影响乳腺导管癌进展后生存时间的Ｃｏｘ多因素分析

摘 要： 【目的】 评估通过不同预后因子预测乳腺导管癌患者转移后生存时间的可行性。【方法】 １９９０年至２００５年在中山大学肿瘤防治中心就诊的乳腺导管癌患者,在过去２０余年随访中证实发生转移者入组回顾性研究。按不同的临床预测因子分组,记录中位无进展生存时间（ＰＦＳ）,中位进展后生存时间（ＰＯＳ）及中位总生存时间（ＯＳ）,评估通过初诊信息、ＰＦＳ及转移位点３方面信息推测一个乳腺导管癌患者的ＰＯＳ的可能性。【结果】１ ０５０个入组患者,中位ＰＦＳ为３９个月,中位ＰＯＳ为２９个月,中位ＯＳ为６７个月。肿瘤初诊情况包括病人特征（年龄、月经）、肿瘤特点（大小、核分级、分子亚型、激素受体、Ｈｅｒ２受体、淋巴结转移情况）以及初诊肿瘤治疗方案可导致中位ＰＦＳ／ＰＯＳ／ＯＳ不同。２０００－２００５年就诊的患者其中位ＰＯＳ长于其他时间（Ｐ＝ ０．０００）,但中位ＰＦＳ与ＯＳ的差别无统计学意义（Ｐ ＞ ０．０５）。ＰＦＳ亚组和进展情况亚组（局部复发及转移位点）的患者的中位ＰＯＳ明显不同（Ｐ ＜ ０．０００）,故我们认为可通过患者的ＰＦＳ及进展情况推测患者的进展后生存时间,进而推断总生存时间。【结论】ＰＯＳ与ＰＦＳ及转移位点密相关。结合初诊信息（肿瘤大小、核分级、淋巴结转移及初诊是否接受手术治疗）,可帮助临床医生推断患者准确ＰＯＳ区间,选择最为适合的治疗方案。     

婴儿肥厚型心肌病一家系ＧＡＡ基因的突变分析

摘　要： 【目的】 鉴定一个婴儿肥厚型心肌病家系ＧＡＡ基因的致病性突变。【方法】 分析一例患病女婴的临床及家系资料;提取先证者及其父母和姐姐的外周血ＤＮＡ,ＰＣＲ扩增ＧＡＡ基因的全部２０个外显子及剪接位点序列,对ＰＣＲ产物进行直接测序。【结果】家系分析表明该病的遗传方式可能为常染色体隐性遗传;心脏彩超提示患儿有肥厚型心肌病;先证者ＧＡＡ基因有两个复合杂合性突变：遗传自母亲的外显子１３的ｃ．１８４３Ｇ＞Ａ（ｐ．Ｇ６１５Ｒ）错义突变和遗传自父亲的外显子１８的ｃ．２６０８Ｃ＞Ｔ（ｐ．Ｒ８７０Ｘ）无义突变。先证者未患病的姐姐只携带了ｃ．２６０８Ｃ＞Ｔ杂合性突变。该两种突变均尚未在大陆地区患者中发现。该两个突变已被证实可引起突变等位基因编码的蛋白残存的ＧＡＡ酶活性严重减少。【结论】ＧＡＡ基因的ｃ．１８４３Ｇ＞Ａ和ｃ．２６０８Ｃ＞Ｔ复合杂合性突变导致了该患儿出现以肥厚型心肌病为特征的经典婴儿型Ｐｏｍｐｅ病（或糖原贮积症Ⅱ型）。该研究进一步证实了ｃ．１８４３Ｇ＞Ａ突变与婴儿型Ｐｏｍｐｅ病相关;同时也表明了对常染色体隐性遗传的婴儿肥厚型心肌病进行ＧＡＡ基因检测或ＧＡＡ酶活性检测的必要性。     

