lncRNA SOX21-AS1的表达对卵巢癌细胞增殖和转移能力的影响及机制研究

目的 探讨长链非编码RNA SRY-box转录因子21反义RNA 1（lncRNA SOX21-AS1）对卵巢癌细胞增殖和转移能力的影响及其作用机制。方法 选取卵巢癌组织和其邻近的癌旁组织各75例,另选取卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、OVCR3和人卵巢正常上皮细胞HOSE作为实验对象,实时荧光定量PCR法检测lncRNA SOX21-AS1在组织和细胞中的表达。根据是否干扰lncRNA SOX21-AS1表达将细胞分为si-NC组和si-SOX21-AS1组。MTS实验和平板克隆实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞转移能力,TOP/FOP荧光素酶实验和Western blot实验检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性和相关蛋白表达水平。结果 与癌旁组织相比,lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌组织中的表达上调（P<0.05）。与卵巢正常上皮细胞HOSE相比,lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌细胞中的表达上调,SKOV3中最高（P<0.05）。与FIGO分期Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移的患者相比,FIGO分期Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移患者lncRNA SOX21-AS1相对表达水平升高（P<0.05）。干扰lncRNA SOX21-AS1表达可抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力、抑制Wnt/β-catenin信号通路活性并降低Wnt/β-catenin信号通路各蛋白的表达水平（P<0.05）。结论 lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌组织和细胞中高表达,干扰lncRNA SOX21-AS1的表达可抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力。     

lncRNA MALAT1通过miR-124-3p/SOX7分子轴促进视网膜血管内皮细胞增殖及迁移和血管生成

目的：探讨lncRNA MALAT1对视网膜血管内皮细胞增殖、迁移及血管生成的影响及其分子机制。

方法：qPCR检测正常对照组、糖尿病患者无视网膜病变组、糖尿病视网膜病变患者组血清中lncRNA MALAT1的表达水平以及葡萄糖培养对lncRNA MALAT1的表达水平的影响。qRT-PCR检测miR-124-3p表达水平; Western blotting检测SOX7表达水平; 双荧光素酶报告系统检测lncRNA MALAT1与miR-124-3p、miR-124-3p与SOX7的靶向作用关系; CCK-8实验检测细胞的增殖活力; Transwell实验检测细胞的迁移能力; 体外成管实验检测hRMECs血管形成能力。

结果：lncRNA MALAT1在糖尿病视网膜病变患者血清中的表达水平显著高于糖尿病患者无视网膜病变组和正常对照组(P<0.001); 体外葡萄糖培养显著促进lncRNA MALAT1在hRMECs细胞的表达,并显著促进hRMECs细胞的增殖、迁移和血管形成(均P<0.05)。敲低lncRNA MALAT1显著抑制hRMECs细胞的增殖、迁移和成管能力(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验表明,lncRNA MALAT1与miR-124-3p、miR-124-3p与SOX7之间存在靶向结合作用。过表达miR-124-3p显著抑制hRMECs细胞的增殖、迁移和成管能力(均P<0.05); 过表达lncRNA MALAT1+miR-124-3p,同时过表达miR-124-3p+SOX7,敲低lncRNA MALAT1+过表达SOX7均显著消除了过表达miR-124-3p对hRMECs细胞增殖、迁移和血管形成的抑制作用(均P<0.05)。

结论：lncRNA MALAT1通过下调miR-124-3p对SOX7的负调控作用促进糖尿病视网膜病变中视网膜内皮细胞增殖、迁移和血管形成。lncRNA MALAT1在糖尿病视网膜病变患者的异常上调可能是微血管功能障碍的潜在生物标志。     

Long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 7 facilitates the proliferation,migration, and invasion of esophageal cancer cells by regulating microRNA-625

BackgroundEsophageal cancer (EC) is a highly aggressive malignant tumor, of which esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) constitutes the main subtype. Long non-coding RNA (lncRNA) small nucleolar RNA host gene 7 (SNHG7) has been extensively studied in many tumors and has been confirmed to be an oncogene; however, it has yet to be investigated in an ESCC study. Therefore, this study intended to uncover the role of SNHG7 in ESCC.MethodsQuantitative real-time polymerase chain reaction was applied to measure the expression levels of SNHG7 and miR-625 in ESCC tumor tissues and cell lines. Cell Counting Kit-8 assay, 5-Ethynyl-2''-deoxyuridine assay, scratch assay, and Transwell assay were conducted to assess the proliferation, migration, and invasion ESCC cell. We verified the interaction between SNHG7 and miR-625 by performing the dual luciferase reporter gene experiment.ResultsCompared to that in adjacent normal tissues and HET1A cell lines, the expression level of SNHG7 in ESCC tumor tissues and ESCC cell lines was up-regulated, while the expression level of miR-625 was down-regulated. ESCC cell proliferation, migration, and invasion were significantly promoted by SNHG7 overexpression but inhibited by silencing of SNHG7. Further, luciferase reporter gene experiments confirmed that SNHG7 interacted with miR-625, and rescue experiments showed that SNHG7 promoted the malignant phenotype by inhibiting miR-625.ConclusionsSNHG7 is up-regulated in ESCC tumor tissues and cell lines, while miR-625 is expressed at a low level. SNHG7 is able to facilitate the proliferation, migration, and invasion of ESCC cells by targeting miR-625.     

