幽门螺杆菌cagA基因和胃上皮核因子-κB表达与慢性胃痛证型的关系

目的:探讨cagA阳性幽门螺杆菌和胃上皮细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达以及慢性胃痛中医证型之间的关系。方法:收集57例脾胃湿热证、24例肝气犯胃证和19例脾胃虚寒证慢性胃痛患者胃窦粘膜标本,采用特异引物PCR法检测cagA基因,免疫组化方法分析胃上皮细胞NF-κB P65蛋白的表达。结果:1.cagA+菌株检出率为44.4%(36/81),其中脾胃湿热证51.2%(22/43),肝气犯胃证36.4%(8/22)和脾胃虚寒证37.5(6/16)。2.与阴性组比较,H.pylori阳性组胃上皮NF-κB P65蛋白表达有统计学意义(P<0.05)。3.与cagA-菌株比较,CagA能提高NF-κB P65表达(P<0.05)。4.在3种中医证型之间,cagA+菌株感染率和NF-κB P65蛋白的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:H.pylori感染、CagA提高了NF-κB P65蛋白的表达,但是CagA和NF-κB P65表达不能作为预测中医证型的指标。     

白头翁正丁醇提取物对小鼠肝损伤保护研究

目的：通过实验观察白头翁正丁醇提取物对肝损伤小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）与天门冬氨酸转氨酶（AST）及肝脏系数,肝组织中丙二醛（MDA）与黄嘌呤氧化酶（XOD）及谷胱甘肽还原酶（GSH）和肝组织病理变化的影响,探讨保护作用机理。方法：采用随机分组,①正常对照组：喂饲普通饲料,灌胃生理盐水1mL/100g·d;②急性肝损伤模型组：灌胃生理盐水1mL/100g.d;③葵花护肝片组：灌胃0.5%葵花护肝片1mL/100g·d;④白头翁正丁醇提取物低剂量组：灌胃5%白头翁正丁醇提取物1mL/100g·d;⑤白头翁正丁醇提取物中剂量组：灌胃10%白头翁正丁醇提取物1mL/100g·d;⑥白头翁正丁醇提取物高剂量组：灌胃15%白头翁正丁醇提取物1mL/100g·d。以上6组分别每d灌胃给药（ig）1次连续灌胃15d后,除正常对照组外,其它组小鼠灌胃0.1%CCl花生油溶液10mL/kg禁食不禁水,24h后造模成功,分别进行生化测定及形态学检查实验观察效果。结果：白头翁正丁醇提取物对急性肝损伤小鼠肝脏保护作用明显,对肝脏轻度肿胀有缓解作用;降低肝组织中丙二醛（MDA）与黄嘌呤氧化酶（XOD）水平,谷胱甘肽还原酶（GSH）活力提高显著;对肝脏组织结构有明显保护作用,对四氯化碳（CCl4）急性肝损伤保护作用显著。结论：白头翁正丁醇提取物对小鼠肝脏组织结构有保护作用,对四氯化碳（CCl4）急性肝损伤保护作用显著,降低肝组织中丙二醛（MDA）与黄嘌呤氧化酶（XOD）水平,提高谷胱甘肽还原酶（GSH）活力。     

Ki67抗原在Hp感染GES-1细胞中表达及半夏泻心汤对其表达的影响

目的观察幽门螺杆菌感染GES-1细胞后Ki67抗原量的变化,探讨半夏泻心汤对Ki67抗原表达的影响。方法实验分正常组、模型组和半夏泻心汤组,以1∶50的细胞∶细菌比例感染GES-1细胞,用半夏泻心汤含药血清培养48 h。MTT法检测细胞增殖。免疫组化检测Ki67抗原。结果与正常对照组比较,模型组的MTT A值和Ki67抗原阳性细胞率均显著降低(P0.05);与模型组比较,半夏泻心汤组MTT A值和Ki67抗原阳性细胞率显著提高(P0.05)。结论Hp可抑制GES-1细胞增殖,半夏泻心汤能降低细菌的抑制作用。     

蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型6对心脏HERG钾通道的调控作用

目的旨在阐明蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型6(tyrosine protein phosphatase non-receptor type 6,PTPN6)是否对心脏HERG钾通道电流具有调控的作用。方法聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术构建pcDNA3.1-PTPN6-EGFP质粒;应用脂质体Lipofectamine2000将各种质粒转染进入HEK293细胞;应用膜片钳技术分别检测对照组(pcDNA3.0-HERG单独转染HEK293细胞)、PTPN6过度表达组(pcDNA3.0-HERG和pcDNA3.1-PTPN6-EGFP共转染HEK293细胞)以及抑制剂组(pcDNA3.0-HERG和pcDNA3.1-PTPN6-EGFP共转染HEK293细胞,并加入蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂正钒酸钠)的HERG钾通道的脉冲电流最大电流密度、尾电流最大电流密度以及去激活时间常数Tau等。结果成功构建了pcDNA3.1-PTPN6-EGFP质粒,测序结果表明基因序列正确,荧光显微镜下可观察到HEK293细胞中绿色荧光蛋白表达;全细胞膜片钳电生理检测发现,PTPN6过度表达组的脉冲电流最大电流密度[(36.42±2.76)pA/pF]、尾电流最大电流密[(84.73±7.18)pA/pF]均较对照组[(45.92±3.18)pA/pF、(108.43±7.98)pA/pF]显著降低,差异有统计学意义(P0.05);而抑制剂组脉冲电流最大电流密度、尾电流最大电流密度[(47.10±2.96)pA/pF、(110.52±7.87)pA/pF]均较PTPN6过度表达组明显增大,差异有统计学意义(P0.05);PTPN6过度表达组失活时间常数Tau[(785.59±90.05)ms]较对照组[(440.7±49.49)ms]明显延长,差异有统计学意义(P0.05)。结论 PTPN6过度表达能使HERG钾通道的电流密度降低,且这一作用能被酪氨酸磷酸酶抑制剂逆转,提示PTPN6能通过催化HERG钾通道去磷酸化而发挥负性调控HERG钾通道电流的作用。     

半夏泻心汤对幽门螺杆菌致人胃黏膜上皮细胞GES-1凋亡的影响

[目的]观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌致人胃上皮细胞GES-1调亡的干预作用。[方法]实验分正常组、感染组和半夏泻心汤组,感染组和半夏泻心汤组按50∶1的细菌∶细胞比例感染GES-1细胞,正常组和感染组均以正常鼠血清进行培养,半夏泻心汤组以含药鼠血清进行培养,采用MTT法检测细胞的增殖情况,DAPI染色分析细胞凋亡情况。[结果]与正常组比较,感染组的细胞增殖显著下降（P〈0.05）,细胞凋亡明显提高（P〈0.05）。与感染组相比,10%、15%的含药血清能促进细胞增殖（P〈0.05）,半夏泻心汤组能降低细胞凋亡（P〈0.05）。[结论]半夏泻心汤具有改变幽门螺杆菌对胃黏膜上皮细胞凋亡的作用。     

陈红治疗咳嗽经验

陈红教授系湖北中医药大学附属武汉市中医医院主任医师,硕士研究生导师,普内科主任.早年曾师承著名老中医杜家经教授,业医30余载,熟谙经典,治学严谨,医技精湛,擅长呼吸及内科杂病的诊治,尤其对慢性咳嗽的诊治独具匠心,多倡导中药的“简、便、验、廉”特点,用药上往往屡起沉疴,出奇制胜.     

八味方对小鼠免疫功能的影响

目的 观察八味方对小鼠免疫器官和吞噬功能的影响.方法 腹腔注射环磷酰胺(CTX)造成免疫功能低下模型;连续灌药7d后检测正常和免疫功能低下组小鼠的脾指数、胸腺指数和巨噬细胞吞噬功能.结果 与结论 八味方能显著提高免疫功能低下组小鼠脾指数、胸腺指数和巨噬细胞吞噬功能(P＜0.01),而正常组小鼠,虽能提高但不显著.     

半夏泻心汤对幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞GES-1生长的影响

目的:观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞GES-1增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞的增殖。以细胞细菌不同比例体外共培养48 h,以确定两者的合适比例。用不同浓度的含药血清培养感染细胞。结果:细胞:细菌比例在1∶10以上时,Hp显著抑制细胞的增殖(P<0.05),而且呈量效关系;与模型组相比,半夏泻心汤能降低细菌对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:Hp抑制细胞增殖,半夏泻心汤能扭转细菌的抑制作用。     

紫外可见分光光度法测定阿托伐他汀钙片含量

目的建立紫外可见分光光度法测定阿托伐他汀钙片含量。方法采用246nm波长、乙醇为空白对照。结果阿托伐他汀钙片的线性范围为3．13～20．90mg·L。（r=0．9999）,平均回收率为98．7％、RSD为0．9％（n=9）。结论该方法简便、快速、准确,可用于阿托伐他汀钙片的含量测定。     

PBL教学法在人体寄生虫学教学中的应用与体会

以问题为基础的教学法（problem-based learning,PBL）,是以学生为主体的新型教学模式。1969年由美国神经病学教授Barrows在加拿大的McMaster大学首创,经过30多年的完善和发展,已成为国际流行的一种医学教学模式,