纳米级金颗粒在基因芯片检测技术中的研究进展

纳米直径的金颗粒用于生命科学研究中的示踪技术已有较长的历史，由于其独特的物理、化学性质及生物相容性，近年来更是在芯片检测技术中得到了广泛的应用，特别是用不具备吸附能力离散的纳米金作为信号报告分子则被认为是芯片检测中的一个重要进展。     

基因芯片技术在肿瘤研究中的应用

基因芯片也称为基因微阵列 (Microarray) ,是近几年发展起来的一项前沿生物技术 [1 ] ,是指采用原位合成或直接点样的方法将 DNA片段或寡核苷酸片段排列在硅片、玻璃等介质上形成微阵列 ,待检样品用荧光分子标记后 ,与微阵列杂交 ,通过荧光扫描及计算机分析即可获得样品中大量的基因序列及表达信息 ,以达到快速、高效、高通量地分析生物信息的目的。基因芯片能将 c DNA文库中的已知和未知序列固定于玻片上 ,可同时检测比较生物样品中多个已知或未知的序列表达状况 ,向研究者报告所要比较样品中的差异基因 ,为进一步有效地进行基因测序和…     

体外反搏治疗血清对培养内皮细胞基因表达的影响

目的探讨经体外反搏治疗的冠心病患者血清对血管内皮细胞基因表达的调控效应。方法分别取接受体外反搏治疗的冠心病患者1、24和36h时间点的血清，用于培养人脐静脉血管内皮细胞。用cDNA基因芯片检测3个治疗时点反搏前、后血管内皮细胞基因表达谱。结果反搏前后比较，有10个基因（核转录因子、真核转录启动因子-4、平滑肌的肌球蛋白重链、α2-肌动蛋白、微管蛋白β肽链、组织相容蛋白G、黑色素黏附分子、神经介素B受体、蛋白激酶4K2、血小板凝血酶敏感蛋白-1）的表达在3个治疗时点上出现显著改变。在1h点均为上调，在24h、36h时点均为下调。结论体外反搏治疗冠心病患者血清对血管内皮细胞的炎症反应、细胞凋亡相关基因表达有调效应，并随体外反搏治疗时间的增加早抑制其表达的趋势。     

深低温对全脑缺血大鼠海马代谢型谷氨酸受体3型表达的影响

深低温对全脑缺血性损伤的保护作用已经被大量的动物实验和临床实践证实，对深低温脑保护机制的研究一直是国内外学术界关注的热点.笔者在前期工作中以基因芯片技术初步筛选出了可能与深低温脑保护作用相关的基因.代谢型谷氨酸受体3型（mGluR3）是其中一个。笔者进一步以实时荧光定量RT—PCR技术研究深低温对全脑缺血大鼠海马mGluR3表达的影响，并探讨其在深低温脑保护机制中的作用.     

雄黄对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞基因表达谱的影响

目的 研究雄黄作用后白血病细胞基因表达谱的变化，寻找雄 黄作用的靶基因. 方法分别在蛋白质合成抑制剂放线菌酮预处理细胞前 后，以1024D芯片研究雄黄作用前后急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞差异表达的基因.结 果 雄黄（355 μg·L-1砷）作用4 h后，筛选出差异表达基因13条，其中２条表达增加，11条表达降低；放线菌酮抑制试验筛选出 差异基因4条，其中1条表达增加，3条表达下调，与前次芯片结果上下调趋势一致、程度相似. 结论 细胞信号传递蛋白类基因U51903和Z22533, DNA结合转录和 转录因子相关基因AF036613,代谢类基因X66435等可能是雄黄作用于APL细胞的靶基因.      

结核分枝杆菌分子生物学检测方法新进展

应用分子生物学技术检测结核分枝杆菌，克服了传统检测方法的诸多不足，能够对难以培养、生长缓慢的结核分枝杆菌进行更加敏感、特异、准确、快速的鉴定和药物敏感性评价。本文概述了目前国内外几种结核分枝杆菌分子生物学检测方法的原理、应用现状及评价。     

人胰腺癌干细胞差异性基因的表达

目的 分选、鉴定人胰腺癌干细胞,运用基因芯片技术分析其差异性基因的表达.方法 运用流式分选技术分选胰腺癌干细胞(CD24+CD44+ESA+),NOD/SCID鼠移植瘤试验进行肿瘤干细胞特性鉴定.采用Affymetrix U133 plus2.0人类全基因组表达谱芯片对胰腺癌干细胞和非干细胞进行差异基因筛选.结果 分选得到人胰腺癌CD24+CD44+ESA+亚群细胞,占所有细胞的0.8%;5×103个CD24+CD44+ESA+细胞就能成瘤(2/4),而阴性细胞1×105才能成瘤(1/4);CD24+CD44+ESA+具有一定的自我更新和分化能力.基因芯片杂交获得6553(11.99%)条差异基因,胰腺癌干细胞中5255(9.61%)条上调表达,1298(2.37%)条下调表达.其中差异基因涉及细胞凋亡、细胞周期、代谢、细胞线粒体结构和耐药等多个方面.结论 胰腺癌于细胞具有自身特征性基因表达谱,为进一步从干细胞层面研究胰腺癌发病机制及靶向治疗奠定基础.     

小脑变性相关蛋白2 mRNA在癫痫患者脑组织中的表达及其临床意义

目的了解小脑变性相关蛋白2(CDR2)mRNA在癫痫(EP)患者脑组织中的表达及其临床意义。方法将48例EP患者分成耐药(40例)和非耐药(8例)两组,用基因芯片扫描和FQ-PCR分别检测脑组织中CDR2基因表达,并与对照组比较。结果基因芯片扫描提示CDR2 mRNA在EP患者与对照组中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。FQ-PCR结果与基因芯片扫描一致。结论EP患者脑组织中有CDR2 mRNA表达,由于其表达产物可通过血-脑脊液屏障进入脑脊液(CSF)和血液中,因而检测CDR2 mRNA在血或CSF中的表达产物有可能成为诊断EP的一个重要指标。