抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其F(ab′)_2与Fab′片段的抗肿瘤作用

目的研究抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其F(ab′)2、Fab′片段对小鼠肝癌22(H22)及小鼠Lewis癌肺转移的治疗作用。方法ELISA实验检测3G11及其片段与多种肿瘤细胞及Ⅳ型胶原酶的免疫反应性,明胶酶谱法测定其对HT-1080细胞分泌Ⅳ型胶原酶活性的影响,MTT法测定其对H22细胞的细胞毒作用。用小鼠肝癌22及小鼠Lewis肺癌模型评价单抗3G11及其片段抑制肿瘤生长及抗肿瘤转移活性。结果单抗3G11及其片段对多种肿瘤细胞及Ⅳ型胶原酶均呈阳性反应,单抗3G11抑制肿瘤细胞HT-1080分泌Ⅳ型胶原酶的活性。单抗3G11对H22细胞有微弱的细胞毒作用。单抗3G1130mg/kg对小鼠移植性肝癌的抑制率为51·8%,F(ab′)210mg/kg为49·9%,Fab′20mg/kg为39·3%。F(ab′)2片段10mg/kg对小鼠Lewis癌肺转移的抑制率为76%。结论抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其片段对小鼠移植性肝癌22生长以及对小鼠Lewis癌肺转移有中度抑制作用,可能用于研制抗体靶向药物。     

通腑活血汤对脑出血大鼠脑组织保护作用的实验研究

目的:探讨通腑活血汤抗脑出血的作用机制。方法:采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血,建立脑出血模型。分假手术组,模型组,脑血康组,通腑活血汤组,各组每天灌胃2次,每次3 mL。观察神经缺损症状的变化及检测脑系数、脑含水量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、一氧化氮(NO)含量。结果:模型组大鼠偏瘫状态明显,脑系数、脑含水量增高,脑组织出现水肿,说明胶原酶诱导的大鼠脑出血模型成功。通腑活血汤组能明显改善实验大鼠的偏瘫程度(P<0.05)及减少脑系数、脑含水量和MDA含量;提高SOD活性和NO含量(P<0.05)。结论:通腑活血汤对于脑出血动物模型上述指标具有明显的改善作用,具有抗脑出血大鼠氧自由基作用。     

臭氧与胶原酶联合治疗腰椎间盘突出症的临床应用价值

目的观察DSA引导下臭氧与胶原酶联合治疗腰椎间盘突出症的临床应用价值。方法56例腰椎间盘突出症患者在DSA监视引导下，经患侧后方穿刺成功后，病变椎间盘注射60μg/mL O3 20～30mL，盘外及神经根周围注入浓度为30μg/mL O3 10-20mL，后经骶管裂孔穿刺置管于硬膜前间隙病变椎间盘处注射600～1200U胶原酶。结果术后随访1个月、3个月，3个月获得最佳疗效，其优、良、中、差率分别为62．3％、32．1％、3．9％、1．7％，优良率94．4％。结论DSA引导下臭氧与胶原酶联合治疗腰椎间盘突出症，在作用机制上优势互补，是一种安全、有效的方法。     

CT介入下突出物内外注射胶原酶治疗非包含型腰椎间盘突出症64例分析

目的：研究CT介入下突出物内外注射胶原酶治疗非包含型腰椎间盘突出症的有效性。方法：64例非包含型腰椎间盘突出症患者，在CT介入下行针内针技术经小关节内侧缘穿刺达突出物内外，分别于突出物内外注射胶原酶200—600u、600—1200u。观察患者术后6天、1月、6月疗效及相关并发症，术后6月以上复查CT行突出物缩小程度评定。结果：术后6天、1月、6月优良率分别为56．2％、85．9％、95．3％。突出物缩小程度：重度：73．1％；中度：19．2％；轻度：7．7％。结论：CT介入下突出物内外注射胶原酶治疗非包含型腰椎间盘突出症疗效好，尤其适合突出较大患者，术后影像改变明显，并发症少。     

胶原酶对腰椎间盘髓核组织中蛋白多糖的影响

【目的】探讨胶原酶在作用时间内是否会引起腰椎间盘髓核组织中蛋白多糖的水解。【方法】经皮腰椎间盘切除术中获得髓核组织标本,-70℃保存。胶原酶15u作用于1mL（0.1g/mL）髓核组织匀浆,测定不同时间段的溶解效应。在胶原酶对髓核组织饱和溶解时间条件下,选择不同剂量的胶原酶作用于1mL（0.1g/mL）髓核组织匀浆,通过测定糖胺多糖的含量变化,推测蛋白多糖的含量变化情况。【结果】本实验的胶原酶对髓核组织饱和溶解时间为12h。胶原酶作用后髓核组织中糖胺多糖在9u胶原酶以内的各组呈独立散在分布,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。9u胶原酶以后组间差异没有统计学意义（P〉0.05）。9u胶原酶时吸光度达到最大值,经与总量对照组比较,糖胺多糖最大水解程度为57.14%～64.76%。【结论】本实验初步证实胶原酶可以在短期内引起腰椎间盘髓核组织中蛋白多糖含量的降低,这可能与胶原酶溶解术后椎间盘退变的加重有关。     

胶原酶在腰间盘突出症中的变化及意义

目的：研究胶原酶在腰间盘突出症中的变化，探讨腰间盘突出症发生的机理。方法：共收集健康成人腰间盘２０例，腰间盘突出症害出髓核３１例，提取并测定其原酶，结果：突出髓核中胶原酶活性低于正常组（Ｐ〈０．０５），突出髓核中胶原含量升高与胶原酶活性降低呈平行关系，结论：骨核胶原酶活性降低与腰间突出症的发生相关。     

组织块培养法及胶原酶消化法分离培养豚鼠耳蜗微血管内皮细胞

目的：建立稳定的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的培养方法。方法：采用显微解剖技术分离出豚鼠耳蜗血管纹,分别用组织块法及酶消化法进行培养及纯化。结果：耳蜗血管纹组织块培养后2天,部分组织块边缘有散在的细胞生长,这些细胞增逐渐增殖形成大片细胞集落;耳蜗血管纹组织经胶原酶消化后1－3天,可观察到培养皿底由一些细胞组成的细胞岛;细胞纯化后大多呈多边形,致密融合时具有内皮细胞培养时典型的“铺路石样”外观,经免疫组化检测其内皮细胞标志性抗原Ⅷ因子,95％以上的培养细胞的胞浆中呈棕黄色阳性反应。结论：组织块法及酶消化法能够获得体外培养的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞。