SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体基因沉默对CaM、CaMKⅡ蛋白水平的影响

目的构建稳定的α7 n AChR沉默的神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞,研究α7神经型尼古丁受体(n AChR)基因沉默对钙调蛋白(Ca M)、钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)水平的影响,了解α7 n AChR神经保护作用及其与阿尔茨海默病(AD)发病机制的关系。方法将α7 n AChR shRNA重组质转染到SH-SY5Y,用含嘌呤霉素的培养液筛选,挑选阳性克隆后采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方法(Western-blot)检测细胞中α7n AChR mRNA及蛋白表达水平的变化;Western-blot方法测定Ca M、Ca MKⅡ蛋白表达水平。结果获得稳定转染α7 n AChR shRNA重组质粒的细胞克隆株,与对照组相比,α7 n AChR mRNA及蛋白表达量分别减少了95%和80%。Ca M、Ca MKⅡ蛋白表达量分别减少了48.5%和35%。结论成功构建了α7 n AChR mRNA沉默的SH-SY5Y细胞细胞株,α7 n AChR沉默降低了Ca M、Ca MKⅡ的蛋白水平,可能影响信号通路转导,这可能与阿尔茨海默病(AD)的发病有一定的关系。     

Ⅱ型排卵障碍女性使用克罗米芬或来曲唑诱导排卵的AID临床结局及妊娠结局比较

目的比较Ⅱ型排卵障碍女性使用克罗米芬(CC)方案或来曲唑(LE)方案诱导排卵后供精人工授精(AID)周期的临床结局和妊娠结局。方法回顾性分析2012年1月至2019年8月578名Ⅱ型排卵障碍妇女在我中心完成的1253个AID周期的超声监测数据及临床资料。比较单用CC或LE或联合促性腺激素(Gn)诱导排卵的AID周期的参数和临床结局。采用单因素和多因素Logistic回归分析,探讨诱导排卵方案与宫内妊娠和活产的关系。比较CC及LE方案的妊娠结局和新生儿出生状况。结果总体上4种方案的宫内妊娠率和活产率无显著差异(P>0.05);校正混杂因素后,与单用CC相比,CC联合Gn及LE联合Gn均显著促进宫内妊娠(分别为OR=1.641,P=0.024;OR=1.543,P=0.019)和活产(分别为OR=1.589,P=0.047;OR=1.508,P=0.034),而单用LE与单用CC相比均无显著差异(P>0.05);各种妊娠结局的发生率及新生儿出生状况在CC及LE方案之间均无显著差异(P>0.05)。结论在宫内妊娠和活产方面,无论单用还是与Gn联用,LE与CC疗效相当,且联用Gn优于单用;LE和CC方案的妊娠结局及新生儿出生状况基本可比。     

长效硝酸酯对心力衰竭大鼠心脏血管紧张素Ⅱ受体表达水平的影响

目的:探讨长效硝酸酯(异乐定)对心肌梗死后慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能、血浆肾素活性(plasma renin activity,PRA)和血管紧张素II(Angiotensin II,Ang II)水平以及非梗死区左心室组织血管紧张素II受体(Angiotensin II receptor,ATR)各亚型表达水平的影响。方法:选用雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组(N组)、假手术组(SH组),结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死后心力衰竭模型,分为心力衰竭模型组(HF组)、硝酸酯小剂量组(LN组)、硝酸酯大剂量组(HN组)、阳性药物对照组(奥美沙坦酯,OL组)及硝酸酯大剂量联合阳性药物组(HN+OL组),灌胃法给药6周。超声心动图检测用药前后心功能,放射免疫法检测血浆PRA、Ang II水平,RT-PCR和Western blot检测各组心肌AT1R及AT2R的表达水平。结果:1用药后,与HF组相比,HN组、OL组和HN+OL组左心室射血分数(LVEF)显著升高(P<0.05);与OL组相比,HN+OL组LVEF显著升高(P<0.05)。2与SH组相比,HF组PRA、Ang II水平显著升高(P<0.01),AT2R表达水平明显上调(P<0.05),AT1R表达水平明显下调(P<0.05);与HF组相比,HN、OL和HN+OL组PRA、Ang II水平均显著下降(P<0.05、P<0.01),AT2R表达明显下调(P<0.05),AT1R表达明显上调(P<0.05);与OL组相比,HN+OL组AT1R显著上调,AT2R显著下调(P<0.05)。结论:应用长效硝酸酯能降低CHF循环中PRA、Ang II水平,同时使CHF心脏AT1R、AT2R的表达水平反向调节趋于正常,并提高LVEF,显著改善了心功能。大剂量硝酸酯的疗效明显优于小剂量,并可协同奥美沙坦改善心功能。     

