AP-PCR和set1、set2两基因PCR用于志贺氏菌基因多态性研究

本文应用随机引物PCR(简称AP-PCR或PAPD)和set1,set2两基因PCR方法分析了71株F2a志贺氏菌的基因多态性。结果为：两种引物的AP-PCR中,引物12将71株F2a志贺氏菌分为2种不同的基因型,引物17和set1、set2两基因PCR将所有菌株分为4种不同的基因型,两种方法结合则可分为7种不同的基因型;其中65株F2a志贺氏菌基因型相同,其余6株各为独立的型别。本研究表明AP-PCR和set1、set2两基因PCR为志贺氏菌基因多态性分析的有效手段,两者结合则更为完善;研究结果还表明在我国南北不同地区不同时同分离到的无论是暴发株还是散发株均具有相同的优势克隆,说明其为引起国内菌痢散发和暴发的主要基因型,是流行病学研究和防治的重点。     

小鼠胚胎切割及半胚体外培养

目的 为基因型完全相同的同卵双胞脂人类动物模型的建立积累基础资料。方法C57BI/6J雌性小鼠与KM雄性小鼠交配,见栓3．5d采集小鼠晚期桑椹胚和早期囊胚,应用显微手术刀直接分割法进行胚胎二等份分割,所得半胚体外培养,观察其发育情况。结果 晚期桑椹胚分割成功率是91．3％,半胚发育率为57.1％,早期囊胚分割成功率约为89．2％,半旺发育率为71.2％。结论 C57BI/6J小鼠与KM小鼠的F1代胚胎经切割后能在体外良好发育,该资料可用于同卵双胞胎分化发育的研究及人类双胞胎动物模型的制作。     

视紫红质基因型与视网膜色素变性临床表型相关性的初步研究

目的:对国人视网膜色素变性(retinitis pigmentosa RP)患者中视紫红质基因不同突变与临床表型相关性进行初步研究。方法:对经异源双链-SSCP和序列分析确定为视紫红质基因不同位点突变的3例RP患者,收集其详细临床资料,比较其异同。结果:详细描述了3例已知突变患者的临床表现。视紫红质基因不同位点突变,临床表现不尽相同,发生在杆细胞外节胞液侧的突变,常导致严重类型的Ⅰ型视网膜色素变性;而发生在杆细胞外节盘膜内的突变,常引起相对较轻的Ⅱ型视网膜色素变性。结论:本文3例视紫红质基因不同位点突变与临床表型有一定关系,但要建立基因突变与表型间确切的对应关系和规律,尚需积累更多病例资料进一步分析研究。眼科学报1999;15:204-206。     

维生素D受体基因型与营养性佝偻病

营养性佝偻病是维生素D缺乏所致的钙、磷代谢障碍和骨骼异常。有关其环境因素 ,包括营养因素的致病原因目前基本得到肯定 ,但对其遗传学方面的致病机制探讨较少。维生素D受体(VDR)是介导1,25(OH) 2 D3 发挥生物效应的核内生物大分子 ,对维持机体的骨钙动态平衡起重要作用。近年研究表明 ,VDR基因是骨代谢遗传基础的侯选基因之一 ,VDR基因型 (VDRalleles)与骨密度 (BMD)、骨量丢失和肠道钙吸收存在一定关联。VDRalleles与营养性佝偻病是否相关 ,国内外尚无深入研究 ,但VDRalleles与骨钙代谢的诸多研究将有助于推断营养性佝偻病与V…     

Methylenetetrahydrofolate Reductase Genotypes, Dietary Habits and Susceptibility to Stomach Cancer

OBJECTIVE To study the relation among methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) C677T genotypes, dietary habits and the risk of stomach cancer (SC).METHODS A case-control study was conducted with 107 cases of SC and 200 population-based controls in Chuzhou district, Huaian, Jiangsu province, China. The epidemiological data were collected, and DNA of peripheral blood leukocytes was obtained from all of the subjects..MTHFR genotypes were detected by PCR-RFLP. RESULTS (1) The prevalence of the MTHFR C/T or T/T genotypes was found to be significantly different between controls (68.5%) and SC cases (79.4%,P=0.0416), the increased risk had an adjusted OR of 1.79 (95?:1.01-3.19). (2) Among subjects who had a low intake of garlic or Chinese onion, MTHFR C/T or T/T genotypes significantly increased the risk of developing SC. Among non-tea drinkers or among subjects who had a frequent intakeof meat, the carriers of the MTHFR C/T or T/T genotypes had a higher risk of SC than individuals with the C/C type MTHFR. CONCLUSION The polymorphism of MTHFR C677T was associated with increased risk of developing SC, and that individuals with differing genotypes may have different susceptibilities to SC, based on their exposure level to environmental factors.     