骨肉瘤保肢术后感染的治疗和预后分析

摘 要： 【目的】 比较骨肉瘤术后假体周围感染的不同手术方法的效果, 研究假体周围感染对骨肉瘤患者预后的影响, 探讨骨肉瘤保肢术后假体周围感染治疗方法的选择。【方法】回顾分析２００３－２００８年在我院就诊的骨肉瘤患者,记录患者个人和病情的各种信息,并随访患者,建立临床资料数据库。提取骨肉瘤保肢患者术后假体周围感染患者资料,比较清创灌洗、一期翻修、二期翻修和截肢等手术方法控制感染的效果。利用Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存分析感染对骨肉瘤整体预后的影响。【结果】 ２００３－２００８年共１８３例Ｅｎｎｅｃｋｉｎｇ ⅡＢ期骨肉瘤患者在我院接受治疗,其中术后假体周围感染患者为１７人（９．２８％）, 其中股骨远端７例,胫骨近端５例,肱骨近端２ 例, 骨盆 ３ 例。感染发生时间中位时间为术后 ８．９月（２．３－３１．５月）,细菌培养阳性率为７０．６％,多数为葡萄球菌 。共经历 ２５次手术,１４例感染得到控制,感染控制率为８２．４％;３例患者截肢,保肢成功率为８２．４％。不同手术方法感染控制率：清创灌洗术感染控制率为３３．３％（３／９）,一期翻修手术感染控制率为 ５０％（１／２）;最终采取二期翻修患者感染控制率为１００％（７／７）。最终采取截肢患者感染控制率为１００％（３／３）;通过Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存分析感染和无感染患者的两年生存率分别为９４％和８５％,五年生存率分别为７９％ 和５５％ （Ｐ ＝ ０．０４）。【结论】 从感染控制角度,二期翻修是治疗骨肉瘤术后假体感染有效方法;预后方面,术后感染患者的要好于术后无感染患者。骨肉瘤保肢术后假体周围感染的手术治疗方法和时机的选择需要考虑到感染对预后的影响。     

不同滴定终点在无痛取卵术滴定麻醉中的比较

摘 要： 【目的】 比较经阴道超声引导下穿刺取卵术（ＴＵＧＯＲ）麻醉中不同滴定终点的麻醉效果及其对呼吸循环的影响,以探索无痛取卵术麻醉时的最佳滴定麻醉方案。【方法】１５０例拟行无痛取卵术患者,随机分为３组,ＭＯＡＡ／Ｓ评分组（Ｍ组）、Ｒａｍｓａｙ镇静评分组（Ｒ组）及脑电双频谱指数组（Ｂ组）,每组５０例。３组病人于静脉注射芬太尼１０ μｇ １ ｍｉｎ后开始诱导,采用丙泊酚滴定给药方式,以１ ｍｇ·ｋｇ－１·ｍｉｎ－１速度持续静脉泵注,分别以ＭＯＡＡ／Ｓ评分达１分、Ｒａｍｓａｙ镇静评分达６分以及ＢＩＳ值达４０～ ５０为诱导终点。麻醉维持阶段３组均在丙泊酚４ ｍｇ·ｋｇ－１·ｈ－１持续静脉泵注的基础上进行调整。记录患者各时间点时平均动脉压（ＭＢＰ）、收缩压（ＳＢＰ）、舒张压（ＤＢＰ）、心率（ＨＲ）、脉搏氧饱和度（ＳＰＯ２）。记录术中不良反应例数并记录操作者和患者术后对麻醉的满意度情况。记录丙泊酚诱导用药量、维持用药量及麻醉诱导时间、维持时间、苏醒时间、离室时间。【结果】ＭＡＰ的变化在诱导完毕时、进针后３ ｍｉｎ Ｒ组较Ｂ组平稳（Ｐ ＜ ０．０５）,ＳＢＰ的变化诱导完毕时Ｒ组较Ｂ组平稳（Ｐ ＜ ０．０５）。３组间并发症发生率（低氧血症、低血压等）无统计学差异（Ｐ＞ ０．０５）。Ｒ组、Ｂ组操作者及患者术后满意度均高于Ｍ组（Ｐ ＜ ０．０５）,而Ｒ组和Ｂ组间操作者及患者术后满意度无统计学差异（Ｐ ＞ ０．０５）。３组患者丙泊酚诱导用药量、单位时间维持用药量、用药总量及麻醉诱导时间、苏醒时间、离室时间均无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。【结论】 ３种滴定麻醉的给药方案在无痛取卵术中均可获得较满意的麻醉。相对地,以Ｒａｍｓａｙ镇静评分达６分作为滴定诱导终点应用于无痛取卵术滴定麻醉时对患者呼吸循环影响小,获得患者及操作者更高满意度。     