林洁从“阳化气,阴成形”论治多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的卵泡发育异常与"阳化气,阴成形"功能失衡密切相关。在PCOS患者的月经周期变化中,"阳化气"与"阴成形"的功能失调常见两种阴阳失衡表现。其一是"阴成形"不足,"阳化气"相对过盛;其二是"阴成形"太过,"阳化气"乏力。林洁教授将PCOS患者从胖、瘦两种体型辨证施治,瘦型PCOS患者的发病之本为"阳化气"太过,其标为"阴成形"不足,多辨为心肝火旺证,采用以丹栀逍遥散为基础方化裁的多囊Ⅰ号方治疗;胖型PCOS患者发病之本为"阳化气"乏力,其标为"阴成形"太过,采用以导痰汤为基础化裁的多囊Ⅱ号方治疗。另外,属患者养成健康的饮食习惯和良好的生活习惯,选择适合的运动方式,病情严重者进行必要的心理疏导。     

伴颞下颌关节紊乱病安氏Ⅱ类1分类错患者咀嚼运动中髁突轨迹分析

目的: 探讨伴颞下颌关节紊乱病（temporomandibular disorders,TMD）的安氏Ⅱ类1分类（Ⅱ¹）错患者咀嚼运动中髁突轨迹特征,进一步分析TMD和安氏Ⅱ¹错因素对咀嚼运动中髁突轨迹的影响。方法: 按照实验纳入标准分别收集无TMD的正常组（nTMD-N）10例、无TMD的安氏Ⅱ¹组（nTMD-Ⅱ¹）10例、伴TMD的安氏Ⅱ¹组（TMD-Ⅱ¹）14例患者。采用Cadiax Ⅳ 记录3组实验对象咀嚼运动时的髁突轨迹,利用GDSW软件测量并分析咀嚼运动轨迹的各项数据指标。采用SPSS 26.0软件包对所得结果进行统计学分析。结果: nTMD-Ⅱ¹组和TMD-Ⅱ¹组的咀嚼运动轨迹特征与nTMD-N组相比有所差异。左侧或右侧单侧咀嚼运动时,nTMD-N组、nTMD-Ⅱ¹组和TMD-Ⅱ¹组的各项数据无统计学差异。双侧咀嚼运动时,nTMD-Ⅱ¹组的SCI值显著大于nTMD-N组,nTMD-N组的S值显著大于nTMD-Ⅱ¹组（P<0.05)。结论: 单侧咀嚼运动时,TMD和安氏Ⅱ¹错因素对咀嚼运动轨迹影响较小。安氏Ⅱ¹类错因素对双侧咀嚼运动有影响,Ⅱ¹患者正常咀嚼时髁突整体运动幅度较正常者小。双侧咀嚼运动时,TMD对Ⅱ¹类患者咀嚼运动轨迹无明显影响。     

