过表达CHD5基因对肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响

目的:探讨过表达CHD5基因对人肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响。方法:采用脂质体法将CHD5过表达质粒及对照质粒分别转染SMMC-7721细胞,Western blotting检测SMMC-7721细胞中CHD5蛋白的表达情况,CCK-8法检测SMMC-7721细胞生长增殖能力的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:转染CHD5过表达质粒后,SMMC-7721细胞CHD5蛋白表达水平显著增高（P<0.01）,抑制了细胞增殖、迁移和侵袭（P<0.05）,促进了细胞凋亡（P<0.05）。结论:过表达CHD5基因可抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导其凋亡。     

小剂量吉西他滨可促进放疗致人肝癌细胞株SMMC-7721的凋亡

目的观察小剂量吉西他滨(GEM)对放疗诱导的人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的促进作用。方法将体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721分为空白对照、单纯放疗、单纯化疗及放疗加化疗4组,应用MTT法检测不同条件下SMMCC-7721细胞的生长活性;经光学显微镜、透射电镜及荧光显微镜观察各组细胞经GEM作用后凋亡的形态学变化。结果单纯放、化疗都可诱导GEM细胞凋亡,GEM可明显增加放疗诱导的细胞凋亡。结论小剂量GEM可明显增加放疗诱导的SMMC-7721细胞的凋亡。     

抗癌扶正方及含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721生长的抑制作用

目的:探讨抗癌扶正方的抗肝癌作用。方法:提取抗癌扶正方,使用药物及含药血清,针对人肝癌细胞SMMC-7721,经过细胞培养,分光光度计检测抗癌扶正方对肝癌细胞生长抑制率的影响。结果:抗癌扶正方及药物血清,具有良好的抑肝癌细胞生长作用,尤以1、10mg/mL剂量组效果最佳,作用程度与化疗药物类似。结论:抗癌扶正方能够抑制人肝癌细胞SMMC-7721活性。其机制有必要进一步深入探讨。     

镰形棘豆诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及初步的机制研究

目的:观察镰形棘豆总黄酮对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响及初步的机制探讨.方法:不同剂量的镰形棘豆总黄酮处理SMMC-7721细胞24 h后,MTT法观察总黄酮对细胞增殖的抑制作用;应用光学和荧光显微镜观察总黄酮对SMMC-7721细胞形态的影响;应用流式细胞仪检测SMMC-7721细胞周期的变化;Annexin V-FITC/PI双染法检测总黄酮对SMMC-7721细胞凋亡的影响.结果:MTT实验结果表明,镰形棘豆总黄酮抑制SMMC-7721细胞的增殖,并呈现出一定的浓度依赖性.Hoechst33258染色结果显示,经镰形棘豆总黄酮处理的细胞出现了多种凋亡特征和超微结构的变化.镰形棘豆总黄酮作用SMMC-7721细胞后可观察到G1期细胞明显增多,凋亡细胞的比例升高,并且呈浓度依赖性.结论:镰形棘豆总黄酮抑制SMMC-7721细胞的增殖,与其诱导细胞周期阻滞和使细胞形态发生变化而引起细胞凋亡的活性有关.值得进一步深入研究和阐述镰形棘豆抗肿瘤的作用机制.     

靶向STAT5的RNAi重组质粒的构建与鉴定

摘要:目的：构建靶向信号转导及转录激活因子5（STAT5）的RNAi重组质粒并进行鉴定。 方法：设计针对STAT5编码区的有短发夹结构的3对DNA序列,克隆到质粒载体Pgenesil-1中构建重组质粒,再对其进行酶切鉴定、DNA 测序分析。脂质体法转染重组质粒至SMMC7721细胞株中,westernblot、RT-PCR检测STAT5基因表达。 结果：酶切鉴定和测序分析提示,靶向STAT5的RNAi重组质粒构建成功,3条靶向STAT5的序列特异性小发夹状RNA（shRNA）可有效抑制SMMC7721细胞STAT5表达,mRNA表达抑制率分别为70.43%、43.02%、45.07%,蛋白质表达抑制率分别为67.45%、37.36%、41.86%(P<0.05)。其中以Pgenesil-1-STAT5A1抑制效应最强。 结论：成功构建靶向STAT5的RNAi重组质粒,为进一步用该重组干扰载体进行体内肿瘤基因治疗的研究奠定了基础。     

野生型p53对肝癌细胞POLD1基因表达及细胞恶性表型的影响

目的:探讨野生型p53对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和细胞恶性表型影响的一种可能机制,方法:设计并构建p53特异性小干扰shRNA绿色荧光真核表达质粒(p53-siRNA)和表达EGFP-p53融合蛋白的p53绿色荧光真核增强表达质粒(pEGFP-p53),通过脂质体Lipofection-2000介导转染,将...     