幽门螺杆菌基因表型与胃癌的关系

幽门螺杆菌 (helicobacterpylori ,Hp)是 1种革兰氏阴性、尿素酶阳性的人胃病原体。流行病学统计 ,人群的Hp感染率为15 %～ 90 % [1] 。二十多年来 ,Hp与慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌等疾病的关系得到了广泛而深入的研究。已证实Hp是B型慢性胃炎和消化性溃疡发生的病因 ,但是 ,H     

检测CYP2A6基因多态性的PCR技术的基因型方法

综述检测CYP2A6基因多态性的PCR技术的基因型方法。CYP2A6基因多态性存在于白种人、东方人及非洲裔美国人群中 ,包括CYP2A6 1至CYP2A6 12 ,总共 12个变异等位基因。本文列举了检测CYP2A6基因型的不同的DNA来源、引物和限制性内切酶。已开发PCR技术结合诊断性限制性内切酶分析 (RFLP)如两步PCR和一步PCR RFLP方法检测CYP2A6基因型。此外 ,尚有PCR SSCP +RFLP及直接DNA测序方法。     

细胞色素P450 2E1(CYP2E1)的遗传多态性与非吸烟女性肺癌的危险度

我们在上海和哈尔滨二地分别收集了非吸烟女性肺癌病例各１００例和８２例以及非吸烟的女性健康人对照各９５例和８９例。分析了白细胞ＤＮＡ的细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１基因第六内含子ＤｒａＩ切点和５’端调控区ＲｓａＩ切点的遗传多态性。虽然上海病例组ＤｒａＩ和ＲｓａＩ突变型纯合子与对照组比ＯＲ值分别为２５６和５４７，但未达显著性；哈尔滨病例组ＯＲ值分别为０４９和０４７，也无显著差异。     

绝经后妇女雌激素受体基因多态性与骨和脂代谢的相关性研究

目的 研究绝经后妇女雌激素受体（ER）基因PvuⅡ、XbaⅠ限制性片段长度多态性与骨和脂代谢的关系。方法 随机选取57名已排除影响骨代谢、脂代谢疾病的绝经后妇女，采空腹血和晨尿，用PCR—RFLP法对ER基因多态性进行分析，DEXA测定腰椎正侧位及股骨骨密度，同时检测血骨钙素、尿Ⅰ型胶原N末端肽和血脂指标。结果 基因型分析xx29例，Xx24例，XX4例。XX组股骨干（SHAFT）骨密度明显低于Xx组（P〈0．05）。XbaI限制性片段长度多态性与股骨干骨密度相关（r=0．367，P=0．039）：XX组骨钙素高于xx（P=0．041）和Xx（P=0．011）组。apoAl含量和A1／B比值在xx、Xx、XX三组呈递增，各组间差异有显著性（P〈0．05）。脂蛋白a[Lp（a）]与股骨骨密度（除SHAFT外）呈负相关。结论ER基因XbaⅠ—RFLP是影响绝经后妇女骨和脂代谢的重要因素；X基因型可维持股骨骨量，xx基因型与低载脂蛋白A1（apoAl）含量和A1／B比值相关，Lp（a）也影响股骨骨密度。     

胸苷酸合成酶基因3’-UTR多态性与晚期胃癌化疗敏感性关系的研究

目的：研究胸苷酸合成酶（TS）基因3’-UTR多态性与胃癌对5-Fu化疗敏感性的关系。方法：收集经病理学确诊的晚期胃癌106例，所有病例化疗前抽静脉血，提取白细胞DNA，用PCR-RFLP技术检测TS3’-UTR基因型。所有患者均经5-FU为基础的化疗方案治疗。以WHO实体瘤疗效评定标准和毒性评定标准评价疗效和毒性。结果：（1）106例胃癌患者中TS＋6／＋6bp、＋6／-6bp、-6／-6bp基因型频度分别为7．6％、44．3％和48．1％，化疗的总有效率为35．9％。（2）TS＋6／＋6bp、＋6／-6bp、-6／-6bp基因型组化疗的有效率分别为0％（0／8）、40．4％（19／47）和37．3％（19／51）。TS-6／-6bp基因型组和＋6／-6bp组化疗的有效率均显著高于＋6／＋6bp组（Fisher双侧精确检验，P值分别为0．0452和0．0404）。TS-6／-6bp基因型组Ⅱ度以上毒副反应的发生率高于＋6bp／＋6bp基因型组，但其差异无统计学意义。结论：TS基因3’-UTR多态性与晚期胃癌对5-FU为基础的化疗敏感性相关，TS基因型检测有助于指导晚期胃癌的化疗。