短时间高氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体活性氧产生及相关通路的影响

目的探讨短时间高氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）线粒体Ca²⁺ /烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）/沉默信息调节因子3（SIRT3）/超氧化物歧化酶2（SOD2）通路及活性氧的影响。 方法将RLE-6TN细胞株细胞分为对照组、高氧组及线粒体钙通道拮抗剂组（拮抗剂组）。对照组细胞置于常规细胞培养箱中，高氧组细胞置于氧浓度为90%的培养箱中，拮抗剂组细胞加入钌红（2 μmol / L）后置于氧浓度为90%的培养箱中，各组均持续培养4 h。随后，对各组细胞线粒体内Ca²⁺、活性氧、NAD⁺、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）含量进行检测，并计算NAD⁺ / NADH比值；同时，采用实时荧光定量PCR检测SIRT3和SOD2信使RNA（mRNA）水平。 结果各组间细胞线粒体内Ca²⁺、活性氧、NAD⁺、NADH、NAD⁺ / NADH比值及SIRT3 mRNA、SOD2 mRNA表达水平的比较，差异均有统计学意义（F = 183.500、135.900、32.140、51.520、128.300、59.970、45.020，P均< 0.001）。且与对照组及拮抗剂组比较，高氧组细胞线粒体内Ca²⁺[（19.5 ± 0.8）、（17.2 ± 0.7）、（24.3 ± 0.3）nmol / L]、活性氧[（491 ± 9）、（480 ± 5）、（530 ± 6）相对荧光单位]及NADH[（0.85 ± 0.03）、（0.87 ± 0.04）、（1.06 ± 0.06）nmol / 10⁴ cells]含量均明显升高，而NAD⁺含量[（3.30 ± 0.12）、（3.24 ± 0.14）、（2.58 ± 0.29）nmol / 10⁴ cells]、NAD⁺ / NADH比值[（3.89 ± 0.15）、（3.71 ± 0.15）、（2.44 ± 0.27）]、SIRT3 mRNA[（1.01 ± 0.11）、（0.96 ± 0.08）、（0.45 ± 0.09）]及SOD2 mRNA[（1.01 ± 0.14）、（1.05 ± 0.11）、（0.48 ± 0.10）]表达水平均显著降低（P均< 0.05）。 结论短时间高氧可通过AECⅡ线粒体内Ca²⁺ / NAD⁺ / SIRT3 / SOD2通路导致活性氧蓄积。     

天麻钩藤饮加减对妊娠期高血压疾病患者RSS系统的影响

目的观察天麻钩藤饮加减对妊娠期高血压疾病(HDCP)患者RSS系统的影响。方法将160例HDCP患者随机分为治疗组和对照组各80例。对照组给予硫酸镁注射液静脉滴注;治疗组在硫酸镁注射液治疗基础上加用天麻钩藤饮加减治疗。于两组治疗前和治疗72 h后比较血压、24 h尿蛋白定量及血清肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平变化。结果两组治疗后收缩压和舒张压与治疗前比较均明显下降,差异均有统计学意义(P0.01)。治疗后,治疗组收缩压和舒张压显著优于对照组,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.01)。两组治疗后24 h尿蛋白定量与治疗前比较均明显下降,差异均有统计学意义(P0.01)。治疗后,治疗组24 h尿蛋白定量显著优于对照组(P0.01)。治疗后,治疗组血清肾素活性(PRA)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)下降明显(P0.01)。结论在硫酸镁解痉药物治疗基础上应用天麻钩藤饮加减治疗HDCP能够显著改善患者血压和24 h尿蛋白定量,其作用可能与降低血清PRA和AngⅡ水平有关。     

己糖激酶-Ⅱ在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)在人体胃癌组织中的表达情况及其临床意义,分析HK-Ⅱ与临床病理特征之间的关系。方法选取2013年3—9月在东南大学医学院附属江阴医院确诊的胃癌病患100例,切除标本,运用免疫组化及RTPCR方法检测胃癌组织及正常胃黏膜组织中HK-Ⅱ的表达情况,并分析其与性别、年龄、浸润深度、TNM分期、分化程度、淋巴结转移、脉管侵犯、肿瘤大小等的关系。结果 HK-Ⅱ在胃癌组织中的阳性表达率为68.00%,显著高于正常胃黏膜组织(P0.05)。HK-Ⅱ表达与性别、年龄、浸润深度无关(P0.05);与TNM分期、分化程度、淋巴结转移、脉管侵犯、肿瘤大小有关(P0.05)。胃癌组织HK-ⅡmRNA阳性率显著高于正常胃黏膜组织(P0.01)。结论 HK-Ⅱ在胃癌组织中高表达,可作为胃癌的恶性预后指标和临床治疗靶点。     

