Na^＋／H^＋交换器-1抑制诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的可能机制

背景：肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells，PASMC)的增殖在缺氧肺动脉高压肺血管重构中起重要作用。解放军第三军医大学附属新桥医院全军呼吸研究所在前期实验中通过构建Na^+／H^+交换器-1(sodium／pmton exchanger isofom-1，Na^+／H^+exchanger isoflorm-1，Na^+／H^+ antiporter isoform-1，NHE-1)特异性核酶基因逆转录病毒载体，转染入体外培养的大鼠PASMC内表达，发现NHE-1抑制可诱导细胞内酸化而抑制PASMC增殖，并促进其凋亡。但这种促凋亡作用是通过什么途径来完成，尚不清楚。目的：探讨Bcl-2、Bax蛋白表达在NHE-1抑制而诱导大鼠PASMC凋亡中的作用。设计：分组对照实验。地点和材料：实验在解放军第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所完成。转染表达NHE-1特异性核酶基因的体外培养大鼠PASMC(PRZ细胞)、转染PLXSN空载体的大鼠PASMC(PX细胞)、未处理大鼠PASMC细胞(PA细胞)为前期实验所制备。干预：已构建NHE-1特异性核酶基因逆转录病毒载体，转染入体外培养的大鼠PASMC内表达，同时转染pLXSN空载体入另一组大鼠PASMC内，后者与未转染的大鼠PASMC细胞为对照组。用荧光指示剂(Fura-2／AM)测定法检测转染NHE-1特异性核酶基因的大鼠PASMC内Ca^2+([Ca^2+]i)变化；RT-PCR方法检测细胞内Bcl-2和Bax mRNA表达变化，免疫组化法检测细胞内Bcl-2和Bax蛋白表达变化。主要观察指标：①转染NHE-1特异性核酶基因的大鼠PASMC内Ca^2+([Ca^2+]i)变化。②细胞内Bcl-2和Bax mRNA表达变化。③细胞内Bcl-2和Bax蛋白表达变化。结果：转染NHE-1特异性核酶基因后，大鼠PASMC内[Ca^2+]i显著升高，细胞内[Ca^2+]i在PA细胞[(95．94&;#177;6．39)nmol／L]与PX细胞[(98．08&;#177;7．37)nmol／L]之间差异无显著性意义(P&;gt;0．05)，而PRZ细胞[(198．08&;#177;16．59)nmol／L]显著高于PA细胞及PX细胞，差异有显著性意义(P&;lt;0．001)。Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低(PA细胞、PX细胞、PRZ细胞的平均积分光密度分别为2．21&;#177;0．18，2．09&;#177;0．30。1．45&;#177;0．20)，Bax mRNA和蛋白表达显著增加(PA细胞、PX细胞、PRZ细胞的ABax／Aβ-actin分别为0．17&;#177;0．02，0．23&;#177;0．06，0．59&;#177;0．08)。结论：NHE-1抑制诱导的PASMC凋亡与[Ca^2+]i增加、Bcl-2表达降低及Bax表达增加有关。     

非小细胞肺癌中医药治疗进入临床研究阶段

本刊讯 国家十一五科技支撑计划“非小细胞肺癌中医药综合治疗方案的研究”目前正在积极开展多中心临床研究，该课题是由国家科技部、国家中医药管理局批准的国家级课题，由中国中医科学院广安门医院肿瘤科林洪生、花宝金教授负责，将在全国多家临床研究机构同时实施，旨在形成证据确凿、可供推广、广泛认可的非小细胞肺癌中医综合治疗方案。     

幽门螺杆菌cagA基因和胃上皮核因子-κB表达与慢性胃痛证型的关系

目的:探讨cagA阳性幽门螺杆菌和胃上皮细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达以及慢性胃痛中医证型之间的关系。方法:收集57例脾胃湿热证、24例肝气犯胃证和19例脾胃虚寒证慢性胃痛患者胃窦粘膜标本,采用特异引物PCR法检测cagA基因,免疫组化方法分析胃上皮细胞NF-κB P65蛋白的表达。结果:1.cagA+菌株检出率为44.4%(36/81),其中脾胃湿热证51.2%(22/43),肝气犯胃证36.4%(8/22)和脾胃虚寒证37.5(6/16)。2.与阴性组比较,H.pylori阳性组胃上皮NF-κB P65蛋白表达有统计学意义(P<0.05)。3.与cagA-菌株比较,CagA能提高NF-κB P65表达(P<0.05)。4.在3种中医证型之间,cagA+菌株感染率和NF-κB P65蛋白的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:H.pylori感染、CagA提高了NF-κB P65蛋白的表达,但是CagA和NF-κB P65表达不能作为预测中医证型的指标。     

基质细胞衍生因子-1在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）的表达及其与多发性骨髓瘤（MM）发病和疾病进展程度的相关性。方法以酶联免疫吸附法检测17例多发性骨髓瘤（MM）患者以及表现为浆细胞增高的6例良性疾病患者骨髓液和外周血中SDF-1的表达情况。结果MM患者骨髓液SDF-1的浓度为（2672．3±179．4）ng／L，与非MM患者的（1179．6±121．6）ng／L相比明显增高，差异有统计学意义（P〈0．01）；SDF-1的表达随MM病情的进展而增高，差异有统计学意义[Ⅰ期（1812．8±137．6）ng／L，Ⅱ期（2232．3±181．2）ng／L。Ⅲ期（2921．8±283．8）ng／L，P〈0．05]。而外周血SDF-1浓度的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论骨髓液中SDF-1的表达与骨髓瘤的发病和分期密切相关。     