复方苦参注射液诱导人肝癌SMMC-7221细胞凋亡的研究

目的 探究复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法 无菌培养人肝癌细胞SMMC-7721,采用MTT法检测复方苦参注射液对SMMC7721细胞的影响,复方苦参注射液的浓度分别为3.34、2.38、1.43和0.48 mg/ml;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法测肝癌细胞凋亡率,复方苦参注射液的浓度分别为0.86、1.72和3.43 mg/ml.结果 复方苦参注射液浓度3.34、2.38、1.43、0.48 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞抑制率分别为51.03％、53.67％、49.83％、0.03％;作用48 h后,上述浓度的细胞抑制率分别为67.14％、65.35％、62.25％、0.05％,作用72 h后,分别为74.16％、68.77％、66.04％、26.02％.结果 复方苦参注射液浓度0.86、1.72和3.43 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞凋亡率分别为(2.86±0.35)％、(15.16±1.15)％、(13.17±0.40)％;作用48 h后,上述浓度的细胞凋亡率分别为(8.57±0.44)％、(28.07±0.76)％、(29.81±8.10)％,均高于空白对照组(1.05±0.09)％(P＜0.05).结论 复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关.     

裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用研究

目的：探讨裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物在体外的抗肝癌活性。方法：采用磺酰罗丹明染色法（SRB法）,对人肝癌细胞SMMC-7721进行体外抗肿瘤实验。结果：裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721表现出比较明显的高浓度杀死和中低浓度抑制的效果,且抑制率随萃取物浓度的升高而增大,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度（IC50）为21.5μg.mL-1。结论：裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721具有比较明显的抑制作用。     

槲皮素对SMMC-7721肝癌细胞PI3K/AKT信号通路影响的探讨

目的:观察槲皮素( quercetin)对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与细胞凋亡的影响,探讨其对SMMC-7721细胞PI3K/AKT信号通路的影响.方法:采用MTT法检测槲皮素对SMMC-7721细胞生长的抑制,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测槲皮素对SMMC-7721细胞PI3K/AKT信号通路凋亡相关蛋白表达的影响.结果:槲皮素抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖作用明显,且呈浓度和时间依赖性.顺铂和槲皮素40,80,160,320 μmol·L-148 h抑制率分别为62.19％,25.47％,27.18％,36.96％,51.28％.流式细胞术结果提示,槲皮素80,160,320μmol ·L -可使SMMC-7721肝癌细胞周期阻滞于G0/G1期.Western blot凋亡相关蛋白表达检测表明,药物组AKT的表达受抑制,PTEN,Caspase-9蛋白的表达率随着药物浓度的增加而增加.结论:槲皮素能诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡,其机制可能是使肝癌细胞SMMC-7721周期阻滞于G0/G1期,PTEN的过表达抑制AKT活化,激活Caspase-9从而促进细胞凋亡.     

薏苡仁油注射液对人体肝癌SMMC-7721细胞株体外抗肿瘤作用及机制研究

目的：研究薏苡仁油注射液（KLT）对人体肝癌SMMC-7721的体外抗肿瘤作用及机制。方法：在人肝癌SMMC-7721细胞模型上采用CCK-8细胞增殖试验、划痕试验、Transwell小室穿膜试验、Matrigel克隆形成试验观察KLT对细胞增殖、迁移及侵袭的影响;应用流式细胞术检测KLT对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响;Western blot检测KLT对肿瘤细胞中目的基因的表达情况。结果：经KLT作用后的人肝癌细胞生长、迁移及侵袭功能被抑制;流式细胞术检测发现KLT处理的肝癌细胞阻滞于G2/M期,细胞晚期凋亡较明显;KLT上调了cyclin B1的表达,下调了cyclin D1、cyclin E的表达。结论：KLT在体外对肝癌细胞具有良好的抗肿瘤活性,其作用机制可能与其诱导的细胞周期阻滞、细胞凋亡、抑癌基因的上调、癌基因的下调有关。