关注妇科癌症患者的生育权利

近年来,癌症患者逐年增加,并呈年轻化趋势。随着临床诊治水平的提高,癌症已成为一种慢性病,在其治疗中关注和保护患者的生育功能和权利日益凸显。从肿瘤生殖学（Oncofertility）出发,治疗前对肿瘤患者的疾病恶性程度评估极为重要;在选择放化疗时,也需充分考虑到化疗药物及放射线对生殖器官和功能的损伤。当前,在妇科癌症患者的治疗中,已有保护生育功能的治疗常规,新的方法也在不断探讨。随着科学的进步及对恶性肿瘤患者诊治手段的提高,将会有更多的恶性肿瘤患者治疗后获得有质量的生活。     

子宫内膜息肉对不孕患者临床妊娠的影响

【目的】 探讨子宫内膜息肉对不孕患者临床妊娠的影响。【方法】 采用回顾性对照研究,收集２０１１年１月至２０１２年３月间因不孕在本院门诊行宫腔镜检查及治疗且成功随诊的４００例患者的临床资料,按随诊时患者既往助孕情况分为助孕失败组与未助孕组,同时根据此次门诊宫腔镜检查结果将各组再分为息肉摘除亚组和正常宫腔亚组。分别比较两组内息肉摘除亚组和正常宫腔亚组的临床妊娠率。并根据年龄将不孕患者分为“≤３５岁”与“＞３５岁”两组,统计两个年龄段子宫内膜息肉发生率及子宫内膜息肉摘除后妊娠情况。【结果】助孕失败组内息肉摘除亚组患者临床妊娠率４０．９１％高于正常宫腔亚组２３．２１％,差异有统计学意义（Ｐ ＝ ０．０２４）;未助孕组内息肉摘除亚组临床妊娠率４７．８３％高于正常宫腔亚组 ３６．３６％,差异无统计学意义（Ｐ ＝ ０．１０３）。助孕失败患者子宫内膜息肉发生率在不同年龄段两组间无统计学差异（Ｐ ＝ ０．１２３）,而未助孕患者息肉发生率≤３５岁组２５．８％,大于＞３５岁组１２％,差异有统计学意义（Ｐ ＝ ０．０３９）;不论助孕失败组与未助孕组患者,息肉摘除后临床妊娠率在不同年龄段两组间均无统计学差异（Ｐ ＝ ０．１２７,Ｐ ＝ ０．６６７）。【结论】 子宫内膜息肉是影响助孕过程中胚胎种植的一个独立因素,也可能是影响不孕的相关因素;各年龄助孕失败患者,未尝试助孕的≤３５岁的不孕患者,应尽早行宫腔镜检查,帮助诊断、摘除子宫内膜息肉,有助于提高其临床妊娠。     

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞亲环素Ａ的表达及意义

【目的】 探讨强直性脊柱炎（ＡＳ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）亲环素Ａ（ＣｙＰＡ）表达水平及其与病情活动性指标的联系。【方法】 纳入年龄与性别相匹配的新诊断ＡＳ患者及健康志愿者（ＨＶ）各３０例,于空腹状态采集血样,并记录患者的毕氏ＡＳ疾病活动指数（ＢＡＳＤＡＩ）、毕氏ＡＳ功能指数（ＢＡＳＦＩ）、红细胞沉降率（ＥＳＲ）及Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白及ｍＲＮＡ表达,Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析了解ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白水平与病情活动性指标的相关性。【结果】ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白及ｍＲＮＡ半定量值分别为０．９８ ± ０．２８及０．７７ ± ０．１０,均显著高于ＨＶ的０．３０ ± ０．２１及０．１７ ± ０．１１（Ｐ＜ ０．０５）。Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析则提示ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白与ＥＳＲ （ｒ ＝ ０．５２１,Ｐ ＜ ０．０５）及ＣＲＰ （ｒ ＝ ０．３９４, Ｐ＜ ０．０５）均呈正相关。【结论】 ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ表达较ＨＶ上调,且与ＥＳＲ及ＣＲＰ密切关联,提示ＣｙＰＡ可能在ＡＳ发病及炎症活动过程中起调节作用。     

