反相高效液相色谱法测定人血浆中替米沙坦的浓度

替米沙坦是非肽类血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂,通过选择性阻断血管紧张素Ⅱ与多种组织中血管紧张素受体结合,因而阻断血管紧张素Ⅱ引起的血管收缩和醛固酮分泌作用,是一种长效、高效、低毒的新型受体阻滞剂,主要治疗原发性高血压[1,2]。在替米沙坦的药代动力学研究中,常需要测定其在血浆中的浓度。本文采用反相高效液相色谱法,以建立替米沙坦的血药浓度分析方法,为其药代动力学及其相关研究提供一定的实验依据。1仪器与试剂1.1仪器Agilent1100高效液相色谱仪系列(包括四元梯度泵、脱气机、自动进样器、柱温箱和二极管阵列检测器);BS110S型分析…     

运动和灌胃左旋肉碱?大豆肽对肥胖大鼠载脂蛋白的影响

目的:研究有氧运动和灌胃左旋肉碱、大豆肽混合溶液6周对单纯性肥胖大鼠Lee's指数及载脂蛋白的影响.方法:以通过建模成功后的SD肥胖大鼠为研究对象,通过6周跑台训练和每日灌胃10%的营养液[600 mg/(kg·d)左旋肉碱和15 mg/(kg·d)大豆肽],肥胖对照组每只灌胃2 ml/d蒸馏水.观察肥胖大鼠的体重、体长,计算Lee's指数,检测实验大鼠体重、体长、载脂蛋白浓度等指标.结果:实验结束后,单纯运动干预组、单纯营养干预组和运动 营养干预组的Lee's指数明显低于肥胖对照组,两者比较差异均有显著性(P＜0.05),但3个实验组之间无差异(P＞0.05);营养干预、运动干预组、运动 营养干预都明显地降低了apoB的水平(P＜0.05);单纯运动干预和单纯营养干预对肥胖大鼠的apoA影响均没有显著性变化(P＞0.05),而运动 营养干预对肥胖大鼠apoA的影响差异有显著性(P＜0.05).结论:通过8周喂养高脂高糖饲料成功建立了肥胖大鼠模型.运动与营养干预能改善脂质代谢,显著降低肥胖大鼠apoB浓度,升高apoA浓度.     

PPARα/γ双激动剂GCP-02对细胞葡萄糖利用?前脂肪细胞分化和细胞活力的影响

目的:研究PPARα/γ双激动剂GCP-02对细胞葡萄糖利用、前脂肪细胞分化和细胞活力的影响.方法:以罗格列酮为对照,观察GCP-02对HepG2细胞和WB-F344细胞活力的影响,对HepG2细胞葡萄糖转运、葡萄糖消耗以及对3T3-L1细胞脂肪分化的影响.结果:在1×10-5mol/L浓度下,GCP-02降低WB-F344细胞活力,对HepG2细胞活力无影响;在不影响细胞活力浓度下,GCP-02增加HepG2细胞葡萄糖消耗,但不影响其葡萄特转运;GCP-02增加3T3-L1细胞的脂肪生成.结论:GCP-02增加HepG2细胞的葡萄糖消耗,促进3T3-L1前脂肪细胞分化,降低WB-F344细胞活力.     

慢性阻塞性肺疾病中氧化应激的研究

目的:通过测定慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者和正常对照组血清中8-差向前列腺素的水平,探讨COPD患者中氧化应激的水平.方法:20例急性加重期和缓解期的COPD患者、16例吸烟对照和24例不吸烟对照,COPD急性加重期和缓解稳定期、正常对照组分别采集外周静脉血离心,血清中游离8-差向前列腺素的测定采用酶分析法(EIA).结果:COPD患者主要肺功能FEV1%和FEV1/FVC(分别为50.1±17.27和56.2±10.31)与对照组(分别为106.0±20.8和83.4±6.34)比较明显降低,结果差异有统计学意义(P＜0.001)COPD急性加重期血清中游离8-差向前列腺素的浓度(5.42±2.416ng/ml)明显高于稳定期的浓度(3.30±2.267ng/ml),差异有统计学意义(P＜0.01);吸烟对照组COPD稳定期血清中游离8-差向前列腺素的浓度(5.72±2.195ng/ml)高于COPD稳定期(3.30±2.267ng/ml)和不吸烟对照组(4.30±1.964ng/ml)的浓度,结果差异有统计学意义(P＜0.05).COPD血清中游离8-差向前列腺素和FEV1%、FEV1/FVC无显著相关性(r分别为-0.076和-0.046,P＞0.05).结论:在急性加重期的COPD患者和健康吸烟者,存在氧化应激水平的明显升高.COPD患者中氧化应激负荷可能和气流阻塞无相关.     

