis-tance( MDR) has been an important problem inchemotherapy for PHC,because MDR tend to resultin cancer cells of PHC either failing to respond tochemotherapy or relapsing quickly after remission.Some stud…     

Clinical Study on Influence of Buyang Huanwu Decoction (补阳还五汤) on the Metabolic Imbalance of Endothelin and Calcitonin Gene Related Peptide in Patients with Early Cerebral Infarction

ＦｒｏｍＭａｙ1995ｔｏＭａｙ1997,ＢｕｙａｎｇＨｕａｎｗｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎ（补阳还五汤,ＢＨＤ）ｗａｓｕｓｅｄｂｙｔｈｅａｕｔｈｏｒｓｉｎｔｒｅａｔｉｎｇｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｔｏｅｘｐｌｏｒｅｉｔｓｅｆｆｅｃｔｏｎｍｅｔａｂｏｌｉｃｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅｏｆｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ（ＥＴ）ａｎｄｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅｒｅｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅ（ＣＧＲＰ）．Ａｎｏｔｈｅｒｇｒｏｕｐｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｗｅｓｔｅｒｎｍｅｄｉ…