案例版《医学细胞生物学》教材使用体会

细胞生物学是生命科学领域的前沿学科,为适应中医院校教学改革和教学实践的需要,笔者尝试使用了案例版医学细胞生物学教材。文章结合教学过程中的使用体会,系统地介绍了案例版教材的优点、使用特点以及在目前教学中需要注意的问题。     

肾嫌色细胞癌的诊治（附4例报告）

目的 提高肾嫌色细胞癌的诊治水平。方法 回顾性分析4例肾嫌色细胞癌患者的临床资料。男3例，女1例，年龄34—76岁，平均52岁。结果 3例患者行肾癌根治术，1例行肾部分切除术。术后病理诊断为肾嫌色细胞癌，病理分期：pT1aNxMo 1例，pT1bNoMo3例。病理分级：G1 3例，G2 1例。免疫组织化学染色：CK8（低分子量细胞角蛋白）阳性，Vimentin（波型蛋白）阴性，Hale胶体铁阳性。随访4个月至8年，平均4年。4例患者均健在，无肿瘤复发或转移。结论 肾嫌色细胞癌是一种低度恶性的肾细胞癌，影像学检查对其诊断有重要帮助，确诊有赖于组织病理学检查，手术治疗后预后较好。     

自然流产模型小鼠绒毛滋养层细胞凋亡及相关调控蛋白的表达

目的探讨自然流产模型小鼠绒毛滋养层细胞凋亡异常与自然流产的关系。方法建立正常妊娠模型CBAXBALB/c和自然流产模型CBAXDBA/2。采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL)测定两组模型孕13 d绒毛滋养层细胞凋亡情况;免疫组织化学SABC法测定两组模型孕13 d绒毛组织Bcl-2、Bax、Fas、FasL 4种凋亡调控蛋白的表达,并以MBIS-2000医用彩色病理图像免疫组织化学测量系统对其表达进行半定量分析,结果用平均灰度值表示。结果自然流产模型小鼠绒毛滋养层细胞凋亡指数明显高于正常妊娠模型(P<0.01)。Bax表达亦高于正常妊娠模型(P<0.05);FasL表达低于正常妊娠模型(P<0.01);Fas和Bcl-2表达两组无明显差异。结论早孕期绒毛滋养层细胞凋亡异常是自然流产机制之一,Bcl-2/Bax,Fas/FasL途径可能是诱导早孕期绒毛滋养层细胞凋亡的重要因素。     

环缩酚肽抑制视网膜表达VEGF及PECAM基因和血管增生

[目的]观察两种环缩酚肽衍生物(Hep-A和Hep-B)对氧诱导的小鼠视网膜表达血管内皮生长因子(VEGF)和细胞黏附分子(PECAM;ICAM-1;VCAM-1)基因的影响及血管增生的变化.[方法]建立氧诱导的血管增殖性视网膜病变模型,12 d开始给小鼠皮下注安慰剂(第1组,n=7)、Hep-A 10 mg/kg(第2组,n=6)或者Hep-B 10 mg/kg(第3组,n=6),每天两次.5 d后取出左侧眼,分离视网膜并抽提RNA,用荧光定量PCR测出上述基因含量,并分别求出每个靶基因与标准基因S16含量的比率;右眼经心脏荧光素灌注后取眼球做视网膜平铺片,用图像分析软件定量计算视网膜新生血管的面积.[结果]视网膜中VEGF/S16的mRNA比率为:第1组(0.554±0.050),第2组(0.355±0.037),第3组(0.287±0.051);PECAM/S16为:第1组(2.050±0.249),第2组(1.228±0.153),第3组(1.027±0.210).经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜中VEGF基因表达分别减少36%和48.2%(P=0.001);PECAM基因表达分别减少40.1%(P＜0.05)和49.9%(P＜0.01);而VCAM-1和ICAM-1表达无明显差异.视网膜平片检测视网膜新生血管面积:第1组为(1.06±0.03)mm2/眼,第2组为(0.17±0.01)mm2/眼,第3组为(0.11±0.01)mm2/眼;经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜新生血管的面积明显减少(P＜0.001).[结论]两种环缩酚肽衍生物均抑制氧诱导的小鼠视网膜表达VEGF和PECAM基因,并抑制其形成视网膜新生血管.     

成体干细胞移植与肾脏疾病

近年来，随着再生医学的兴起，干细胞移植成为医学领域的研究热点之一。骨髓细胞与肾脏祖细胞的共同起源，提示它们可能具有相似的分化能力：研究发现，骨髓细胞及其外周血干细胞可以分化成各型肾脏细胞，包括系膜细胞、内皮细胞、上皮细胞等。因此，干细胞移植为对各种肾脏疾病的预防及治疗提供了新的思路、本文就骨髓移植及外周血干细胞移植在肾脏疾病中的预防及治疗性研究作一综述。     

出血性蛇毒诱导血管内皮细胞凋亡的成分及作用机制研究进展

出血性蛇毒能专一性诱导血管内皮细胞(vascular endothelial cells，VEC)凋亡，研究人员已从中分离出5种VEC凋亡诱导成份，其中2种为L—aa氧化酶类，3种属于金属蛋白酶／解整联蛋白家族。研究证实前者可通过氧化VEC细胞膜上的L—leu产生H2O2而诱导其凋亡，后者则通过干扰膜整联蛋白与其配体的结合而使VEC凋亡。在由蛇毒诱导的VEC凋亡过程中，p53和bcl-2基因表达增加，且bcl-2的mRNA被剪辑成2条。已证实锚定依赖性信号分子αvβ3和磷脂信号分子PC-PLC参与该过程的信号转导。对该领域进一步研究，有望从蛇毒中纯化出或人工构建出专一地诱导肿瘤血管细胞凋亡的成分。本文总结了出血性蛇毒方面的研究进展。