Ｃａｓｐａｓｅ－３沉默对缺血缺氧大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响

【目的】 探讨沉默ｃａｓｐａｓｅ－３对大鼠骨髓间充质干细胞（ＭＳＣ）在体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。【方法】 构建靶向ｃａｓｐａｓｅ－３的ｓｈＲＮＡ重组慢病毒并转染ＭＳＣ。建立缺血缺氧模型,流式细胞术和Ｈｏｅｃｈｓｔ荧光染色法检测细胞的凋亡情况。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｃａｓｐａｓｅ－３的蛋白表达,Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ检测ｃａｓｐａｓｅ－３、Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的ｍＲＮＡ表达。【结果】 重组慢病毒成功转染ＭＳＣ。缺血缺氧环境下,转染组的细胞凋亡率为（１３．６６ ± ０．２０）％,低于空载体组的（２１．８６ ± ０．４３）％和空白对照组的（２２．２８ ± ０．４８）％（Ｐ ＜ ０．０１）。沉默ｃａｓｐａｓｅ－３后ｃａｓｐａｓｅ－３表达下调,Ｂｃｌ－２表达上调,Ｂａｘ表达下调,Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ比值升高（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 沉默ｃａｓｐａｓｅ－３能显著提高ＭＳＣ在缺血缺氧环境下的存活能力。     

多药耐药基因、谷胱甘肽S-转移酶特异性siRNA逆转K562／A02细胞多药耐药.

 目的　研究多药耐药基因（mdr1）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTπ）特异性siRNA逆转K562／A02细胞多药耐药性。方法　以mdr1 mRNA第79～99和GSTπmRNA第308～327核苷酸为作用靶点，合成针对靶区域序列的siRNA，克隆入pSilence2.1-U6 neo，克隆产物为pSilence-mdr1和pSilence-GSTπ，脂质体介导下转染K562／A02细胞。用实时荧光定量PCR检测K562／A02细胞 mdr1和GSTπ mRNA的表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；MTT法检测多柔比星的半数抑制浓度（IC50）。结果　经酶切、测序分析表明，成功构建siRNA真核表达载体。经pSilence-mdr1转染后的K562／A02细胞株mdr1 mRNA表达量下降了71.5 %，从（2.8±1.65）×108拷贝／μg RNA下降至（3.9±2.37）×107拷贝／μg RNA（P＜0.01）；同时pSilence-GSTπ 作用后，K562／A02细胞 GSTπmRNA表达量较显示空载体pSilence2.1-U6 转染组下降了39.8 %，从（2.3±1.14）×105拷贝／μg RNA下降至（5.4±2.45）×104拷贝／μg RNA（P＜0.01）；流式细胞仪显示空载体pSilence2.1-U6 转染组细胞凋亡率为（11.65±4.06）%，pSilence-mdr1和 pSilence-GSTπ共转染组细胞凋亡率为（44.98±11.27）%（P＜0.01）；空载体转染组耐药指数为23，pSilence-mdr1和pSilence-GSTπ共转染组耐药指数降低为7，IC50值从转染前的（1.16±0.38）mmol／ml下降为（0.33±0.04）mmol／ml（P＜0.01）。结论　siRNA 真核表达载体pSilence-mdr1、pSilence-GSTπ对K562／A02细胞株多药耐药性具有明显的下调作用。     

强烈免疫抑制联合脐血支持治疗重型再生障碍性贫血并发感染的临床观察

 【摘要】　目的　了解重型再生障碍性贫血（SAA）患者行强烈免疫抑制联合脐血输注支持治疗中合并感染的临床特征及治疗效果。方法　回顾性分析27例应用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）+环磷酰胺（Cy）+环孢素A（CsA）免疫抑制联合脐血输注支持治疗的SAA-Ⅰ患者合并感染的患病率、细菌谱及预后。结果　27例患者并发感染的发生率为48.1 %（13例）,细菌占70.0 %（7／10例次）,以G-杆菌为主,真菌占30.0 %（3／10例次）。上呼吸道是最常见的感染部位,其次是血液和肺部。发生初次感染的中位时间为免疫抑制治疗后9.5 d（-2天至-10天）,并且初次感染时ANC多＜0.2×109／L。结论　强烈免疫抑制联合脐血输注治疗SAA-Ⅰ患者已初见疗效,感染发生率低,早期足量应用敏感抗生素可有效控制。