以手术治疗参与的综合治疗在Ⅱ~ⅢA期小细胞肺癌中的应用效果

目的比较以手术治疗参与的综合治疗、单纯放化疗对Ⅱ~ⅢA期小细胞肺癌患者的效果。方法回顾性分析我院2012年12月至2014年12月收治的50例小细胞肺癌患者的临床资料。根据治疗方式将50例患者分为观察组和对照组,每组25例。观察组采用以手术治疗参与的综合治疗,对照组采用单纯放化疗。比较两组患者的生存率。结果观察组患者的1、2、3及5年生存率分别为80.00%、60.00%、52.00%、32.00%,均高于对照组患者的52.00%、32.00%、24.00%、8.00%(P<0.05)。结论给予Ⅱ~ⅢA期小细胞肺癌患者以手术治疗参与的综合治疗,可以延长患者的生存时间,具有积极的临床价值。     

脑康Ⅱ号对脑缺血大鼠认知功能及神经发生的作用

目的观察中药脑康Ⅱ号对脑缺血大鼠空间学习记忆功能及海马神经发生的影响。方法将54只SD大鼠按随机数字表法分为对照组,假手术组,模型组,脑康Ⅱ号小、中、大剂量组(小、中、大剂量组用药量分别是成人用量的5、10、20倍),每组各9只。采用永久结扎大鼠双侧颈总动脉法造模。对假手术组大鼠只分离双侧颈总动脉,不予结扎;对照组大鼠不予任何处理;造模后给予治疗组脑康Ⅱ号治疗,给予对照组、假手术组和模型组等量(2 ml)等渗盐水。造模后9周采用Morris水迷宫定向航行实验和空间搜索实验评价大鼠学习记忆能力。采用免疫荧光染色法、免疫组化法进行神经干细胞(NSCs)增殖、分化的观察。采用Western Blot检测自噬相关蛋白Beclin-1和LC-3Ⅱ的表达。结果 (1)造模后9周模型组逃避潜伏期第1~5天分别为(100±13)、(98±13)、(82±14)、(72±15)、(46±7)s,较假手术组和对照组明显延长,差异有统计学意义(均P0.05);搜索距离分别为(1239±127)、(1011±122)、(959±123)、(553±66)、(407±29)cm,较假手术组和对照组明显增加(均P0.01);第5天脑康Ⅱ号小、中、大剂量组大鼠逃避潜伏期和搜索距离均较模型组明显缩短(P0.05),逃避潜伏期分别为(20±6)、(19±8)、(15±6)s,搜索距离分别为(234±38)、(297±23)、(199±22)cm。造模后9周模型组大鼠在原平台所在象限搜索时间为(30±9)s,较假手术组明显缩短(P0.01);脑康Ⅱ号小、中、大剂量组在原平台所在象限搜索时间分别为(34±6)、(38±8)、(40±10)s,均较模型组明显延长(P0.01)。(2)造模后9周免疫荧光与免疫组化结果显示,模型组海马齿状回Brd U阳性细胞数、Nestin阳性细胞数多于对照组和假手术组(P0.05);脑康Ⅱ号中、大剂量组Brd U阳性细胞数和Nestin阳性细胞数较模型组明显增多(P0.05)。模型组中LC-3Ⅱ和Beclin-1表达较对照组和假手术组明显升高(P0.01);脑康Ⅱ号中、大剂量组LC-3Ⅱ的表达分别为143±9、129±9,Beclin-1的表达分别为139±10、124±7,明显低于模型组(P0.01)。结论中、大剂量的脑康Ⅱ号能改善脑缺血大鼠的认知功能,促进海马齿状回神经发生,抑制自噬性细胞死亡。