HPLC测定兔血浆及淋巴组织中的阿霉素

 目的：测定兔血浆及微量淋巴組织中阿霉素的含量，揭示阿霉素脂质体的靶向定位及生物体内的药物代谢 动力学特性。方法：取样量，血浆为0.5ml，淋巴組织为0.1g，加入磷酸盐緩冲液1ml(0.2mol/L，pH7.8)于冰浴 中超声匀浆，以盐酸柔红霉素为内标，采用有机相[氯仿-甲醇（4 ：1)]一步提取，40℃下氮气吹干，残渣用甲醇溶解， 进样75μl色谱条件为YWG-C18柱（150mmΧΦ4.6mm，粒径为10μm);流动相为甲醇-L腈-0.01mol/L磷酸二氢铵-冰醋酸（50：22：28：0.5);流速为1.2ml/min，激发波长为479nm，发射波长为587nm,检測器灵敏度为 H;室温下操作。结果：本方法线性范围：血浆阿霉素为10-1000ng/ml;淋巴组织阿霉素为0.05-5.0μg/g，两者 的线性相关系数r=0.9999(n=6);日内及日间重现性：RSD%在2.10-6.15之间；药物自血浆及淋巴组织的平均 回收率分别为100.11%和100.5%;灵敏度：血浆及淋巴组织中最低检測浓度分别为2ng/ml和0.025μg/g;方法 简便快速，一个样本从提取处理到色谱分离出结果，可在30min内完成。结论：本方法能够簡便、准确地測出兔血浆 及微量淋巴组织中阿霉素的含量，适于淋巴给药后阿霉素生物体内药物代谢动力学的研究。     

电针对大鼠心肌缺血的保护作用及血清游离电解质浓度的影响

目的：为了探讨针刺治病机理,研究了针刺对实验性大鼠心肌缺血及其血清游离电解质浓度的影响。方法：大鼠尾静脉注射垂体后叶素（Pit)造成大鼠实验性心肌缺血,电针大鼠拟“内关”穴,观察治疗效果。结果：电针明显抑制了因注射Pit引起的大鼠心电图S－T段和T波的改变,大鼠心肌缺血时血清钾离子浓度明显升高（P＜0．01）,血清游离钙离子浓度也有升高的趋势,而其他电解质浓度无明显改变。电针明显抑制了因注射Pit引起的血钾和血钙浓度变化,结论：针刺对实验性心肌缺血具有较好的保护作用。     

反相高效液相色谱法测定血清中来氟米特活性代谢物A771726的浓度

 目的：建立反相高效液相测定人血清中来氟米特（leflunomide,Lef）活性代谢物A₇₇₁₇₂₆浓度的方法。方法：采用VP-ODS C₁₈柱,0.01 mmol·L^-1醋酸盐缓冲液(pH4.6)-乙腈(67∶33)为流动相,紫外检测波长为288 nm,流速1.0 mL·min^-1,血清样品用乙酸乙酯提取。结果：A₇₇₁₇₂₆在血清中得到很好的分离,没有明显的干扰峰,出峰时间为6.4 min。线性范围0.39～50 mg·L^-1（r=0.9996）,最低检测限为0.098 mg·L^-1,血清中日内和日间RSD均小于7%,回收率为89.4%～95.3%。结论：本法简便灵敏,符合生物制品分析要求。     

氧浓度对关节软骨细胞体外培养的影响

关节软骨在体内属缺氧组织,且组织内氧浓度水平呈现梯度,表现为软骨组织表层为10%,而至深层则下降到1%,因此采用空气中20%氧浓度对软骨细胞进行体外培养,显然不适宜。通过对关节软骨组织的生物学特性、生存环境以及不同氧浓度下软骨细胞体外培养的实验研究分析,认为5%氧浓度是体外培养关节软骨细胞的适宜浓度,同时在软骨细胞的不同生长时期对培养基氧浓度进行控制,可将软骨细胞处于较好的生长增殖状态。