不同基因作为竞争性内源RNA参与膀胱癌调控的研究进展

竞争性内源RNA（competing endogenous RNA,ceRNA）是一种新的转录后RNA相互调控机制,越来越多的研究发现长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）、环状RNA（circular RNA,circRNA）和假基因（pseudogenes）可以与微小RNA（microRNA,miRNA）竞争,影响靶RNA的稳定性或翻译,从而调控基因表达。近年来,不同基因作为ceRNA参与膀胱癌调控的研究已引起学者的广泛关注。为此,本文综述了lncRNA、circRNA和假基因作为ceRNA在膀胱癌中作用的研究进展,以及不同基因作为ceRNA调控膀胱癌的信号转导通路。从ceRNA分类的角度综述各类ceRNA在膀胱癌发生发展过程中的研究进展。     

长链非编码RNA OR3A4 促进结直肠癌细胞奥沙利铂耐药

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）OR3A4在结直肠癌细胞奥沙利铂（L-OHP）耐药中的作用。方法:实时荧光定量（qPCR）检测结直肠癌组织和细胞中lncRNA OR3A4的表达。免疫印迹（Western blotting）检测OR3A4对耐药相关蛋白P-糖蛋白（P-GP）和多药耐药相关蛋白（MRP）表达的影响。利用细胞计数试剂盒（cell counting kit,CCK-8）检测半数抑制浓度（IC50）。结果:结直肠癌组织/细胞株中OR3A4的表达水平显著高于癌旁组织/正常结肠细胞株（P＜0.05）。L-OHP耐药组的结直肠癌细胞的IC50显著高于非耐药组,而且L-OHP耐药组中OR3A4的表达水平显著高于非耐药组（P＜0.05）。转染OR3A4 小干扰RNA的结直肠癌L-OHP耐药细胞中耐药蛋白表达水平以及IC50均显著低于未转染组（P＜0.05）。结论:lncRNA OR3A4促进结直肠癌细胞的奥沙利铂耐药性。     

lncRNA LINRIS在肺腺癌细胞中的表达及对细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察lncRNA LINRIS在肺腺癌（lung adenocarcinoma,LUAD）细胞中的表达及对细胞增殖和凋亡能力的影响,并探讨其机制。方法:实时荧光聚合酶链反应（real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）检测人支气管上皮细胞株（BEAS-2B）和LUAD细胞（A549和Calu-3）中LINRIS的表达水平;在LUAD中抑制LINRIS表达后,Western-blot检测CDH5的表达水平;在LUAD细胞中抑制LINRIS后,再过表达CDH5,应用EdU、CCK-8与Annexin V-FITC/PI双染色实验评估细胞增殖和凋亡能力的改变。结果:与BEAS-2B细胞相比,LUAD细胞中LINRIS的表达水平均明显升高(P＜0.05);抑制LINRIS表达后LUAD细胞中CDH5表达下调;LUAD细胞敲降RNA后,细胞增殖减弱和凋亡增加（P＜0.05）,而过表达CDH5后增殖和凋亡能力明显恢复（P＜0.05）;LINRIS对LUAD恶性表型的影响是通过调控CDH5实现的。结论:LINRIS在肺腺癌细胞A549和Calu-3中过表达,并且能够调控CDH5的表达,二者协同作用影响细胞的增殖和凋亡。     

儿童淋巴瘤患者化疗前后血液中lncRNA GAS5水平变化的临床意义

目的:探究儿童淋巴瘤患者化疗前后血液中长链非编码RNA GAS5（lncRNA GAS5）水平变化的临床意义。方法:收集淋巴瘤患儿（81例）及健康儿童（52例）的血液样本,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测两组样本血液中的 lncRNA GAS5含量。分析不同临床分期儿童淋巴瘤化疗有效和无效患儿血液中lncRNA GAS5表达及凝血功能在化疗前后的变化差异。淋巴瘤患儿血液中lncRNA GAS5水平与凝血指标的相关性利用皮尔森(Pearson)相关性分析。结果:患儿组 lncRNA GAS5水平与凝血指标均显著高于对照组（P＜0.01）;淋巴瘤Ⅰ-Ⅱ期（n=45）与Ⅲ-Ⅳ期（n=36）患儿的 lncRNA GAS5水平以及凝血功能间无统计学差异（P＞0.05）;化疗有效患儿（n=60）化疗后凝血指标及 lncRNA GAS5水平与化疗前相比均显著降低（P＜0.01）;而化疗无效患儿组凝血指标lncRNA GAS5水平化疗前后差异无统计学意义（P＞0.05）。 lncRNA GAS5水平分别与PT（r2=0.792）、APTT（r2=0.776）和FIB含量（r2=0.750）呈正相关（P＜0.001）。结论:血液中lncRNA GAS5水平可能是反映淋巴瘤患儿化疗疗效和血栓发生风险的潜在标志物。